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1.
本研究以十足目虹彩病毒(Decapod iridescent virus 1, DIV1)主要衣壳蛋白基因为靶序列设计引物,建立了DIV1的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)检测方法,并以pMD18-DIV1质粒标准品为模板对该方法的检测灵敏度、检测特异性等进行了评估。结果显示,此方法最适反应温度为64.4℃,优化后的25 μl反应体系中包含2.5 μl 10×Isothermal amplification buffer、4.0 mmol/L Mg2+、1.2 mmol/L dNTPs、6.4 U Bst 2.0 WarmStart® DNA聚合酶、0.8 μmol/L EvaGreen®和4.4 μl ddH2O。该方法检测灵敏度下限为3.54×102拷贝/反应;与虾肝肠胞虫(EHP)、致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VpAHPND)、对虾偷死野田村病毒(CMNV)、传染性皮下及造血组织坏死病病毒(IHHNV)、白斑综合征病毒(WSSV)、桃拉综合征病毒(TSV)和黄头病毒(YHV)等主要虾类病原没有交叉反应;具有较好的重复性和稳定性。以GeneFinder®替换EvaGreen®并将其预置于反应管内,结合上述扩增方法可实现对DIV1的现场快速高灵敏检测。本研究建立的DIV1-LAMP实时荧光定量和现场检测方法具有灵敏、特异和快速等特点,为近几年新发虾类病原DIV1的定性、定量以及现场快速检测提供了新的技术选择,有利于对虾养殖业中开展DIV1的监测、预警和防控。 相似文献
4.
为探究中药复方多糖对不同MHC B-LβII基因型鸡的免疫调节作用受体的影响,采用PCR-SSCP方法将黄麻肉鸡按不同MHC B-LβII基因型分组,于28日龄在各组随机取5只试验鸡,采集外周血,分离淋巴细胞,与终浓度为0.5、1、2μg/m L的TLR4抗体共培养1 h后,分别加入终浓度为200、100、50、25、0μg/m L的中药复方多糖共培养24 h,采用ELISA法检测不同MHC B-LβII基因型鸡外周血淋巴细胞培养上清液中IL-6、TNF-α和NF-κB的质量浓度。结果表明:加入TLR4抗体后,中药复方多糖促进淋巴细胞分泌IL-6、TNF-α和NF-κB的能力受到抑制,并且随着TLR4抗体浓度的增加,抑制作用增强。试验表明TLR4是中药复方多糖的免疫调节作用受体之一,中药复方多糖可能通过与淋巴细胞表面TLR4结合,经TLR4/NF-κB信号通路活化转录因子NF-κB,促进IL-6和TNF-α的分泌发挥其免疫调节作用。 相似文献
5.
为了筛选出有利于荔枝贮藏的复合保鲜剂,以‘井岗红糯’荔枝果实为试验材料,通过正交试验研究了不同浓度的油菜素内酯(brassinolide, BL)和曲酸(kojic acid, KA)配比对采后荔枝果实的保鲜效果。结果表明,在25 ℃贮藏条件下,对荔枝果实的最佳保鲜配方为:油菜素内酯40 μmol/L、曲酸35 mmol/L,浸泡时间为3 min,该复合保鲜剂配方能较好地抑制荔枝果实褐变和腐烂,降低果皮相对电导率、果皮pH和果皮丙二醛(malonaldehyde, MDA)含量,延缓果肉总可溶性固形物(total soluble solids, TSS)和维生素C(vitamin C, VC)含量的下降,维持较高的果皮色度L *值、a *值、C *值和花色苷含量,抑制了多酚氧化酶(polyphenol oxidase, PPO)、过氧化物酶(peroxidase, POD)及漆酶(laccase, Lac)的活性。 相似文献
6.
指出了枪马金矿位于河南灵宝小秦岭地区,其矿脉严格受断裂构造控制,构造产状沿走向发生改变和构造缓倾区是最有利的构造成矿位置.探讨了利用suffer软件的绘图功能,简单、快捷地识别和判断构造产状变化趋势和构造缓倾地段即有利于成矿部位. 相似文献
7.
8.
9.
10.
夏季填闲对连作黄瓜根区土壤酶活性及土壤化学性状的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
采用盆栽试验,以小麦、黑麦、苏丹草,鼠尾草、罗勒和油菜等六种植物为填闲作物,以夏季休闲为对照,研究不同夏季填闲作物对黄瓜根区土壤酶活性和化学性状的影响。结果表明,不同夏季填闲作物影响连作黄瓜根区土壤EC值、有机质含量、速效氮、磷、钾含量、土壤酶活性。其中填闲小麦处理对土壤EC值有显著降低作用;苏丹草、油菜和黑麦处理对土壤碱解氮含量具有显著降低作用;各填闲处理均能提升土壤速效磷含量,其中黑麦处理的作用效果显著高于其他处理。苏丹草和油菜处理与其他处理相比能够显著降低土壤速效钾含量。苏丹草、黑麦和小麦处理的土壤脲酶、多酚氧化酶和过氧化氢酶活性显著高于对照;油菜处理的土壤多酚氧化酶活性显著高于其他处理;除油菜外,各个填闲处理脱氢酶活性均显著高于对照。在提高连作黄瓜土壤的酶活性方面,各处理作用效果依次为苏丹草、黑麦、小麦、罗勒、鼠尾草、油菜。在降低养分富集、改善土壤化学性状方面,依次为油菜、苏丹草、黑麦、小麦、罗勒、鼠尾草。 相似文献