云南省日本血吸虫叉型与非叉型尾蚴COX1基因的遗传差异分析

为分析云南省大理钉螺内检获的日本血吸虫不同型尾蚴的遗传差异,试验采用PCR技术,利用线粒体COX1基因作为遗传标记,对叉型和非叉型尾蚴的部分COX1基因进行了研究。结果表明:大理洱源县检获的叉型尾蚴线粒体COX1基因扩增片段大小为393 bp,巍山县检获的非叉型尾蚴线粒体COX1基因扩增片段大小为418 bp,经序列对比分析两者遗传差异为34.3%。说明云南地区叉型尾蚴和非叉型尾蚴存在明显的种间差异。     

云南日本血吸虫群体生物学的研究

本文报告了我国云南南涧地区日本血吸虫群体生物学的特性。将捕获的该地区光壳钉螺，经人工逸蚴，尾蚴感染实验家兔和小鼠，其平均虫卵开放前期、成虫回收率，两性虫体体长、性腺发育，血吸虫卵引起宿主肝脏组织的病理变化及幼虫大小和毛蚴感染异地钉螺的发育特点作了观察。并进行了11种同工酶电泳图谱和蛋白质组分的分析。     

日本血吸虫童虫冷冻保藏复苏后生活史循环的研究

本文报告了日本血吸虫童虫经液氮冻藏复苏后的生活史循环的情况。童虫冻藏３６天和５０天后腹腔注射感染小鼠，亲代成虫回收率为９．０和８．９％。感染鼠肝内的子代虫卵孵出的子１代毛蚴感染钉螺，感染率为５９和６７％；平均每个钉螺第１次逸出的子１代尾蚴数为８００～９００条。子１代尾蚴感染小鼠后，其子１代成虫回收率为５５和５６％。合抱雌、雄成虫的体长、性腺的发育和虫体对宿主的致病力与正常途径感染者无明显差异。     

检测日本血吸虫感染性钉螺环介导等温扩增方法的建立

为建立检测日本血吸虫感染性钉螺的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,利用PrimerExplorer V3软件设计4条扩增血吸虫尾蚴钙结合蛋白基因的LAMP引物,酚氯仿法提取血吸虫感染性钉螺、阴性钉螺及肝吸虫感染豆螺基因组DNA进行LAMP反应,LAMP产物经显色、电泳、酶切及DNA序列分析鉴定.在100个阴性钉螺中分别加入20、10、8、6、4、2、1个阳性钉螺,提取DNA后进行LAMP扩增来检测该法的群体检测效果.结果显示,感染性钉螺检测管经显色后呈绿色(阳性),对照组呈棕色(阴性);感染性钉螺LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带,阴性钉螺及感染肝吸虫豆螺无扩增产物;酶切及序列分析结果显示扩增产物为目的基因;LAMP可检测到100个阴性钉螺中含有阳性钉螺的最低数为2.结果表明,检测日本血吸虫感染性钉螺的LAMP方法特异、简便及具有较好的群体检测效果.     

羊踯躅提取物对日本血吸虫虫卵肉芽肿影响

对感染15条日本血吸虫尾蚴的雌性小鼠分别于感染后45 d起灌胃羊踯躅提取物及吡喹酮,结果小鼠肝内虫卵肉芽肿平均直径和肉芽肿内嗜酸性粒细胞明显减少。试验结果表明,羊踯躅提取物与吡喹酮对血吸虫虫卵肉芽肿的发展具有明显抑制作用。     

苏云金杆菌晶体蛋白不同给药途径对小鼠体内日本血吸虫的作用

将小鼠人工感染日本血吸虫尾蚴 40条 /只 ,30 d后将苏云金杆菌伴胞晶体蛋白以不同的给药方式 (静脉注射、肌肉注射、灌胃、腹腔注射 )给药 ,用药后 15 d剖检查虫。结果发现 ,各种给药方式对小鼠体内的日本血吸虫成虫均有一定的效果 ,但以静脉注射效果最好 ,肌肉注射次之 ,灌胃和腹腔注射效果较差。这表明苏云金杆菌制剂作用于小鼠体内的日本血吸虫时 ,静脉注射是最佳给药途径。     

