微小牛蜱Bm91基因的原核表达

根据GenBank收录的微小牛蜱Bm91基因序列设计一对表达引物,以微小牛蜱幼蜱总RNA反转录合成的cDNA为模板,扩增获得了Bm91基因,其长度为1 908 bp,包含一个大小为1 833 bp的完整开放阅读框,编码611个氨基酸,该蛋白预期分子质量为83 ku。将Bm91基因片段亚克隆到原核表达载体pET-30a,构建重组原核表达载体pET-30a-Bm91,转化BL21宿主菌,经IPTG诱导,发现在0.8 mmol/LIPTG,诱导时间2 h,温度37℃条件下,目的重组蛋白表达量最大,约占蛋白总量的20%。SDS-PAGE检测表明,表达产物为分子质量为83 ku的融合蛋白,与预期大小一致;Western blot分析表明,表达产物能被兔抗微小牛蜱阳性血清所识别。     

辣椒花粉母细胞减数分裂及其雄配子体发育

采用染色体压片和爱氏苏木精染色相结合的方法对辣椒花粉母细胞减数分裂及雄配子体的发育过程进行了观察。结果表明:可育株系减数分裂染色体行为正常,胞质分裂属同时型,四分体以正四面体型或十字交叉型为主;雄配子体只进行1次有丝分裂,成熟花粉为2-细胞型。不育株系减数分裂行为异常,四分体时期彻底败育;此外,辣椒减数分裂进程与花蕾外部特征关系密切。     

盐胁迫对大豆种子萌发及生理的影响

选取有代表性的中性盐NaC1,设置0、50、100、150、200 mmol/L5个浓度水平,对山西普遍种植的大豆种子进行萌发胁迫处理,探讨大豆种子萌发期耐盐性以及耐盐机制.结果表明,低盐浓度(50 mmol/L)对种子萌发有促进作用,而高盐浓度抑制萌发,且随着NaCl浓度的增高,抑制程度明显加重;胚根胚芽中SOD和POD活性呈先升高后降低的趋势,而Pro和MDA含量则呈逐渐增加的趋势.大豆种子在发芽和生理变化上均表现出一定的耐盐能力,相比较而言,POD在其萌发期抵御盐胁迫时起重要作用.     

辣椒雄性不育两用系小孢子发生的细胞学观察

以辣椒雄性不育两用系AB114为试材,采用石蜡切片技术,对不育株系和可育株系花粉母细胞减数分裂过程以及花药和小孢子的发育过程进行了对比观察。结果表明:不育株系花粉母细胞减数分裂行为异常,败育现象从造孢细胞时期以后每个阶段都有发生,绒毡层发育异常是导致小孢子败育的主要原因。     

辣椒核不育两用系花器官发育动态及细胞学观察

为了获得一种便于识别且与育性紧密相关的花器官形态指标,采用形态学和细胞学相结合的方法对辣椒不育株和可育株花器官的发育状况进行了对比研究.结果表明:可育株和不育株的花柱、花蕾的发育状态基本一致,而花药发育状态差异显著,花药的外部形态与雄性育性密切相关;雌蕊石蜡切片和花粉生活力检测表明,不育株雄性器官彻底败育且不育性稳定,...     

猪繁殖与呼吸综合征病毒HN-HW株的分离与鉴定

用细胞传代的方法从湖南省宁乡县发病猪所采病料中分离到一株猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)毒株.该毒株能在Marc-145细胞上增殖并产生特征性的细胞病变,RT-PCR检测可扩增出670 bp的特异性的ORF5基因片段,经美洲型PRRSV荧光抗体染色呈阳性反应,电镜观察其超微结构显示,病毒粒子大小为50～60 nm.命名该分离毒株为HN-HW株.     

蜱的化学和免疫学防治研究进展

蜱既是常见的吸血外寄生虫,又是人和动物许多重要疾病的传播媒介。大量的蜱叮咬宿主动物可导致宿主消瘦、贫血,同时也使动物皮革的质量降低。作为传播媒介,蜱由于可传播原虫、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体、细菌和病毒等,在世界范围带来了很大的经济损失。有很多蜱的防治策略,但均存在不足之处,目前主要以化学和免疫学防治为主。利用化学防治较为普遍,但由于使用不当已造成了蜱的耐药性和环境污染。蜱的免疫学防治主要是开发抗蜱疫苗,接种商品化的抗蜱疫苗被证实是一种可行的防治策略,因此疫苗将在未来对蜱的防治中起举足轻重的作用。     

氯化钙浸种对磷饥饿下番茄幼苗生长状况和保护酶活性的影响

以番茄(特选-28)为试验材料,利用Hoagland's营养液(缺磷营养液)培养番茄幼苗,探讨氯化钙浸种对磷饥饿下番茄幼苗生长状况和保护酶活性的影响.结果表明:磷饥饿下,适宜浓度的氯化钙浸种可以起到壮苗作用,番茄幼苗的鲜重、干重累积、株高、主根长等指标均有所提高,特别是当氯化钙溶液浓度达10 mmol/L时效果更显著....     

猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒HN-HW株ORF2-7基因的克隆与序列分析

为了研制有效的PRRS疫苗,参照GenBank中公布的猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型ATCC VR-2332基因序列,用Primer 5.0软件分别设计合成了针对PRRSV ORF2、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6和ORF7基因的特异性引物,利用RT-PCR从HN-HW株分别扩增得到了大小约771,904,564,670,619和586 bp的片段,并将扩增的片段插入pGEM-Teasy载体,然后转化到大肠杆菌JM109感受态细胞中,挑取阳性克隆PCR和酶切鉴定后进行测序.利用DNAStar软件将HN-HW株ORF2-7基因的核苷酸序列和推导氨基酸序列与ATCC VR-2332、JX-A1、CH-1a、BJ-4、HB-1、HB-2、HEB-1、HUB-1、HUB-2、SP、P129、MN184A、RespPRRS MLV、Prime Pac、LV等毒株相应序列进行了同源性分析,并绘制系统进化树.结果显示,HN-HW株与美洲型ATCC VR-2332核苷酸同源性为88.9%～94.9%,与欧洲型LV核苷酸同源性为64.0%～69.0%;推导氨基酸序列与ATCC VR-2332株同源性为82.4%～96.0%,与LV株的同源性为34.5%～78.9%.系统进化树表明,HN-HW株属于美洲型,与JXA1、HUB-1、HUB-2、HEB-1亲缘关系较近.     

采用PCR方法对我国蜱伯氏疏螺旋体感染的流行病学调查

通过调查我国已有的4种蜱伯氏疏螺旋体的感染情况,以进一步阐明莱姆病在中国的分布与流行状况。本研究通过筛选扩增伯氏疏螺旋体外膜蛋白A(OspA)基因片段的通用引物,获得1对特异性引物,优化反应条件后建立用于检测蜱体内伯氏疏螺旋体的PCR方法,其扩增片段大小为307 bp。该方法可检测出10 pg的阿氏疏螺旋体(Ba)、1 pg的伽氏疏螺旋体(Bg)和0.01 pg的狭义伯氏疏螺旋体(Bb)的3种不同基因型的伯氏疏螺旋体的OspA基因组DNA,表明其敏感性较好,适用于蜱感染伯氏疏螺旋体状况的调查。本研究从我国7个省采集到的667只蜱,进行伯氏疏螺旋体感染的流行病学调查,分类鉴定表明这些蜱分属革蜱属、血蜱属、牛蜱属和扇头蜱属。PCR检测所获数据表明它们的感染率分别为4%(10/264)、6%(11/137)、31.4%(59/185)和31%