马传贫驴白细胞弱毒疫苗株基质蛋白基因的克隆与表达

从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码基质蛋白（p15)的基因，并在大肠杆菌中进行了表达，所表达的蛋白是一种可溶性的融合蛋白，其氨基端带有6个组氨酸的标签，因此可以用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下进行纯化，在间接ELISA和免疫印迹试验中，重组的基质蛋白可与马传贫阳性血清样品发生反应，而与健康马血清无任何反应，这表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性，可用于马传贫弱毒疫苗株在体内外复制及在接种马体人免疫应答的研究中。     

基质蛋白第221、226位氨基酸位点发生突变的重组水泡性口炎病毒构建和致病性研究

重组水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)是一种具有良好应用前景的病毒载体,可用于制备疫苗和治疗肿瘤,但该载体可导致实验动物产生神经毒性,因此其使用仍存在安全性问题。为减低乃至去除野生型VSV的致病性,对该病毒基质蛋白M的第221、226位氨基酸进行了定点突变,制备了新型重组VSV,并围绕新型重组病毒的致病性展开了体外和体内试验。在体外试验中,221、226双位点突变重组VSV病毒(VSVM221,226)的复制能力相比野生型VSV(VSVXN2)降低可达20倍,且激发IFN-β达(871±1.3)pg/m L。在体内试验中,接种VSVM221,226小鼠体重下降仅约(8.9±0.2)%和(12.3±0.4)%,而接种VSVXN2小鼠体重下降高达(32.6±0.5)%和(30±2)%,且有死亡现象发生。试验结果表明,相比VSVXN2以及221、226单位点突变VSV,VSVM221,226的致病性显著降低,其致弱效应可能是由于病毒感染有效激活宿主细胞产生Ⅰ型干扰素所致。VSVM221,226有希望成为一个安全、有效的疫苗载体。     

新城疫病毒广西分离株M基因的克隆与序列分析

根据基因库中新城疫病毒M基因核苷酸序列,设计一对特异性引物,对2000年-2003年期间广西分离的11个NDV毒株的M基因进行RT-PCR扩增、克隆和序列测定.结果表明,11个NDV广西分离株的M基因都为1 223个核苷酸,含有1个1 095 bp核苷酸阅读框(ORF),编码364个氨基酸.序列分析结果表明,这11个NDV分离株核苷酸的同源性在86%～99.9%之间,推导氨基酸的同源性在89.3%～99.7%之间;11个毒株与国内外其他7个NDV毒株比较核苷酸的同源性在83.3%～98.5%之间,推导氨基酸的同源性在87.4%～98.6%之间.     

A型流感病毒基质蛋白研究进展

流感病毒基质蛋白 MA包括 M1和 M2两种 ,在病毒进化过程中其结构是稳定的。 A型流感病毒 M1在病毒复制及感染中起关键作用 ,而 M2是一种跨膜蛋白 ,结构很保守。 M2可调节高尔基体跨膜转移通道的 p H梯度 ,对 HA蛋白起稳定性作用。将 M2与乙肝病毒制成融合蛋白 ( M2 HBc)分别免疫小鼠 ,小鼠获得了 90 %～10 0 %的免疫保护力 ,且具有交叉性和持久性。用研制的含 M2基因的 DNA疫苗 ,免疫小鼠产生了 M蛋白特异性的抗体和 CTL反应 ,并对流感病毒攻击具有保护力     

类风湿关节炎患者血清软骨寡聚基质蛋白和抗环瓜氨酸抗体水平的检测及临床意义

目的观察软骨寡聚基质蛋白（COMP）和抗环瓜氨酸抗体（抗CCP抗体）在类风湿关节炎（RA）患者中的变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测46例RA患者（RA组,包括活动期和缓解期）及30例健康对照者（对照组）的血清COMP及抗CCP抗体水平,并记录患者关节晨僵时间、关节肿胀、关节疼痛、DAS28评分,分析COMP、抗CCP抗体与它们的相关性。结果 RA组活动期的血清COMP和抗CCP抗体水平均明显高于缓解期和对照组,缓解期的COMP和抗CCP抗体水平也明显高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.01）;RA患者血清COMP和抗CCP抗体水平与晨僵时间、关节压痛指数、肿胀和活动痛指数、DAS28评分均呈正相关（P〈0.05或0.01）。结论 COMP和抗CCP抗体可用以反映RA疾病的活动及进展。     

