阿勒泰羊生长速度与主要血液生化指标含量及尾脂Leptin基因表达关系

试验通过研究不同生长速度阿勒泰羊主要血液生化指标含量和尾脂中瘦素（Leptin）基因的表达水平，探讨阿勒泰羊生长速度与脂肪沉积之间的关系。选取300只出生时间相近的阿勒泰羊公羔，正常饲喂至6月龄，记录日增重，取平均日增重排前10%和后10%的公羔各30只，分为生长快速组（HBW）和生长慢速组（LBW），从生长快速组随机选12只分为抑制生长组（饲喂低能量饲粮以抑制其生长，HBW-75%，n=6）和生长快速对照组（饲喂标准饲粮，HBW-100%，n=6），生长慢速组随机选12只分为促进生长组（饲喂高能量饲粮以促进生长，LBW-125%，n=6）和生长慢速对照组（饲喂标准饲粮，LBW-100%，n=6）；预饲期7 d，正饲期30 d，试验结束后称重并采集血液，屠宰后采集尾部脂肪。检测血液TG、CK、TSH、T3、T4、S.S、GH、INS、PG、Leptin含量或活性及尾部脂肪Leptin mRNA和蛋白表达量，并观察尾部脂肪细胞形态学变化。结果显示，HBW-100%和LBW-100%组初体重与末体重均差异显著（P<0.05），HBW-75%和HBW-100%组初体重与末体重均无显著差异（P>0.05）；LBW-100%和LBW-125%组初体重差异显著（P<0.05），末体重无显著差异（P>0.05）。LBW-100%组的T4、S.S、Leptin、TSH、T3含量显著低于HBW-100%组（P<0.05）；LBW-125%组T3含量显著高于LBW-100%组（P<0.05）；HBW-75%组GH、PG和Leptin含量显著低于HBW-100%组（P<0.05）。LBW-125%组尾部脂肪细胞面积大于LBW-100%组，HBW-75%组小于HBW-100%组（P<0.05）。Leptin mRNA和蛋白表达量检测结果表明，HBW-100%组的Leptin mRNA表达量与LBW-100%组无显著差异（P>0.05），Leptin蛋白表达量极显著高于LBW-100%组（P<0.01）。LBW-125%组Leptin mRNA和蛋白的表达量均显著高于LBW-100%组（P<0.05）。HBW-75%组Leptin mRNA的表达量极显著低于HBW-100%组（P<0.01），Leptin蛋白表达量显著低于HBW-100%组（P<0.05）。综上所述，生长快速组与生长慢速组中，Leptin的表达量与体重和体脂有一定关联；在生长慢速组促进生长后体重和体脂显著增加，Leptin的表达量呈上升趋势；在生长快速组抑制生长后体重和体脂减少，Leptin的表达呈下降趋势。改变生长速度对Leptin的表达量会产生影响，从而改变机体的脂肪沉积状况。     

Effect of Alfalfa Flavonoids on Growth Performance and Serum Indexes of Sheep

This experiment was conducted to evaluate the effect of alfalfa flavonoids (Medicago sativa) on growth performance and serum indexes of sheep.This experiment was performed with hybrid F1 sheep of Suffolk sheep×Small-tailed Han sheep.Twenty-eight sheep with the body weight of (27.02±3.03) kg were randomly divided into 4 groups with 7 replicates in each group and 1 sheep per replicate.Sheep in different groups were fed diets with 0 (group Ⅰ), 0.1% (group Ⅱ), 0.2%(group Ⅲ) and 0.4% (group Ⅳ) alfalfa flavonoids, respectively.The experiment was cosisted of 7-day-preliminary trial and 41-day-formal trial.The results showed as follows:① Dietary supplementation of alfalfa flavonoids had no significant effects on growth performance of sheep(P>0.05).② Dietary supplementation of alfalfa flavonoids had significant effects on the contents of GLB, ASP, BUN, HDL and P in serum (P<0.05).Serum GLB content at the 1st day in group Ⅲ was significantly lower than that in groupsⅠand Ⅱ(P<0.05), serum ASP contents at the 1st and 21th days in group Ⅳ were significantly lower than those in group Ⅰ(P<0.05), serum BUN content at the 1st day in group Ⅳ was significantly lower than that in group Ⅰ(P<0.05), serum HDL content at the 21th day in group Ⅱ was significantly lower than that in groups Ⅰ and Ⅲ (P<0.05), serum P content in group Ⅳ at the 21th day was significantly lower than that in groups Ⅱ and Ⅲ (P<0.05).In conclusion, dietary supplementation of alfalfa flavonoids might modulate lipid metabolism, improve nitrogen utilization, maintain energy metabolic and balance Ca and P contents, and have the potential function for promoting growth and no adverse effect on liver.The results suggested that the appropriate supplemental level of alfalfa flavonoids for sheep was 0.2%.     

