鼠伤寒沙门菌PagC蛋白单克隆抗体的制备及其特性分析

[目的]本试验旨在制备抗鼠伤寒沙门菌Pag C蛋白的单克隆抗体并初步分析其特异性和识别的抗原表位,为沙门菌抗体阻断ELISA检测方法的建立奠定基础。[方法]原核表达并纯化Pag C蛋白,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体;用生物信息学分析法获得Pag C蛋白在沙门菌属内保守的区段,合成相应多肽P1及P2用于单克隆抗体筛选和结合表位鉴定;最后采用免疫印迹方法对单克隆抗体与肠杆菌科其他细菌的交叉反应进行检测,评价其特异性。[结果]纯化后的Pag C蛋白相对分子质量约23×103;免疫小鼠后经2次亚克隆最终得到稳定分泌抗体的细胞株6株,标记为A、B、C、D、I、J;单克隆抗体的反应性试验结果显示6株单克隆抗体均能够识别Pag C蛋白;单克隆抗体的结合表位分析显示,J细胞株分泌的单克隆抗体可特异性识别P1序列;采用免疫印迹方法对J细胞株上清液进行特异性检测,证实该株单克隆抗体与变形杆菌、大肠杆菌O1和宋内志贺菌Pag C蛋白均无结合反应。[结论]成功获得1株与Pag C蛋白有良好结合活性且具有高度特异性的单克隆抗体,该株单克隆抗体的识别表位位于Pag C中沙门菌属内保守区段,可作为建立沙门菌抗体阻断ELISA检测方法的候选单克隆抗体。     

牛肉冷藏过程中品质变化的动力学分析

【目的】研究宰后冷藏过程中牦牛肉和西门塔尔杂交牛肉的肉用品质.【方法】试验以3~5岁的牦牛肉和西门塔尔杂交牛肉背最长肌为研究对象,分析了4℃冷藏过程中样品肉用品质(pH、失水率、熟肉率、剪切力和肉色)的变化,采用动力学探究了样品肉用品质的变化规律.【结果】在4℃有氧贮藏条件下,牦牛肉和西门塔尔杂交牛肉的pH、熟肉率均先降低后升高,在第5天达到最小值,剪切力先升高后降低,第3天达到最大值,失水率和b*值均先升高后降低,在第5天达到最大值,L*值和a*值持续降低;与西门塔尔杂交牛肉相比,牦牛肉的pH、失水率、L*值低于西门塔尔杂交牛肉,剪切力、熟肉率、a*值和b*值高于西门塔尔杂交牛肉.【结论】贮藏过程中牦牛肉的剪切力、L*值、a*值可以进行线性拟合,a*值的拟合度最高;pH、失水率、熟肉率和b*值不可以进行线性拟合,失水率的拟合度最低.贮藏过程中西门塔尔杂交牛肉的L*值、a*值可以进行线性拟合,a*值的拟合度最高;pH、失水率、熟肉率、剪切力和b*值不可以进行线性拟合,b*值的拟合度最低.     

把握机遇 转变思想 为推进我省农机化事业建功立业

回首过去1a，我省通过主攻水稻生产全程机械化，以机械耕作、稻草返田、化肥深施、节种育秧及抛栽秧、机械收获等5项技术实施为突破口的农机化科技发展重大决策以及所确立的农机化技术推广示范服务活动，带动了全省的农业机械化的发展，并在社会上引起了广泛的关注，广大农民群众对实现水稻生产机械化表现出了极大的热情。据统计，目前，全省已建立以水稻机械化为主要内容的丰收计划和农业节本增效科技示范区近450处，实施总面积已超过46．7万hm’，科技示范户1200多个，推广了各种新机具5万多台（套、件），许多先进的农机化新技术在我省得…     

太湖猪繁殖高产的遗传基础初探

本文应用南农大江浦农场实验站种猪场1983—1990年的二花脸、长二、大二、二大、长白、大约克母猪产仔性能资料,采用最小二乘法分析母体本身基因对产仔数影响的遗传作用。结果表明:母猪产仔性能的高低主要受其本身遗传基因的影响,而后代个体基因影响較小。还有长二、大二和二大等杂种母猪与二花脸母猪有近似的产仔性能(P>0.05),均分别显著高于长白和大约克母猪(P<0.01),提示太湖猪具有繁殖高产的主基因,并呈显性遗传。文中还就母体效应问题对后代产仔性能的影响进行了讨论。今后应进一步从生殖生物学及DNA水平上研究太湖猪繁殖高产的原因。     

