马铃薯栽培品种‘合作88’细菌人工染色体文库的构建与评价

以四倍体马铃薯栽培品种‘合作88’培养12 ~ 15 d苗龄的幼嫩叶片为试材,提取高分子量基因组DNA,利用限制性内切酶HindⅢ部分酶切后回收100 ~ 300 kb片段,连接到载体CopyControlTM pCC1BACTM的HindⅢ位点上,构建了细菌人工染色体（BAC）文库。该文库约由850 000个克隆组成,空载率约2.08%,保存在1 700个混合池中,克隆插入片段平均大小约为90 kb,覆盖单倍型马铃薯基因组约85倍。随机挑取6个BAC克隆连续培养5 d,提取DNA进行HindⅢ完全酶切检测,确认不同培养时间的BAC克隆的指纹图谱完全一致,表明文库较好的稳定性。BAC文库的构建为马铃薯重要农艺性状基因克隆、基因组测序以及比较基因组研究等奠定了基础。     

改进平湖法的时间步长对排涝模数的影响探讨

改进平湖法是排涝规划中感潮河段水闸水力计算的重要方法。以上海某圩区为背景,针对改进平湖法在实际计算中时间步长的划分问题,研究了不同的时间步长对设计排涝模数的影响,得出在一定的范围内,随着时间步长的增大,排涝模数也增大的结论,并详细分析了产生这些结果的原因。可为利用改进平湖法进行水力计算时选取合理的时间间隔提供依据和参考。     

马铃薯种质资源组培苗耐盐性评价与耐盐种质筛选

以前期从710份种质中筛选出的29份对盐比较不敏感的马铃薯种质为材料,在含0.75%NaCl的MS培养基上培养20 d后测定组培苗的植株高度、单株根数、单株鲜重和叶片叶绿素含量,以这四个指标的测定值及其耐盐系数为评价依据,结合各指标耐盐系数及测定值隶属函数的聚类分析,对供试种质的耐盐性进行综合评价,筛选出2份耐盐性较强的种质SD400和SD751。在1.00%和1.25%NaCl胁迫下,对这2份高度耐盐种质的耐盐性进行进一步鉴定,结果表明,对1.00%NaCl胁迫仍有一定的适应性,SD400和SD751叶绿素含量分别为对照的27.52%和53.59%,株高分别为对照的21.92%和29.05%,单株根数分别为对照的26.61%和45.07%;但在1.25%NaCl胁迫下仅SD751有微量生长。     

磁性玉米秸秆生物炭对水体中Cd的去除作用及回收利用

以农田生态系统废弃农作物秸秆资源化利用为前提,以生物炭去除水体重金属镉(Cd)污染及其回收利用为目的,该文以500℃裂解的原始玉米秸秆生物炭(MSB,maize straw biochar)和磁性玉米秸秆生物炭(MMSB,magnetic maize straw biochar)试验材料,在2种生物炭的表面性状进行表征的基础上,探究了不同吸附条件下生物炭对污染水体中Cd(Ⅱ)的吸附去除作用及其回收利用的可能性。结果表明:MSB和MMSB对Cd(Ⅱ)的吸附量在pH值为5时达到最大,其最大吸附量分别为27.52和33.45 mg/g;当MSB和MMSB添加量为1.4和0.8 g/L时,对Cd(Ⅱ)的去除率分别可达85.15%和95.48%;Langmuir方程能更好地模拟等温吸附行为,MSB和MMSB达到平衡时的最大吸附容量分别为26.03和43.45 mg/g,趋近实际值;动力学数据与二级动力学方程拟合度更高,MSB和MMSB的平衡吸附量Qe理论值分别为13.42和24.31 mg/g;MMSB对其表面吸附Cd(Ⅱ)的解吸率均显著低于MSB。磁性生物炭对Cd(Ⅱ)的吸附效率和固着能力增强可能与其较高的pH值、更大的比表面积、更多的极性含氧官能团有关。此外,在外部存在磁场的情况下,磁性生物炭可以通过磁力作用加以回收再利用。研究成果对促进农业废弃物的资源化利用以及水体环境中重金属净化技术的进步均有重要意义。     

