羊IL-1Ra基因全长cDNA克隆及生物信息学分析

试验旨在对羊白介素1受体颉颃因子（interleukin-1 receptor antagonist，IL-1Ra）基因进行全长cDNA克隆及生物学分析。根据布鲁氏菌感染羊白细胞层SSH cDNA文库中的IL-1Ra基因序列信息及已知核苷酸序列（GenBank登录号：KC425613.1）设计引物，利用RT-PCR结合RACE方法扩增并克隆IL-1Ra基因，对其进行序列及相关分子特性分析。结果表明，羊IL-1Ra基因全长为1 228 bp，可编码174个氨基酸，含有1个完整的IL-1保守结构域和1个IL-1Ra结构域（PHA02651结构域）。IL-1Ra分子质量为19 765.8 u，等电点（pI）为5.72，其分子式为C₈₈₅H₁₃₈₅N₂₃₅O₂₅₆S₁₁，且含有信号肽。二级结构分析显示，IL-1Ra分子存在较多的β折叠及受体结合位点，与三级结构预测结果一致，且与人/鼠IL-1Ra分子的空间结构相似度极高，达到90%以上。羊IL-1Ra有IL-1特有的三叶草结构，其酶结合结构域位于TYR⁴⁷至GLU⁶⁶之间。将羊IL-1Ra与牛、虎鲸、宽吻海豚、猪、家犬、人、鼠等14个物种进行蛋白质同源性比对，发现在各物种间存在5个高度同源的半胱氨酸位点。系统进化树分析发现，羊IL-1Ra基因全长cDNA所编码的氨基酸序列同山羊、牛单独形成一个分支。本研究结果为今后深入研究IL-1Ra基因的生物学功能奠定了基础。     

布鲁氏菌病的研究与防控进展

布鲁氏菌病（Brucellosis,简称“布病”）是由布鲁氏菌（Brucella）引起的危害严重的人畜共患病,主要危害人畜生殖系统,人与人之间几乎不传播,患病动物是主要的传染源,近几年疫情急骤回升。作者综述了布病的研究现状及其流行趋势,初步探讨布病综合防控面临的主要困境。     

化学CAI课件制作实例

本从化学CAI课件的实例入手，详细介绍了课件的设计流程图、特点、制作中的体会和值得注意的问题。为更好的制作化学CAI教学课件提供借鉴。     

梅花鹿朊蛋白核心片段的基因克隆与高效表达

本试验根据梅花鹿朊蛋白基因序列设计引物,利用PCR的方法从梅花鹿基因组DNA中扩增朊病毒蛋白酶抵抗区域PrP^res,将该片段分别与表达载体pET-Trx和pET-His连接,构建重组表达载体pET-Trx-PrP^res和pET-His-PrP^res。分别将两个重组表达载体转入E.coli BL21(DE3) plys宿主菌中,37 ℃诱导4 h,经SDS-PAGE分析,Trx-PrP^res和His-PrP^res表达量分别为38.2%和30.1%。     

辽西北废弃矿区矸石山地植被恢复技术研究

废弃矿区矸石山地的生态恢复一直是我国生态建设的重要组成部分，由于矸石山地的降水量不足、蒸发强度大、天然降水利用率低、土壤瘠薄、植被发育差、干扰强度大、立地条件恶劣，使造林的成活率和保存率降低，一些林木生长缓慢，稳定性差，林分质量低，发挥不出较高的生态效益。通过学习和应用已有的研究成果，对现有的技术进一步优化整合和组装配套，提出了在辽西北困难立地条件下废弃矿区地植被恢复的有效可行的方法，在遵循矸石山地造林原则的基础上，改善土壤的适生环境，正确的选择造林树种，有效的解决造林树种苗期的水分供应，合理地施用速效肥料是解决矸石山地生态恢复的有效途径。     

