免疫血管活性肠肽调节鸡产蛋和就巢的机理研究

旨在研究免疫血管活性肠肽(Vasoactive intestinal peptide,VIP)和抑制催乳索(Prolactin,PRL)分泌对鸡产蛋和就巢的影响机制.试验1:对18周龄未开产的泰和鸡,分别在试验d1、d28、d56和d84免疫含VIP羧基端15肽片段的VIP-BSA偶联蛋白,观察对产蛋和就巢的影响.试验2:利用刚开产的23周龄粤黄鸡,在试验d1、d23、d48、d73、d98免疫VIP串联四聚体重组蛋白,观察对产蛋和就巢的影响,并在第98天检测卵泡发育和下丘脑、垂体、F1～F3级LYF颗粒层和膜层相关基因的表达.试验1中免疫VIP组在开产后高峰期(d55～d61)的产蛋率显著低于对照组,但高峰后的(d89～d103)产蛋率显著高于对照组,同时免疫VIP组的就巢发生也要迟于对照组.试验2中,VIP免疫组的产蛋率在试验初高于对照组;在d33将光照从12 h延长至16 h后,2组的产蛋率均快速上升;产蛋高峰后,免疫组产蛋率快速下降并在dS0～d105显著低于对照组.免疫VIP重组蛋白也降低了就巢的发生.2组鸡在d98的大黄卵泡、小黄卵泡和大白卵泡的数量无显著差异.免疫VIP重组蛋白并不影响下丘脑Gn-RH-Ⅰ和VIP、垂体LHβ和FSHβ的mRNA水平,但显著降低了垂体PRL的表达,也显著降低了垂体和下丘脑PRLR的表达.在检测的F1～F3卵泡组织中,免疫VIP重组蛋白也显著降低了F1和F3颗粒层的PRLR mRNA水平,降低了F1～F3颗粒层和膜层的LHR表达量,但对P450scc和StAR的表达量没有影响.两试验结果表明,免疫VIP能够降低PRL的表达和分泌,从而抑制产蛋引发的就巢发生,但是免疫VIP在抑制PRL表达分泌后也会抑制卵泡发育和产蛋,这一机制可能是通过影响卵泡组织LHR的表达而实现的.     

禽白血病病毒J亚群诱导蛋鸡群多种肿瘤

2009年8月,山东泰安某海兰褐商品蛋鸡场,开产后产蛋率只有60％～70％,31周龄时,死亡率突然增加,最高达20％.患病鸡经大体剖检、病理组织学、PCR和免疫组织化学检测确诊为J亚群禽白血病.病理组织学检测发现送检鸡除了髓细胞瘤外,还存在明显的纤维肉瘤、组织肉瘤、腺癌和血管内皮瘤等肿瘤.纤维肉瘤单独存在,组织肉瘤、腺癌和血管内皮瘤分别和髓细胞瘤混合存在,本文详细描述了各肿瘤的组织学特点.ALV-J从肉种鸡传向商品蛋鸡后引起肿瘤谱扩展的原因和机制值得进一步研究.     

鸡促卵泡素及其受体基因在多个非繁殖组织中的表达研究

本研究利用PCR和免疫组化等方法,对FSHR和FSH基因在鸡多个非繁殖系统的组织器官中的mRNA和蛋白水平的表达以及相关性进行了分析.结果显示:在心脏、肝脏、肾脏、肺和十二指肠中FSHR mRNA和蛋白以及FSH蛋白水平具有相同的表达趋势,表达丰度从大到小依次为肝脏、心脏、肾脏、肺和十二指肠.而在脾脏、胃、腿肌和胸肌中未检测到FSHR mRNA和蛋白以及FSH蛋白水平的表达;在检测的9个组织中,均无FSHmRNA的表达.相关性分析结果表明,在肝脏、心脏、肾脏、肺和十二指肠中各组织器官质量与组织中的FSH蛋白水平具有显著或极显著的正相关(P＜0.05或P＜0.01);各组织中的FSHR mRNA和蛋白水平均与FSH蛋白水平存在显著或极显著正相关(P＜0.05或P＜0.01).本研究初步证明,机体其他部位表达分泌的促卵泡素,在多个非繁殖组织器官(肝脏、心脏、肾脏、肺和十二指肠)中通过调控促卵泡素受体基因的表达来影响北京油鸡不同组织的发育.     

