甜柿密植丰产栽培技术

<正>甜柿果实成熟后不需后熟即可食用,且可溶性固形物含量高,果肉甜脆爽口,深受消费者欢迎,市场前景十分广阔。近10余年来,我国柿主产区陆续引入一些日本甜柿品种,在各地进行试栽观察,有的品种正在生产中推广,对改善我国柿品种结构起到了积极的作用。为探讨甜柿丰产栽培的综合管理技术,我们于1997-2003年进行了本项试验,取得良好的效果,现将试验结果简介如下。     

鼠层粘蛋白α5链E3、LG4、LG5片段的克隆及表达

从鼠的肝脏组织中提取总 RNA,采用 RT- PCR获得了鼠层粘蛋白 ( laminin)α5链的 E3 ( L G4 - 5)、L G4 和 L G5等 3个基因片段 ,与 NCBI数据库参考序列相比 ,同源性在 99%以上。将 E3 ( L G4 ,5)、L G4 和 L G5定向克隆到原核高效表达载体 Pet- 2 8a中 ,构建 Pet- 2 8a- E3 、Pet- 2 8a- L G4 、Pet- 2 8a- L G5等 3个原核表达质粒。将表达质粒转化表达受体菌 BL2 1中 ,IPTG诱导表达。收集菌液进行 SDS- PAGE电泳、Western- blotting分析 ,结果显示 ,这 3段基因在原核细胞中成功表达 ,薄层扫描显示表达蛋白占细胞总蛋白的 2 0 %以上。大量提取包涵体 ,纯化后免疫家兔 ,8周后得多克隆抗体 ,间接 EL ISA在抗体稀释到 1∶ 1 2 80 0时仍为阳性     

HBV/HAV复合抗原基因在CHO细胞中的表达

为探讨HBV／HAV复合疫苗的可行性，利用DNA重组技术将HBsAg与HAW复合多表位抗原基因VPX进行融合，插入到真核表达质粒pVAX1多克隆位点，构建成核酸表达疫苗pVAX1／SVPX，将其转染CHO细胞。转染细胞培养48h后，进行RTPCR、Western-blot、ELISA分析，结果表明HBV／HAV复合抗原基因SVPX能够在CHO细胞内转录、表达，融合蛋白具有HBV和HAV抗原的特性。     

马立克氏病毒感染鸡的端粒酶活性及其病毒血症的动态研究

1日龄非免疫鸡分别人工感染马立克氏病病毒(MDV)I型国际标准强毒GA株、I型MDV疫苗毒CVI988株后,从第5日起,定期采血,用本实验室改进的Trap法和Bandscan软件测定、分析并计算感染过程中其外周血液单核细胞(PBMC)的端粒酶活性变化;同时用抗MDV囊膜糖蛋白B(gB)单克隆抗体介导的间接免疫荧光试验检测MDV在外周血液单核细胞中的感染状况。结果表明,自接种I型强毒GA株后,端粒酶在没有临床症状和可视病变出现之前就可检测到,并且随着MDV感染后日龄的增加逐渐升高,在25日龄时其相对活力达到最高值;而接种CVI988后,整个生长过程端粒酶活性均呈阴性。从感染第5日到鸡发病死亡前,都能检出GA株引起的病毒血症,并于18～22 d左右达到高峰;而接种CVI988株后第5日到第20日止,能检出病毒血症,并于第10～12天左右达到高峰。     

一例兔副伤寒病的诊治

正2011年12月份以来,赵县獭兔养殖户中出现多例以败血症、急性死亡、下痢和流产为特征的传染病。本病传播速度快,发病率和死亡率都很高,给养兔户带来了很大的经济损失。现将笔者诊治该病的体会简述如下,供大家参考。1发病情况2011年12月3日,赵县眭家营某养兔户带5只病死的獭兔来我局兽医门诊就诊。     

一例犬出血性肠炎的诊治

正2012年4月份以来,赵县的养犬户出现多例以拉稀红色稀便为特征的疾病,给养犬户带来很大麻烦。先将笔者诊治该病的体会简述如下,供大家参考。1发病情况2012年4月3日,赵县赵家庄赵某到笔者所在兽医门诊为自己家的犬就诊,赵某介绍自家的犬出现精神不振、不吃、拉稀     

鸡染色体标本制备技术条件的优化

染色体是基因的载体，细胞的染色体数目和结构是重要的遗传学指标，基因定位的染色体原位杂交；染色体组型分析；受精过程中染色体的行为；核型观察等这些研究，制备染色体标本无疑是这些实验成功与否的先决条件。     

尼帕病毒和亨得拉病毒核蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

尼帕病毒（Nipahvirus，NiV）和亨得拉病毒（Hendravirus，HeV）是近年来出现的2种新的高致病性副粘病毒，在我国尚未发现。为防范2种病毒在我国的出现，本研究开展了前瞻性工作，成功研制了针对2种病毒核蛋白（N）的单克隆抗体，可用于病毒监测与诊断。首先利用大肠杆菌表达的2种病毒N蛋白免疫BALB／c小鼠，细胞融合后应用间接免疫荧光的方法对杂交瘤细胞克隆进行筛选，获得了5株N蛋白特异单抗。单抗腹水的抗体效价均超过2×10^5，培养上清抗体效价1：64～1：256。Western—blot和间接免疫荧光试验证明，5株单抗均特异针对N蛋白，其中1株（H4D11）只与HeVN蛋白反应，而不与NiVN蛋白反应，表明它具有鉴别2种病毒的能力。所研制的单抗对建立2种病毒的检测技术，用于动物监测，以防范2种新发传染病在我国流行具有重要意义。     

广西钦南区：海鸭唱响增收曲

日前，钦州市钦南区康熙岭镇横山村黄合才刚刚卖了一批海鸭蛋，存款又增添上万元。自2008年开始养殖海鸭后，他家年产鸭蛋近35吨，年产值25万多元，过上了小康生活。他高兴地对记者说：“我养了海鸭3000多羽，每一羽下的都是‘金蛋’啊!”像黄合才一样，钦南区沿海不少农民靠海吃海，利用丰富的滩涂资源及沿海咸酸田养海鸭，走出一条增收致富好路子。     

潜伏期马立克氏病病鸡血清型病毒L-meq、meq基因的比较及遗传分析

从潜伏期感染马立克氏病病毒(MDV)鸡淋巴组织中提取基因组DNA,采用梯度PCR的方法获得MDV的L-meq、meq基因,将其插入pMD18-T克隆载体,经测序并进行了序列分析。结果表明,L-meq、meq基因同源性很高,L-meq中只有180bp与meq不同。但是采用同样的方法在发病期病鸡淋巴组织中却只能获得MDV的meq基因。为了进一步研究发病期L-meq基因消失的原因,试验对L-meq、meq基因的氨基酸序列的结构域进行了分析。结果表明,L-meq基因中含有9个PRR(proline-rich-reapts)区域,meq中含有6个PRR区域,从而推断PRR区域可能与基因的转录激活及调控病毒DNA复制的功能有关,该180bp插入序列也许能解释初期感染MDV不致瘤的原因,同时也意味着L-meq基因对于潜伏期的维持是必要的。