单性血吸虫带虫免疫对继发血吸虫病的影响

研究表明,辐照致弱血吸虫尾蚴疫苗能够诱导宿主产生较高的免疫保护作用,是所有血吸虫候选疫苗中保护力最强的,且辐照致弱尾蚴在宿主体内不能发育成熟,不会对宿主造成严重的病理损害。单性感染的血吸虫同样不能在宿主体内发育成熟,其发育状态停留在童虫阶段,也不会对宿主造成严重的病理损害,在童虫状态下对宿主持续进行的免疫刺激,是否也能诱导宿主对继发血吸虫病产生较高的免疫保护作用呢？为此,本研究通过让宿主携带单性血吸虫雄虫的带虫免疫方式来检测其对继发血吸虫病的影响。选用雄性血吸虫尾蚴感染BALB/c小鼠（100条/只）,于单性血吸虫尾蚴攻击后第5、7 w用吡喹酮进行治疗（300mg/kg）,第9 w进行雌雄血吸虫混合尾蚴攻击实验动物（40条/只）,第15 w剖杀实验动物,收集宿主荷虫、宿主肝卵负荷、肝卵孵化、宿主肝单卵肉芽肿体积数据,并检测宿主血清特异性抗体变化趋势。结果表明单性带虫免疫可以引起宿主肝虫卵孵化率及组织病理损伤显著降低,对宿主有一定的免疫保护效果。     

东方田鼠重复感染日本血吸虫试验研究初步

本试验以1000条日本血吸虫尾蚴同时攻击感染东方田鼠洞庭湖种群和东方田鼠宁夏指名亚种进行重复感染对比试验，并在攻击后不同天数分别同时解剖相数目的两种群东方田鼠，收集其体内不同时段，不同部位的日本血吸虫童虫，比较结果证实东方田鼠对日本血吸虫具有天然的抗性，其抗性是可遗传的，不以东方田鼠的地域分布不同、生活环境的差异或传代数目的变化而有所不同，与获得必免疫无关。     

东方田鼠感染日本血吸虫前后血常规和血清生化指标的动态变化

东方田鼠具有天然抗日本血吸虫病特征,为了探索东方田鼠抗日本血吸虫机制,本研究分析了东方田鼠和小鼠感染日本血吸虫尾蚴前后血液细胞以及生化指标的动态变化。东方田鼠和BALB/c鼠定量感染日本血吸虫尾蚴,于感染后第0、1、3、5、8、12、16、21、28、35、42 d分别采集抗凝血和血清,进行血常规和血清生化分析。血常规检测结果表明,东方田鼠感染后第3~16 d,WBC数量显著升高(Neu数量显著升高),而小鼠血常规检测结果正常;血清生化结果显示,东方田鼠感染日本血吸虫后ALB、HDL-C显著升高,小鼠各指标变化不明显。本研究结果显示东方田鼠天然免疫细胞Neu和血清ALB可能与其抗日本血吸虫特性相关,对补体杀伤日本血吸虫机制研究具有重要的指导意义。     

感染日本血吸虫前后东方田鼠血清补体的动态变化和杀虫作用

东方田鼠是迄今为止发现的唯一一种具有天然抗日本血吸虫病特性的哺乳动物,但具体抗病机制尚不明确。本研究应用组织培养法比较了东方田鼠和BALB/c鼠感染日本血吸虫尾蚴后1、3、8、12、15 d的皮肤、肺脏和肝脏中童虫回收情况,结果表明东方田鼠对日本血吸虫的杀伤主要发生在感染后1～3 d和8～12 d。应用RT-PCR和ELISA检测东方田鼠和BALB/c鼠的补体相关分子C3、C9、CD59和DAF的转录水平,结果显示BALB/c小鼠各指标变化不明显,东方田鼠感染后8 d各因子转录水平显著升高。体外杀虫试验结果显示,东方田鼠正常血清和灭活补体血清孵育的日本血吸虫童虫死亡率分别为85.50%±7.15%和60.99%±8.61%,差异具有显著统计学意义(P 0.001)。结果表明东方田鼠补体对日本血吸虫童虫具有显著杀伤效果,东方田鼠早期对日本血吸虫的杀伤作用可能和补体相关。     