山东省马铃薯主产区氮肥利用率比较分析

通过调查山东省马铃薯主产区肥料施用状况,分析不同地区的氮肥偏生产力,为马铃薯高产、高效、优质生产以及合理施肥提供参考。分析结果表明,不同地区马铃薯氮肥偏生产力差异较大,从高到低分别是胶州164. 25 kg/kg、安丘146. 93 kg/kg、平度129. 87 kg/kg、肥城119. 50 kg/kg、滕州100. 13 kg/kg。根据国家双减目标,针对山东省实际情况,提出多施有机肥、增加追肥次数、减少氮肥施用量等措施,提高氮肥偏生产力。     

不同耕作方式对冬小麦田杂草群落的影响

通过田间定位试验,运用群落生态学方法研究了5种耕作方式下冬小麦田杂草的群落结构及其物种多样性。结果表明,与旋耕相比,免耕及免耕覆盖秸秆区多年生杂草种类较多,但处理间物种丰富度差异不显著。3种免耕处理区麦家公综合优势度比显著低于旋耕区,荠菜综合优势度比则显著提高,旋耕秸秆还田可显著降低麦家公的综合优势度比、提高播娘蒿的综合优势度比。不同耕作方式对冬小麦田杂草群落的物种多样性影响显著,通过群落相似性指数(Bray-Curtis index)及聚类分析,5种耕作方式处理区杂草群落可以分为2类,Ⅰ类包括NT、NTS₆₀₀₀、NTS₃₀₀₀,耕作方式为免耕,Ⅱ类包括RTS、RT,耕作方式为旋耕,其中,Ⅰ类的物种丰富度略大,物种多样性及群落均匀度均显著大于Ⅱ类,而群落的优势度显著小于Ⅱ类。     

IFNGR在山羊腹腔肠系膜前神经节的表达

【目的】为了解山羊腹腔肠系膜前神经节（celiac cranial mesenteric ganglion, CCMG）是否具备接受γ-干扰素（interferon-γ, IFN-γ）作用的条件,即是否有IFN-γ受体（interferon-γ receptor, IFNGR）存在。【方法】取健康雌、雄性成年山羊的CCMG,经40 g·L^-1多聚甲醛磷酸缓冲固定液固定4 h后,用自来水冲洗10 h,经梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋后,制作石蜡切片。石蜡切片分4套：第1套做H.E.染色;第2套经脱蜡复水,抗原热修复后,再进行免疫组化SP法染色;第3套经免疫组化SP法染色后用苏木精复染;第4套用作阴性对照组。染色后在光学显微镜下观察记录切片,使用Motic数码显微镜下拍照后,对图片分析处理,计算CCMG的IFNGR相对表达量。将相对表达量数据用SPSS18.0软件分析处理,并利用单因子方差分析（One-way ANOVA, LSD）进行显著性检验。取健康雌性、雄性成年山羊的CCMG,经充分研磨后,使用总RNA提取试剂盒提取总RNA,再以牛的IFNGR1 cDNA序列为模板设计IFNGR1的引物,克隆山羊IFNGR1 cDNA序列并进行扩增。将扩增产物使用琼脂糖凝胶电泳检测是否有目的条带,并进行DNA双向测序。将测序结果在NCBI上进行比对和确认,并与其他的物种的序列进行了同源性比对。【结果】免疫组化染色显示,在CCMG内IFNGR免疫阳性产物分布广泛,在神经元胞体、卫星细胞及神经纤维中均有不同程度的着色。其中神经元均为IFNGR免疫阳性。几乎所有的神经元胞质为黄褐色,IFNGR呈中等阳性,仅有少数神经元胞质染色弱为淡黄色,IFNGR呈弱阳性;在神经元细胞核中,核质部分明显呈棕褐色,IFNGR为强阳性,而核仁染色相对较弱或无着色,IFNGR为弱阳性或阴性。在非神经元结构中,卫星细胞染色呈棕褐色或棕色,IFNGR为强阳性或中等阳性。神经纤维和血管内皮细胞为黄褐色或淡黄色,IFNGR为中等阳性或弱阳性。图像分析表明与其他非神经元结构成分相比,神经元胞体IFNGR的相对表达量差异性极显著（P＜0.01）。PCR检测结果显示,IFNGR1 PCR产物的泳道在300 bp与400 bp处看到一个清晰的白色条带。测序结果显示,在山羊CCMG中克隆出了376 bp的IFNGR1的部分cDNA序列。通过在NCBI上与其他物种的基因序列同源性比对显示,这段序列与绵羊的同源性最高（98%,XM_004011371.1）,其次为牛（97%,NM_001035063.1）,野猪（84%,NM_001177907.1）,家兔（73%,XR_085137.1）,与褐家鼠（66%,NM_053783.1）的同源性最低。【结论】在山羊CCMG中有IFNGR的表达与分布,并且IFNGR主要在交感节后神经元表达与分布。所以CCMG具备对IFN-γ刺激做出反应的条件,CCMG的交感节后神经元可能是 IFN-γ作用的主要靶细胞,提示山羊CCMG可能作为IFN-γ对胃肠道免疫调节途径和自主神经对胃肠道调节的神经途径之间相互协调的关键点。     