甲型流感病毒NP和M2的特性及其在疫苗研制中的应用

甲型流感病毒核蛋白(NP)为该病毒内部的单体结构蛋白,基质蛋白2(M2)是该病毒囊膜上具有非糖基化跨膜结构的离子通道蛋白,二者均具有高度保守的氨基酸序列并对流感病毒复制及适应宿主起着重要作用。由于传统甲型流感疫苗具有诸多缺点,越来越多的学者选取该病毒的保守序列研制新型通用疫苗。本文主要论述了NP和M2的特性以及相关通用疫苗的研究成果。     

新城疫病毒感染过程中基质蛋白的动态分布

本研究利用原核表达产物制备的多抗血清进行M蛋白在细胞内的定位分析,NDV 9a5b病毒按5个感染复数(m.o.i)感染量接种DF1单层细胞,当PI=6 h时,M蛋白主要分布于细胞浆内,并未到达细胞膜内侧;到PI=8 h时,粗面内质网周围的M蛋白逐渐增多;PI=12 h时,M蛋白已开始聚集于细胞膜的内侧,而当感染后16 h开始形成合胞体时,M蛋白在细胞膜内侧形成明显的斑点状聚集;当感染至24 h时,逐渐出现5~10个细胞膜融合的包涵体,M蛋白存在于包涵体融合膜的内层,且荧光强度已逐渐减弱。这为深入开展M蛋白与病毒增殖、宿主相互作用机制的研究工作奠定了基础。     

蛋壳特异性基质蛋白结构与功能特性研究进展

蛋壳是一种以多孔的石灰质为主,多种蛋白质共存的硬壳.蛋壳的形成是一个生物矿化的过程.随着蛋白质组学的发展,在蛋壳中共发现了大约666种蛋白质,但关于蛋壳特异性基质蛋白质的相关报道仍然很少,主要有Ovodeidins-17(OC-17)、Ovodeidins-116(0C-116)、Ovocalyxins-32(0CX-32)和Ovocalyxins-36(0CX-36)等.它们广泛分布于蛋壳的各层结构中,虽然含量很少,但具有重要的生物活性.作为特异性基质蛋白质,在蛋壳形成以及抑菌等方面具有重要的理论及应用价值.本文在参考大量文献的基础上,对主要蛋壳特异性基质蛋白质的分离纯化、结构特征、在蛋壳形成中的作用以及抑菌等方面进行了介绍,预测蛋壳基质蛋白在食品领域的发展方向,提出了将蛋壳作为生物矿化模型、开发新型高性价比的抗菌材料的设想,为提高蛋壳废弃物的经济利用价值提供科学的理论依据.     

传染性支气管炎病毒青岛腺胃分离株(SD/97/02)基质蛋白、5a、5b 蛋白基因的克隆和序列分析

参考 Gen Bank上的传染性支气管炎病毒 (IBV)序列 ,自行设计合成了 3条引物 ,对 IBV青岛腺胃分离株 (SD/97/ 0 2 ) RNA进行 RT- PCR扩增 ,扩增含基质蛋白 (M)及 5 a、5 b蛋白基因的约 1.6 5 kb的片段 ,对 PCR产物进行克隆后测序。序列分析显示 ,M蛋白基因与其他 IBV相应的基因同源性在 90 .33%～ 92 .75 %之间 ,氨基酸序列比较 ,同源性在 89.82 %～ 94.2 5 %之间 ;5 a基因与其他 IBV的基因同源性在 84.34 %～ 87.37%之间 ,氨基酸同源性在 81%～82 %;5 b基因与其他 IBV的基因同源性在 91%～ 92 %之间 ,氨基酸同源性在 93%左右。