饱和食盐水漂浮鸡球虫卵囊的用量和处理时间研究

饱和食盐水是球虫卵囊分离纯化常用试剂,为降低鸡球虫病活疫苗生产成本,试验比较了不同用量的饱和食盐水对柔嫩艾美耳球虫卵囊的漂浮效果,同时研究了饱和食盐水处理柔嫩艾美耳球虫卵囊对其孢子化的影响。结果表明:饱和食盐水的使用量并非越多越好,4～6倍体积的饱和食盐水可获得最佳漂浮效果,且饱和食盐水处理卵囊的时间不宜超过30 min。     

猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒HN-HW株ORF2-7基因的克隆与序列分析

为了研制有效的PRRS疫苗,参照GenBank中公布的猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型ATCC VR-2332基因序列,用Primer 5.0软件分别设计合成了针对PRRSV ORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF7基因的特异性引物,利用RT-PCR从HN-HW株分别扩增得到了大小约771,904,564,670,619和586 bp的片段,并将扩增的片段插入pGEM-Teasy载体,然后转化到大肠杆菌JM109感受态细胞中,挑取阳性克隆PCR和酶切鉴定后进行测序.利用DNAStar软件将HN-HW株ORF2-7基因的核苷酸序列和推导氨基酸序列与ATCC VR-2332、JX-A1、CH-1a、BJ-4、HB-1、HB-2、HEB-1、HUB-1、HUB-2、SP、P129、MN184A、RespPRRS MLV、Prime Pac、LV等毒株相应序列进行了同源性分析,并绘制系统进化树.结果显示,HN-HW株与美洲型ATCC VR-2332核苷酸同源性为88.9%～94.9%,与欧洲型LV核苷酸同源性为64.0%～69.0%;推导氨基酸序列与ATCC VR-2332株同源性为82.4%～96.0%,与LV株的同源性为34.5%～78.9%.系统进化树表明,HN-HW株属于美洲型,与JXA1、HUB-1、HUB-2、HEB-1亲缘关系较近.     

C型口蹄疫病毒VPI基因的克隆及真核表达载体的构建

应用PT-PCR扩增C型口蹄疫病毒（FMDV）VP1基因,将其克隆到pMD18-T载体中,并对克隆载体和VP1基因进行序列分析。将VP1基因和选择标记基因——二氢叶酸还原酶（dhfr）基因插入真核表达载体pCI-neo中,对所构建的重组真核表达载体进行PCR扩增、酶切鉴定和序列分析。结果表明,VP1基因与GenBank中标准毒株（登录号EU553893）VP1的序列同源性为92.8%,VP1基因的真核表达载体pCI-VP1-D构建成功。     

RNA干扰及其在口蹄疫病毒防御中的应用

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种真核生物细胞在转录后引发基因沉默的分子机制.目前,RNAi的分子机制及其功能仍然有待更加细致地阐明,但作为一种反向遗传学手段已经在基因功能研究中广泛运用,并已作为一种治疗策略运用于人类抵抗重大遗传性疾病和病毒性疾病的研究当中.本研究将对RNAi的分子机制及其在抗口蹄疫病毒功能方面的研究作出简要的概括和展望.     

木霉菌配合肥料施用对玉米产量及品质的影响

为玉米生产中木霉菌的科学应用及肥料的合理施用提供理论依据,研究6个不同施肥处理（T1,不施肥料;T2,常规施肥;T3,减施40%复合肥;T4,减施40%复合肥+生物有机肥;T5,常规施肥+木霉菌;T6,减施40%复合肥+木霉菌）对玉米产量与品质的影响,分析适宜鲜食糯玉米的施肥配方。结果表明：施用木霉菌可有效增加鲜食糯玉米的茎粗、穗数、叶片叶绿素含量、产量及籽粒中可溶性蛋白、可溶性糖、维生素C的含量;经济效益最高的为T6处理,其在T1基础上的新增纯收益达598.09元/667m 2,新增纯收益是T2处理的1.55倍。鲜食糯玉米生产施肥建议采用减少40%复合肥与木霉菌配施的高产优质可持续的施肥配方。     

蜱的生物防治研究进展

蜱是放牧家畜体表常见的一类外寄生虫，并可作为许多疾病的传播媒介，给人类健康和动物生产带来极大的威胁。在自然界中，多种病毒、细菌、真菌和线虫可寄生于蜱体并对其产生致病性，某些寄生蜂和禽类等可充当蜱的捕食者或天敌，它们在蜱的防控中均担当着重要角色。文章将以蜱的病原和天敌为重点，对蜱的生物防治研究进展进行介绍。     

动物梨形虫线粒体研究进展

线粒体在真核生物以及单细胞生物的生命活动中发挥着重要作用。寄生虫为适应不同的生存条件进化了一套自己的方式,包括线粒体基因组成、基因表达和能量代谢方式。梨形虫（巴贝斯虫和泰勒虫）是一类重要的胞内寄生虫,给畜牧业造成重大的经济损失。本文对梨形虫为适应宿主而进化出的一些特征进行了描述,为寻找防治梨形虫的新途径提供理论依据。     

皮蝇素A基因的克隆及其毕赤酵母表达载体的构建

提取采自甘肃玛曲皮蝇一期幼虫的总RNA,合成cDNA,根据设计的特异引物,利用PCR技术扩增出皮蝇素A(Hypodermin A,HA)基因片段,用Xho Ⅰ、Xba Ⅰ消化,将消化后的目的基因HA纯化并回收,与经同样的酶消化后并纯化回收的裁体pPICZa连接并转化,获得重组表达质粒pPICZa-HA,经PCR、酶切、测序表明,目的基因插入位置、方向和阅读框正确.     

青海血蜱cDNA表达文库的构建

在无RNA酶污染的环境下摘取半饱血青海血蜱唾液腺、马氏管和卵巢等器官,从中提取RNA,进而纯化mRNA,采用oligo(dT)引物合成双链cDNA,并在其两端加EcoRⅠ/HindⅢ定向接头。将所产生的cDNA分子定向克隆到具有EcoRⅠ/HindⅢ黏性末端的λSCREEN载体的两臂之间。用PhageMaker extract对以上连接产物进行体外包装以形成完整的噬菌体,并用之转染大肠杆菌ER1647,从而构建成青海血蜱的cDNA表达文库。经测定,所构建青海血蜱cDNA文库的库容量约为2×106PFU/mL,重组率为100%,扩增后文库的滴度为8×109PFU/mL。通过对该文库的免疫学筛选,获得一个编码青海血蜱肌球蛋白碱性轻链的全长cDNA序列。所有结果显示,青海血蜱cDNA表达文库已成功构建。     

环形泰勒虫病疫苗防制的研究进展

疫苗防制是控制和根除环形泰勒虫病的一种最安全、有效的方法。本文就目前环形泰勒虫病疫苗防制的研 究进展作一全面的综述,并对其未来的发展趋势进行探讨。