马立克氏病毒感染鸡的端粒酶活性及其病毒血症的动态研究

1日龄非免疫鸡分别人工感染马立克氏病病毒(MDV)I型国际标准强毒GA株、I型MDV疫苗毒CVI988株后,从第5日起,定期采血,用本实验室改进的Trap法和Bandscan软件测定、分析并计算感染过程中其外周血液单核细胞(PBMC)的端粒酶活性变化;同时用抗MDV囊膜糖蛋白B(gB)单克隆抗体介导的间接免疫荧光试验检测MDV在外周血液单核细胞中的感染状况。结果表明,自接种I型强毒GA株后,端粒酶在没有临床症状和可视病变出现之前就可检测到,并且随着MDV感染后日龄的增加逐渐升高,在25日龄时其相对活力达到最高值;而接种CVI988后,整个生长过程端粒酶活性均呈阴性。从感染第5日到鸡发病死亡前,都能检出GA株引起的病毒血症,并于18～22 d左右达到高峰;而接种CVI988株后第5日到第20日止,能检出病毒血症,并于第10～12天左右达到高峰。     

湖北稻区穗腐病病原ITS鉴定及其生物学特性分析

穗腐病在湖北省内有少量发生,为防止病害流行与危害扩大,有必要了解引起该病害的病原真菌及其特性。采集病害样本进行病原真菌的分离,通过形态学和ITS进行鉴定、分类,并开展生物学特性研究。结果表明,湖北稻区穗腐病害病原真菌包括岭南聚孢霉(Clonostachy epichloe)(菌Ⅰ)、稻毛锥孢(Alternaria padwickii)(菌Ⅳ)和稻黑孢菌(Nigrospora oryzae)(菌Ⅴ)3类菌株。生物学特性研究结果表明,3类菌的最适生长温度均为25℃,极端低温(5℃)和极端高温(40℃)下3类菌的生长几乎停止;通过改变pH值(5.0～9.5)研究病菌生长的最佳酸碱环境,发现菌Ⅰ和菌Ⅳ培养基pH值的改变会影响菌落的生长,2类菌生长的最佳环境均偏碱,而菌Ⅴ的生长不受pH值的影响;3类菌PDA培养基中最适琼脂质量浓度不同,菌Ⅰ的最适琼脂质量浓度为20 g/L,菌Ⅳ为25 g/L,菌Ⅴ为10 g/L;菌Ⅰ生长最适宜的氮源为硝酸铵,菌Ⅳ为黄豆粉,菌Ⅴ为黄豆粉和甘氨酸,3类菌的最适碳源均是甘露醇。综上,湖北稻区穗腐病的病原具有多样性,其生物学特性也存在差异。     

含腐蚀缺陷占压管道的安全评估

针对含腐蚀缺陷管道因地面占压带来的安全问题,基于ABAQUS软件建立了地基-管道-堆载三维有限元模型,探讨了含腐蚀缺陷占压管道的应力和变形情况,研究了管道埋深、管道内压、堆载荷载以及腐蚀缺陷位置对埋地管道力学性能的影响。结果表明:增加管道埋深可以有效缓解管道应力分布,但同时会增大开挖工程量;当管道内压达到一定程度时,腐蚀缺陷作用下管道最大应力主要由管道内压控制,地面堆载荷载对其影响不大;管土切向摩擦因数对埋地管道力学性能影响较为显著,管道应力随着管土切向摩擦因数增加而近似线性增大;当腐蚀缺陷相对于管道截面的角度位置为5:15方向时,含腐蚀缺陷占压管道的应力最大。     

管道对接环焊缝裂纹的防治措施

针对甬沪宁进口原油管道工程开工初期对接环焊缝常出现裂纹的现象,结合射线检测和解剖结果,对裂纹产生的位置和断口特征进行了具体分析.通过对下向焊焊接工艺和焊口的受力分析,解析出其产生裂纹的原因,提出了相应的防止对策.     

