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本实验室已制备出多株针对牛叠朊的单克隆抗体,为充分鉴定这些单克隆抗体针对的抗原表位,通过基因克隆表达的策略获取牛叠朊基因缺失突变体的重组蛋白,以期为单克隆抗体的表位鉴定提供物质材料。经过对牛成熟叠朊编码基因及预测蛋白结构特征的分析,设计表达9个缺失突变体的引物。以PCR扩增出叠朊基因的缺失突变体,与pET-30a(+)表达载体连接后转入E.coli DH5α中,经双酶切和测序鉴定后将重组质粒转入E.coliJM109和E.coli BL21表达宿主菌中,经IPTG诱导表达后,以SDS-PAGE、Western blot和ELISA检测表达产物的相对分子质量、相对表达量和反应原性。结果表明,成功构建了9个牛叠朊编码基因的缺失突变体,通过IPTG的诱导表达,其中有6个缺失突变体被大肠杆菌高效表达,并且具有较好的反应原性,这为其单克隆抗体表位的进一步鉴定奠定了物质基础。 相似文献
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通过积石山县林业建设现状调查,分析林业发展的主要制约因素和存在的问题,以科学发展观的角度,总结提出加快林业发展对策。 相似文献
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母猪生产瘫痪的病因及机理探讨 总被引:2,自引:0,他引:2
通过饲料和血液分析发现生产瘫痪母猪饲料和血液中维生素D和碘含量均低于正常营养标准。临床用维生素D和碘对生产瘫痪母猪进行治疗,效果明显。这证实宁夏地区母猪生产瘫痪与碘和维生素D缺乏有关。 相似文献
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彭阳县地处宁夏的“南大门”,随着西部在开发,国家退耕还林草工程的实施,全县把畜牧业发展作为增加农民收入的主要途径,县委、政府高度重视,多方面筹措资金,向规模养殖户、养殖专业村和贩运户放畜牧业高效养殖款及扶贫小额贷款,积极引导他们走向富裕之路,但是,个别规模养殖户、饲养大户和贩运户为了蝇头小利贪图便宜,未经检疫部门把关,抱有侥幸心理盲目购进病畜或疑似病畜,给人民群众带来严重的经济损失,为了搞好牲畜外调补栏工作,防止疫情引入和扩散,确保检疫工作到位和外调牲畜健康无疫,保护广大养殖户发展积极性,确保畜牧业健康稳定发展,… 相似文献
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为比较三种口蹄疫146S抗原含量检测方法,分别用蔗糖密度梯度离心结合安捷伦Cary 100紫外分光光度计定量法、蔗糖密度梯度离心结合安捷伦1260液相色谱仪定量法及高效液相体积排阻色谱法三种检测方法,对口蹄疫灭活抗原中的146S含量进行检测,对三种检测方法的数据进行统计分析。将口蹄疫A型抗原和O型抗原各一株分别4℃放置12个月以及反复多次冷冻处理;口蹄疫抗原用全能核酸酶处理,然后用蔗糖密度梯度离心结合安捷伦1260液相色谱仪定量法检测处理前后的146S抗原含量变化。结果显示,三种检测方法的检测数值相关性极显著,呈正相关性;4℃放置12个月后的抗原含量没有变化,而反复多次冷冻处理后的抗原含量降解非常多;全能核酸酶处理后的抗原杂蛋白含量少。研究表明,基于临床需求,蔗糖密度梯度离心结合安捷伦1260液相色谱仪定量法更适合口蹄疫抗原检测;口蹄疫抗原适合于4℃保存;全能核酸酶能有效去除杂蛋白干扰,提高色谱纯化效率。 相似文献
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