色差仪光源参数对猪肉肉色测定结果的影响

猪肉肉色是直接反映猪肉品质的一项重要感官指标.在肉色测定中,使用色差仪可测得连续的不受外界光线影响的色差值.然而在肉色测定中使用不同的设定参数如光源、镜面反射等.对测量结果有很大的影响,且在不同实验室间的肉色测定结果也没有可比性.为此,统计分析了浙江大学动物遗传育种实验室近年来测定的猪肉肉色数据,研究和探讨了表色空间、镜面反射、光源和视场角等参数对测定结果的影响.结果显示,光源和镜面反射对颜色测定值的影响很大,进而确定测定猪肉肉色的最佳参数设定应为CIE L* a*b*系统、光源A和10视场角.     

miR-let-7a在大白猪甲状腺中的表达及其对甲状腺细胞凋亡的影响

microRNA(miRNA)是一类内源性的非编码RNA,广泛参与细胞的生长发育、分化、增殖和凋亡等生物学过程.为了研究miR-let-7a对猪(Susscrofa)甲状腺的生长发育及甲状腺细胞凋亡的调控作用,本研究利用免疫荧光技术鉴定了大白猪的甲状腺组织及体外培养的甲状腺细胞,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测了miR-let-7a在不同生长阶段大白猪甲状腺组织中的表达量变化,通过转染miR-let-7a mimics并利用流式细胞术检测了转染组与未转染组的甲状腺细胞凋亡率的差异性,同时预测了miR-let-7a与细胞凋亡相关基因的靶向关系.结果发现,甲状腺组织和细胞中的甲状腺球蛋白(thyroglobulin,TG)发出绿色荧光,表明体外培养的甲状腺细胞功能正常.qRT-PCR结果显示,胚胎期随着胚龄的增加,miR-let-7a表达量逐渐增加.出生后miR-let-7a表达量下降,于60日龄达生长期最小值,之后有所上升,至90日龄后其表达量再次下降,120日龄后随日龄的增加let-7a表达量呈现逐渐增加的趋势.凋亡结果发现,和对照组相比,转染组细胞凋亡率明显升高(P＜0.05).根据研究结果推测,miR-let-7a的表达直接或间接影响了甲状腺细胞凋亡的调控过程.研究结果为深入研究猪甲状腺miR-let-7a的功能机制提供了有益的线索.