HBV/HAV复合抗原基因在CHO细胞中的表达

为探讨HBV／HAV复合疫苗的可行性，利用DNA重组技术将HBsAg与HAW复合多表位抗原基因VPX进行融合，插入到真核表达质粒pVAX1多克隆位点，构建成核酸表达疫苗pVAX1／SVPX，将其转染CHO细胞。转染细胞培养48h后，进行RTPCR、Western-blot、ELISA分析，结果表明HBV／HAV复合抗原基因SVPX能够在CHO细胞内转录、表达，融合蛋白具有HBV和HAV抗原的特性。     

接种不同毒力马立克氏病毒对鸡端粒酶活性和致病性的影响

以MDV京-1株和GA株诱发的MD为肿瘤模型,跟踪测定了鸡生长过程中脾脏组织的端粒酶活性变化。结果表明,端粒酶活性在没有临床症状和可视病变出现之前便可检测到。随着MDV感染日龄的增加逐渐升高,在其相对活力达到最高值后,总体水平略有下降,但依然存在端粒酶活性;而疫苗株CVI988接种后,整个生长过程其端粒酶均呈阴性。发生MD病变的鸡生长迟缓,中枢性免疫器官胸腺和法式囊严重萎缩,并出现体内肿瘤。无论是病变程度,还是死亡个数和时间,京-1株的致病性均高于GA株。     

HAV表位抗原与HBV核心抗原融合基因的原核表达

为探讨甲肝DNA疫苗的可行性,利用DNA重组技术将甲肝病毒（HAV）复合多表位抗原基因VPx插入到乙肝病毒核心抗原（HBcAg）基因中,得到CVPx融合基因。将CVPx克隆到原核表达载体pET-28a（＋）中,并在大肠杆菌中进行表达,表达的蛋白进行Western Blot及ELISA检测,结果表明：融合蛋白具有甲肝病毒表位抗原的反应原性。     

细菌素及其在食品安全中的应用

细菌素是细菌产生的抗细菌蛋白质,杀死或抑制其他细菌的生长.许多乳酸菌产生多种多样不同的细菌素,有作为天然、安全食品防腐剂的潜力.nisin是目前惟一用作食品防腐剂的细菌素,有50多个国家许可将其作为食品添加剂.近年来,对细菌素的研究有了很大的进展,本文就细菌素的分类、生物合成和作用方式、细菌素与抗生素的区别、安全性及在食品中的应用等方面进行综述.     

细菌素应用在食品中有效且安全

许多细菌能产生抗细菌肽或蛋白，这种由细菌产生的抗细菌蛋白或肽称为细菌素。细菌素由核糖体合成，它能杀死与产生菌种属相近的其他细菌。在革兰氏阳性细菌中，乳酸菌（Iactic acid bacteria，LAB）具有作为有效天然食品防腐剂的巨大潜力。细菌素已被用于栅栏技术，多种技术的联合应用产生了更有效的防腐效果。     

PrP~C蛋白对小鼠学习与记忆能力的影响

利用本实验室构建的C57BL/6背景下的PRNP基因敲除小鼠模型与C57BL/6野生型小鼠,通过避暗试验以及Morris水迷宫试验观察小鼠的行为。以此来研究PrPC蛋白的缺失对于小鼠学习与记忆能力影响,进而反映PrPC蛋白对于神经系统功能的影响。结果显示,PRNP敲除小鼠在避暗试验中对于电刺激的记忆比野生型小鼠强,且在第3天差异显著（P〈0.05）。在Morris水迷宫定位航行试验中,敲除鼠的逃避潜伏期明显长于野生小鼠,第3、5、6天差异显著（P〈0.05）。空间探索试验中,PRNP敲除鼠与野生小鼠相比较,首次穿越虚拟平台的时间以及穿越平台的次数差异并不显著。研究表明,PrPC蛋白缺失对于小鼠主动回避伤害的记忆能力有所提高,但是对于空间立体学习和记忆能力损害很大。