鸡ES细胞体外定向诱导分化特性的研究

旨在探索鸡胚胎干细胞(ES细胞)体外定向诱导的多向分化潜能.分离鸡X期胚盘细胞,体外培养传代,经鉴定后,采用地塞米松(DEX)、β-甘油磷酸钠(β-GP)和维生素C(VitC)诱导ES细胞向成骨细胞分化;采用维甲酸(RA)、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)诱导ES细胞向神经元样细胞分化;采用DEX、胰岛素、IBMX诱导ES细胞向脂肪细胞分化,比较不同浓度组合诱导剂的诱导效果,分别用Von Kossa's染色法、甲苯胺蓝染色法、免疫组化法、油红O染色法和RT-PCR鉴定诱导产生的细胞.结果显示,ES细胞被诱导3～21 d后,分化为成骨细胞,诱导率为40％～72％;被诱导4～7 d后,分化为神经元样细胞,诱导率为71％～84％;被诱导2～21 d后,分化为脂肪细胞,油红O染色阳性,并表达PPARγ基因.结果表明,在体外条件下,ES细胞可被特异的化学物质定向诱导分化为成骨细胞、神经元样细胞和脂肪细胞,具有多向分化潜能.     

磺胺二甲嘧啶快速直接竞争ELISA试剂盒的研制及应用

在多克隆抗体的基础上研制一种用于检测动物源性食品中磺胺二甲嘧啶(SMZ)残留量的直接竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒,并与高效液相色谱(HPLC)分析方法比较和验证.将磺胺二甲嘧啶添加到猪肝、猪肉和鸡肉样品中,用所制备的试剂盒和HPLC分析方法检测样品中的磺胺二甲嘧啶残留,并对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定.研究结果表明,磺胺二甲嘧啶浓度在0.5～50 ng·mL-1,方法的检测灵敏度IC10 =0.47 ng·mL-1,板内平均变异系数为7.4％,板间平均变异系数为9.27％.猪肝、猪肉与鸡肉组织样品中SMZ最低检测限分别为3.91、4.81与1.59 μg·kg1.在添加10.0～50.0 μg·kg-1时,平均回收率在85％～110％.试剂盒的检测时间为12.6 min,在4℃至少可以保存6个月.研制的试剂盒可以满足猪肝、猪肉和鸡肉中磺胺二甲嘧啶残留的现场快速检测.     

鸡Perilipin1抗血清制备及组织表达特性分析

通过制备鸡脂滴包被蛋白(Perilipin1)的抗血清,分析鸡Perilipin1的组织表达特性并推测其在脂肪组织脂类代谢过程中发挥的功能。利用RT-PCR的方法扩增鸡Perilipin1基因,并将其构建到含有His标签的表达载体pET-28a上。将阳性重组表达质粒pET-28a/Perilipin1导入大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下产生His/Perilipin1融合蛋白,对产生的His/Perilipin1蛋白包涵体进行复性处理,复性后以其为免疫原制备鸡Perilipin1多克隆抗血清。通过ELISA和Western blot的方法检测抗血清的效价及特异性,并利用此抗血清分析鸡Perilipin1在各种组织中的表达特性以及比较其在高、低脂系公鸡间的表达差异。ELISA和Western blot结果表明,本试验获得了效价高、特异性强的鸡Perilipin1抗血清,同时Western blot检测Perilipin1的组织表达特性结果表明,Perilipin1仅在鸡脂肪组织中表达,而在肝脏、十二指肠、胸肌、腿肌、肌胃、心脏、脾脏、肾脏等组织中未检测到表达信号;Perilipin1在肉鸡高脂系脂肪组织中的表...     