Effects of Adding Mannan Oligosaccharides to Diets with Different Concentrate to Forage Ratios on Ruminal Fermentation of Sheep in vitro

The test was aimed at determining the effects of adding MOS to diets with different concentrate to forage ratios on ruminal fermentation of sheep in vitro.The 4×6 two-factor experimental design was chosen.There were 4 diets with different concentrate to forage ratios(20:80, 30:70, 40:60 and 50:50) and added to 6 dosages MOS(0, 0.4%, 0.8%, 1.2%, 1.6% and 2.0%), respectively.The method of gas production in vitro was used to measure the total gas and CH₄ production, IVDMD, IVCPD and IVOMD after cultured for 3, 6, 9, 12 and 24 h.The results showed that the gas(except 12 and 24 h) and CH₄ production(except 9 h) were not impacted by the two factors(P>0.05).The IVDMD, IVCPD and IVOMD were significantly affected by concentrate to forage ratios(P<0.05), while the IVCPD at 24 h was significantly affected by MOS(P<0.05).Meanwhile, all the indexes were not influenced by the interaction of two factors(P>0.05).The IVDMD and IVOMD increased with the rising of concentrate approximately, while the IVCPD decreased with the rising of MOS roughly.The biggest associative effect was gained in 30:70 concentrate to forage diet when adding 1.2% MOS.     

AMPK激活剂在绵羊精液冷冻保存中的作用研究

旨在研究AMPK激活剂二甲双胍（metformin，Met）和阿卡地新（acadesine，AICAR）对绵羊精液冷冻保存效果的影响。本研究首先在冷冻基础稀释液中分别添加不同浓度（0、100、200、300、400、500 μmol·L^-1）的Met和AICAR，冷冻解冻后根据精子活力、运动性能和结构完整性指标筛选出最佳的添加浓度（400 μmol·L^-1 Met、200 μmol·L^-1 AICAR）；然后分别使用不同的冷冻稀释液（对照组：稀释液；Met组：含400 μmol·L^-1 Met的稀释液；AICAR组：含200 μmol·L^-1 AICAR的稀释液）冷冻精液，解冻后检测精子中AMPK蛋白表达、顶体酶活性、代谢指标、线粒体功能以及抗氧化酶活性。结果表明，稀释液中添加400 μmol·L^-1 Met和200 μmol·L^-1AICAR均可显著提高解冻后精子活力、运动性能及精子结构完整性（P<0.05），其中400 μmol·L^-1 Met组精子总活力达43.20%，顶体完整率为91%，质膜完整率为46%。与对照组相比，Met组和AICAR组解冻后精子中AMPK磷酸化水平显著升高（P<0.05）；顶体酶活性显著提高（P<0.05）；丙酮酸水平显著下降（P<0.05），乳酸脱氢酶活性、乳酸以及ATP含量均显著升高（P<0.05）；与对照组相比，Met和AICAR组稀释液更有利于维持线粒体膜电位（P<0.05），提高ATP酶（P<0.05）以及抗氧化酶的活性（P<0.05）。添加适当浓度的AMPK激活剂可以提高绵羊精液冷冻保存的效果。     