多糖在畜牧兽医中的应用

多糖是一种高分子多聚糖。广泛存在于动植物和微生物中．是有机体的重要组成部分。随着近年糖生物学的快速发展，已发现多糖具有促进免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗辐射、抗衰老，抗寄生虫等多种生物活性，对疾病预防和保健都具有明显的促进和增强作用；同时，多糖为天然产物，具有毒副作用小、无残留、不产生耐药性等优点．因而具有广阔的应用前景。目前．人们对多精及其复合物的研究多集中在人医方面，并已有部分产品商业化生产，如黄芪多糖和香菇多糖等．     

羊IL-1Ra基因全长cDNA克隆及生物信息学分析

试验旨在对羊白介素1受体颉颃因子(interleukin-1receptor antagonist,IL-1Ra)基因进行全长cDNA克隆及生物学分析。根据布鲁氏菌感染羊白细胞层SSH cDNA文库中的IL-1Ra基因序列信息及已知核苷酸序列(GenBank登录号:KC425613.1)设计引物,利用RT-PCR结合RACE方法扩增并克隆IL-1Ra基因,对其进行序列及相关分子特性分析。结果表明,羊IL-1Ra基因全长为1 228bp,可编码174个氨基酸,含有1个完整的IL-1保守结构域和1个IL-1Ra结构域(PHA02651结构域)。IL-1Ra分子质量为19 765.8u,等电点(pI)为5.72,其分子式为C_(88)5H_(1385)N_(235)O_(256)S_(11),且含有信号肽。二级结构分析显示,IL-1Ra分子存在较多的β折叠及受体结合位点,与三级结构预测结果一致,且与人/鼠IL-1Ra分子的空间结构相似度极高,达到90%以上。羊IL-1Ra有IL-1特有的三叶草结构,其酶结合结构域位于TYR~(47)至GLU~(66)之间。将羊IL-1Ra与牛、虎鲸、宽吻海豚、猪、家犬、人、鼠等14个物种进行蛋白质同源性比对,发现在各物种间存在5个高度同源的半胱氨酸位点。系统进化树分析发现,羊IL-1Ra基因全长cDNA所编码的氨基酸序列同山羊、牛单独形成一个分支。本研究结果为今后深入研究IL-1Ra基因的生物学功能奠定了基础。     

施用不同化肥后土壤氮磷释放模拟试验研究

为了有效降低农业面源污染,改善江苏省徐州市沛沿河水质状况,通过不同土壤施肥试验和氮磷释放试验研究不同情况下各种土壤在受雨水短期浸泡时氮、磷的释放规律和释放能力.结果表明,稻田土壤保肥能力最强,应以施基肥为主;果园土壤保肥能力最差,应采用少量多次追肥的方法.硫酸铵宜作追肥,尿素宜作基肥.对浸泡试验数据按一级动力学模型进行拟合,结果表明浸泡试验上覆水中TN、TP浓度变化较好的符合一级动力学模型.     

镉、汞、铅污染及其微生物修复研究进展

随着人类活动的增强,重金属的应用越来越广,同时造成的环境污染问题愈发严重,特别是重金属镉、汞、铅。利用微生物技术修复环境污染中的重金属,以其成本低、效率高等特点,已经成为环境污染修复领域的研究热点。作者综述镉、汞、铅污染及其微生物修复的研究进展,并提出利用微生物细胞表面展示技术构建高效吸附重金属的基因工程菌,在微生物修复方面应用的重要价值。     

利用CRISPR/Cas9系统构建Prdx6基因敲除的RAW264.7细胞系

利用CRISPR/Cas9系统构建敲除Prdx6基因的RAW264.7小鼠巨噬细胞系,为探讨Prdx6与布鲁菌感染及胞内寄生的关系构建细胞模型。针对Prdx6基因的第1外显子设计sgRNA,构建重组表达载体Prdx6-pX459-sgRNA,将重组质粒转染RAW264.7细胞,嘌呤霉素初步筛选。单细胞接种并扩繁,提取基因组DNA,PCR及测序鉴定。结果表明,在敲除细胞株基因组中存在碱基缺失,导致移码突变。说明成功获得敲除Prdx6基因的RAW264.7细胞系。