绵羊复合微量元素添加剂缓释技术研究

绵羊复合微量元素缓释剂,是以玻璃复合盐类系统生成的可溶性玻璃骨架网络作为载体,网络内容纳绵羊所需的各种矿物质微量元素。熔炼制成的丸剂投饲到绵羊瘤胃中,在中性偏酸的瘤胃液里,可缓慢均衡地溶解释放出微量元素,且与绵羊对微量元素的需要量相匹配。本试验缓释剂基质玻璃原料为试剂级化学原料和饲料级化工原料。缓释剂由３０ %～３６ %基质玻璃原料和６４ %～７０ %的微量元素复合盐类组成。选用体重２５ｋｇ以上的健康育成羊６０只 ,按每组１５只（或３０只）随机分成两组进行缓释剂投喂试验。试验证明 ,这种缓释剂溶解速度均衡 ,…     

辐射杂种细胞系及其在基因定位中的应用

应用辐射杂种细胞系定位基因是基因定位的一种新的有效方法,本文对辐射杂种细胞系的形成、发展、种类以及在基因定位中的应用作了阐述,并对其作为基因定位有利工具的利弊作了评价。     

长效微量元素营养对幼羊生长和毛、血清微量元素含量的影响

选断奶后初始体重为10kg左右的阉萨能公山羊24头，平均分为三组，其中两组在试验开始时和开始后第122天分别投喂AL-Ⅰ、AL-Ⅱ丸一丸，另一组为对照组。试羊自由采食青料和定时自由采含精料。精料中未添加任何微量元素。研究结果表明：AL-Ⅰ、AL-Ⅱ丸在投喂2个月内分别提高生长速度15．44-23．00％（P＜0．05）、19．84—24。44％（P＜0．05）。投喂AL-Ⅱ丸显著提高毛Mn、Se，血清Zn、Se含量（P＜0．05）。说明营养长效丸有促长、改善营养状况的作用。     

猪肉颜色与其他肉质和胴体指标间的相关性研究

以皮特兰猪与我国地方猪种金华猪杂交的资源家系为材料,分析猪肉颜色指标与其他肉质和胴体指标之间的相关性.结果表明猪肉颜色指标间普遍存在显著的相关性,除明度系数L值与红度a值和色调角h值相关不显著外,其他猪肉颜色指标之间的相关系数都达到极显著水平(P＜0.0001);猪肉颜色与其他肉质指标和胴体指标之间也普遍存在相关性,其中较多为负相关.L值、彩度c值与眼肌pH、腿肌pH、眼肌面积、系水力呈显著的负相关(P＜0.05);a值、绿度b值与腿肌温度、眼肌面积呈显著的负相关(P＜0.05);b值还与系水力呈极显著负相关(P＜0.01);h值与眼肌温度、腿肌温度呈极显著的正相关(P＜0.01).     

岔路黑猪UCP3基因的多态性及其对胴体、肉质性状的影响

通过PCR-RFLP研究UCP3基因在岔路黑猪（56头）、皮岔猪（皮特兰×岔路黑猪 10头）、嘉兴黑猪（50头）群体中的基因和基因型频率分布,测定21头纯种岔路黑猪的胴体和肉质性状,并利用一般线性模型分析UCP3基因型与以上性状的相关性。结果发现该基因对岔路猪胴体长、前背膘厚、后背膘厚、三点平均背膘厚有显著影响,且对岔路猪肉质性状中的L值、腿肌pH值、眼肌温度、眼肌导电率影响显著。     

拟穴青蟹14-3-3基因全长cDNA的克隆及组织表达分析

采用RT-PCR及RACE技术,从拟穴青蟹眼柄组织中克隆获得14-3-3基因cDNA全序列.序列分析结果表明:拟穴青蟹14-3-3基因全长1112bp,开放阅读框长744 bp,编码由247个氨基酸组成的蛋白,分子量为28.086 ku,等电点为4.675.与其他物种14-3-3基因氨基酸序列进行同源性比较分析显示,拟穴青蟹14-3-3基因与斑节对虾14-3-3基因同源性最高(95％),依次为墨吉对虾(93％)、苜蓿切叶蜂(92％).聚类分析表明,拟穴青蟹14-3-3基因氨基酸序列与斑节对虾、墨吉对虾紧密聚为一支.经荧光定量检测,拟穴青蟹14-3-3基因在肝胰腺和肌肉中的表达量较高,其次为鳃、眼柄、心脏和肠,在胃中表达最少.盐度骤变实验结果表明:盐度胁迫24 h后,盐度的下降(5)或者上升(15、20、25、30)都引起了14-3-3基因在鳃中的表达量极显著上升(P＜0.01),盐度变化的幅度越大,14-3-3基因的表达量越多.实验结果为进一步深入研究14-3-3基因的功能及调控机理奠定基础.