羊IL-1Ra基因全长cDNA克隆及生物信息学分析

试验旨在对羊白介素1受体颉颃因子（interleukin-1 receptor antagonist，IL-1Ra）基因进行全长cDNA克隆及生物学分析。根据布鲁氏菌感染羊白细胞层SSH cDNA文库中的IL-1Ra基因序列信息及已知核苷酸序列（GenBank登录号：KC425613.1）设计引物，利用RT-PCR结合RACE方法扩增并克隆IL-1Ra基因，对其进行序列及相关分子特性分析。结果表明，羊IL-1Ra基因全长为1 228 bp，可编码174个氨基酸，含有1个完整的IL-1保守结构域和1个IL-1Ra结构域（PHA02651结构域）。IL-1Ra分子质量为19 765.8 u，等电点（pI）为5.72，其分子式为C₈₈₅H₁₃₈₅N₂₃₅O₂₅₆S₁₁，且含有信号肽。二级结构分析显示，IL-1Ra分子存在较多的β折叠及受体结合位点，与三级结构预测结果一致，且与人/鼠IL-1Ra分子的空间结构相似度极高，达到90%以上。羊IL-1Ra有IL-1特有的三叶草结构，其酶结合结构域位于TYR⁴⁷至GLU⁶⁶之间。将羊IL-1Ra与牛、虎鲸、宽吻海豚、猪、家犬、人、鼠等14个物种进行蛋白质同源性比对，发现在各物种间存在5个高度同源的半胱氨酸位点。系统进化树分析发现，羊IL-1Ra基因全长cDNA所编码的氨基酸序列同山羊、牛单独形成一个分支。本研究结果为今后深入研究IL-1Ra基因的生物学功能奠定了基础。     

Establishment and Optimization of INH Epitope Peptide Vaccine for Detection of Antibody

In this study, an indirect ELISA method was established to detect inhibin hormone (INH) epitope peptide vaccine antibody, it would provide oretical reference for the determination of Fine-wool sheep after active immune body INH epitope peptide vaccine antibody. On the basis of the predecessors, using indirect ELISA method to determinate serum INH epitope peptide antibody levels of sheep, and through control different experimental conditions to look for the best experimental conditions. Through explorating the experimental conditions, finally, the testing experiment conditions were determined, which was blocked solution with skimmed milk powder, INH and GnIH synthetic peptides dilution degrees for 20 000 times, the optimum reaction time was 60 min, the best color action time was 15 min. In this experiment, a kind of method to detection antibody in the body after INH active immune sheep was built, it would provide a reference for future research.     

饲粮添加酿酒酵母和地衣芽孢杆菌对绵羊生长性能与瘤胃发酵的影响

【目的】研究饲粮中添加酿酒酵母和地衣芽孢杆菌对绵羊生长性能和瘤胃发酵的影响,为酿酒酵母和地衣芽孢杆菌在肉羊饲粮中的合理应用提供理论依据。【方法】试验选用48只4月龄、体重相近（22.96±2.00）kg、健康的杜泊×小尾寒羊杂交F₁代公羔,根据饲喂添加剂不同随机分为4组：D（对照组,两种菌均不添加）;D1（酿酒酵母,6×10¹⁰CFU/kg）;D2（地衣芽孢杆菌,2×10¹⁰CFU/kg）;D3（酿酒酵母6×10¹⁰CFU/kg+地衣芽孢杆菌2×10¹⁰CFU/kg）,每组12只羊,试验期共75 d,前15 d为适应期,正饲期60d。试验羊每天分别于08:00和18:00进行饲喂,自由采食和饮水。正饲期内每天准确称量记录每只试验羊的喂料量和剩料量,并在第1、30、60 天晨饲前对试验羊进行称重,计算平均日采食量、平均日增重（ADG）及料重比（F/G）。试验结束当天08：00正常饲喂试验羊,3 h后采集瘤胃液,测定发酵参数、消化酶活性以及功能微生物。【结果】1）饲粮中添加酿酒酵母和地衣芽孢杆菌对试验羊的初始体重和终末体重及平均采食量的影响均不显著（P>0.05）,D3组的ADG显著高于D组（P<0.05）,D3组的F/G显著低于D组（P<0.05）,D1和D2组的F/G差异不显著（P>0.05）;2）饲粮中添加酿酒酵母和地衣芽孢杆菌对瘤胃液pH、丁酸浓度及乙丙比的影响均不显著（P>0.05）,D3组的NH₃-N浓度显著低于D组（P<0.05）,TVFA和丙酸浓度显著高于D组（P<0.05）,且D3组与D1和D2组均差异不显著（P>0.05）,D3和D2组的乙酸浓度显著高于D1与D组（P<0.05）;3）D3组的β-葡萄糖苷酶、羟甲基纤维素酶、木聚糖酶及淀粉酶活性均显著高于其他3组（P<0.05）。D1和D2组的β-葡萄糖苷酶、果胶酶、羟甲基纤维素酶及淀粉酶活性与D组无显著差异（P>0.05）。D3组蛋白酶活性显著高于D和D2组（P<0.05）,与D1组差异不显著（P>0.05）,D1和D2组的β-葡萄糖苷酶、果胶酶、羟甲基纤维素酶、木聚糖酶、蛋白酶及淀粉酶活性均差异不显著（P>0.05）;4）添加酿酒酵母和地衣芽孢杆菌对黄色瘤胃球菌、栖瘤胃普雷沃氏菌、嗜淀粉瘤胃杆菌和原虫数量的影响不显著（P>0.05）,D3组的溶纤维丁酸弧菌数显著高于其他3组（P<0.05）,白色瘤胃球菌和产琥珀酸丝状杆菌显著高于D组（P<0.05）,但与D1和D2组差异不显著（P>0.05）。与对照组相比,试验组产甲烷菌数量显著降低（P<0.05）,其中D3组最低。【结论】饲粮中添加6×10¹⁰CFU/kg酿酒酵母和2×10¹⁰CFU/kg地衣芽孢杆菌均会对绵羊瘤胃发酵产生积极影响,提高了瘤胃消化酶的活性,增加了瘤胃有益菌的数量,且二者组合饲喂效果更加显著。     