鸡传染性贫血免疫对肝微粒体抗氧化酶活性的影响

目的是观察鸡传染性贫血多次免疫对肝微粒体中抗氧化酶活性的影响.对20只SPF鸡随机分为2组,每组10只,免疫组鸡用鸡传染性贫血弱毒苗免疫4次,每次间隔2周,对照组鸡注射同剂量的生理盐水.最后一次免疫后10d取肝脏制备微粒体,利用测试盒测定肝微粒体中的GSH-Px活性、SOD活性、CAT活性和MDA含量.结果与对照组相比,免疫组肝微粒体中GSH Px活性、SOD活性和CAT活性都显著提高(P＜0.05),MDA含量显著减低(P＜0.05).结论为鸡传染性贫血多次免疫可提高鸡体抗氧化能力.     

黄芪多糖对接种NDⅣ雏鸡红细胞免疫功能的影响

以50日龄内健康海兰白雏鸡为研究对象,将黄芪多糖（APS）按0 mg/只、5 mg/只和10 mg/只经滴鼻点眼、肌肉注射等方式分别与鸡NDⅣ系疫苗同时免疫接种适龄雏鸡。结果表明,雏鸡C3b受体花环率（E-C3bRR）和红细胞C3b受体花环促进率（ERER）显著升高,红细胞免疫复合物花环率（E-ICRR）和红细胞C3b受体花环抑制率（ERIR）则降低,即APS可显著提高雏鸡的红细胞免疫功能,且APS 10 mg/只组效果优于5 mg/只组;对NDⅣ系苗免疫雏鸡来说,以APS 10 mg/只肌肉注射,NDⅣ滴鼻点眼对红细胞免疫功能的增强作用最显著。     

Effect of dietary supplemental nicotinic acid on growth performance,carcass characteristics and meat quality in three genotypes of chicken

The effects of dietary supplemental nicotinic acid (NA) on growth performance, carcass characteristics and meat quality were investigated in three genotypes of chicken. Fast‐growing AA (Arbor Acres) broilers were compared with two genotypes of a slow‐growing local breed, Beijing‐You, that had undergone selection for and against intramuscular fat content respectively (BJY+IMF and BJY?IMF). The treatments were arranged 3 × 4 factorial completely randomized design. Day‐old females (n = 624) were allocated to four treatments with six replicates per treatment and fed diets (basal contained ～25 mg NA/kg) supplemented with 0, 30, 60 and 120 mg NA/kg. A sample of 72 birds from each genotype was slaughtered at market time (8 weeks of age for AA and 16 weeks of age for BJY). The breast muscles of AA broilers were darker, had less redness and yellowness, lower drip loss and higher shear force as compared to the BJY genotypes (p < 0.01). The highest drip loss and the lowest shear force among the three genotypes were apparent in BJY+IMF (p < 0.01). Increasing supplementation from 0 to 60 mg NA/kg tended to increase average daily gain (ADG), average daily feed intake, width of intermuscular fat band, thickness of subcutaneous fat (including skin) and percentage of abdominal fat but, for most variables, values decreased slightly with 120 mg NA/kg. Increasing supplementation to 60 mg NA/kg decreased (quadratic, p < 0.001) drip loss, but it increased at 120 mg NA/kg. The present results indicate that (i) the AA broilers fed corn–soybean meal based‐diets require approximately 60 mg NA/kg to maximize ADG and meat product yield and decrease the drip loss of breast muscle; (ii) the addition of 30 mg NA/kg meets the requirement of BJY genotypes; and (iii) there seems to be no beneficial effect of NA supplementation on chicken meat quality except for limiting the drip loss.     

复方硫氰酸红霉素可溶性粉对人工感染鸡慢性呼吸道病的疗效试验

用复方硫氰酸红霉素可溶性粉以每升水中加0.5、0.6、0.7、0.8、0.9 g 5个剂量对人工感染鸡慢性呼吸道病的鸡群混饮治疗,同时设立硫氰酸红霉素可溶性粉对照组.试验结果表明,用药5d后,复方硫氰酸红霉素可溶性粉每升水加0.6、0.7、0.8、0.9g剂量组的有效率和治愈率皆高于硫氰酸红霉素可溶性粉组.