豫北山区“粮—草—羊”高效平衡养羊模式现状

从粮食作物、经济作物及饲草的种植,饲草料的加工调制与利用,全舍饲肉羊的养殖及杂交繁育,以及羊粪尿的资源化利用等方面介绍了豫北山区“粮—草—羊”高效平衡养羊模式发展现状,以期为促进豫北山区资源可持续利用、山区生态环境良性循环和社会经济可持续发展提供思路。     

羊高频高效繁育调控技术应用现状和操作要点

阐述了羊高频高效繁育调控技术的国内外研究应用现状,并结合生产实践总结出羊高频高校繁育调控技术操作程序及要点,其内容包括：羊的同期发情、多胎技术、精液解冻及镜检、输精前处理、腹腔镜观察卵巢状况、腹腔镜子宫内输精、早期妊娠诊断、羔羊代乳粉、羔羊早期断奶等技术和方法。     

基于双向电泳技术研究湖羊初乳和常乳乳蛋白质组差异

试验旨在分析绵羊初乳和常乳乳蛋白质组的差异，揭示绵羊不同泌乳阶段的乳蛋白质组特征。选用6只胎次相同、预产期相近的湖羊母羊，分别采集分娩后第1、3、7天的初乳和第14、28、56天的常乳，每个时间点采集6份奶样并等体积混合，离心弃去乳脂肪，采用双向电泳（2-DE）技术对初乳和常乳的脱脂乳蛋白进行比较分析。结果发现，初乳中乳蛋白含量较高，且随着泌乳期的延伸，乳蛋白含量降低。以第1天乳蛋白2-DE图谱为参照，第3天检测到38个差异蛋白点，其中有20个蛋白点仅存在于第1天图谱中，有1个蛋白点仅存在于第3天图谱中，其余17个蛋白点呈现表达量的差异；第7天检测到35个差异蛋白点，其中有19个蛋白点仅存在于第1天图谱中，有1个蛋白点仅存在于第7天图谱中，其余15个蛋白点呈现表达量的差异；第14天检测到34个差异蛋白点，其中有11个蛋白点仅存在于第1天图谱中，有1个蛋白点仅存在于第14天图谱中，其余22个蛋白点呈现表达量的差异；第28天检测到38个差异蛋白点，其中有28个蛋白点仅存在于第1天图谱中，有1个蛋白点仅存在于第28天图谱中，其余9个蛋白点呈现表达量的差异；第56天检测到36个差异蛋白点，其中有26个蛋白点仅存在于第1天图谱中，有1个蛋白点仅存在于第56天图谱中，其余9个蛋白点呈现表达量的差异。综上，共检测出44个差异表达的蛋白点，其中有8个蛋白点仅存在于第1天图谱中，而这些蛋白主要涉及免疫活性功能。