羊角拗甙对日本血吸虫虫卵肉芽肿的影响

对人工感染18条日本血吸虫尾蚴的雌性小鼠分别于感染后41 d起灌服羊角拗甙及吡喹酮,观察其对小鼠肝内虫卵肉芽肿和肉芽肿内嗜酸性粒细胞的影响。结果表明,小鼠肝内虫卵肉芽肿平均直径和肉芽肿内嗜酸性粒细胞明显减少,羊角拗甙与吡喹酮对血吸虫虫卵肉芽肿具有明显抑制作用。     

农业部家畜血吸虫病流行病学观测点2011年观测结果情况

2011年对8个家畜血吸虫病观测点血吸虫感染、野粪污染情况以及螺情进行了调查.全年共检测了21091头牛、1425只羊以及1760头(匹)其他家畜,血吸虫病感染率分别为0.42％、0.63％和0％.在97头(只)感染家畜中,90.72％(88头)为牛,9.28％(9只)为羊.江西省吴城镇和湖南省南大膳镇的牛血吸虫感染率超过4％.在湖南省和江西省的观测点中发现家畜粪便有血吸虫虫卵污染,其中96.15％阳性野粪为牛粪.所有观测点都有钉螺分布,但阳性钉螺主要分布在湖南省和江西省的观测点.观测结果显示湖南省洞庭湖和江西省鄱阳湖地区是目前防控家畜血吸虫病的重点地区,且病牛依然是血吸虫病疫区(尤其是湖沼型地区)的主要传染源.     

东方田鼠组织与血清中抗日本血吸虫相关蛋白的分离与筛选

本试验以兔、牛、人及感染日本血吸虫后小鼠血清蛋白为对照,分别提取东方田鼠和小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉、皮肤、骨髓和脑组织蛋白,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,综合比较和筛选东方田鼠组织及血清中潜在的抗日本血吸虫相关蛋白组分。结果表明,随着感染日龄的增加,小鼠在感染日本血吸虫后12和45 d,其血清中85 ku附近蛋白质条带较东方田鼠表达量明显上调,且有继续升高的趋势;东方田鼠肝脏及血清中150 ku组分蛋白电泳条带与其他动物相同组织中相应蛋白质在表达量存在显著差异,蛋白质表达丰度高,该蛋白质组分可能与东方田鼠抗日本血吸虫作用相关。     

中国大陆不同地区日本血吸虫虫卵抗原的比较研究

本研究应用安徽、江苏、江西、湖北、湖南、四川和云南７个自然隔离群日本血吸虫尾蚴感染家兔和小鼠的血清对同源及异源可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ）进行酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）。结果显示：用同源虫卵抗原检测各地感染血清，其抗体应答水平并不高于应用异源虫卵抗原的。各地虫卵抗原的抗原性并不一致。     

家鸭具有作为血吸虫转运宿主的可能性

为研究日本血吸虫(Shistosomia japonicum)卵通过家鸭消化系统后的孵化能力,将人工感染血吸虫尾蚴45 d的小鼠剖杀,取肝脏和小肠制成匀浆,并进行虫卵计数,将带有虫卵的肝脏及小肠匀浆液分别灌喂家鸭,观测不同时间收集鸭粪的毛蚴孵出情况。结果显示,经过家鸭体内2 h后,粪便中孵化率达到峰值,相对孵化率分别为0.61%和4.066%;7 h后,没有虫卵能孵化出毛蚴。同一批次的虫卵所孵化的毛蚴中,大约经过4 h后其孵化率达到峰值。结果表明,日本血吸虫虫卵通过家鸭消化系统后仍有部分依然保持孵化能力,家鸭具有可能作为血吸虫的转运宿主,拥有传播血吸虫有效虫卵的能力。     

3个日本血吸虫新基因的克隆和分析

为获得新的可表达保护性抗原分子的编码基因 ,以重复感染兔血清为探针 ,筛选日本血吸虫成虫 c DNA文库 ,对获得的阳性克隆进行 PCR鉴定并测序后 ,通过互联网将测序结果进行同源性分析 ,并对新基因的编码阅读框及其编码蛋白质的结构及功能进行预测。 3个日本血吸虫新基因 IR1、IR2、IR3在 Gen Bank的登录号分别为 AY1 70 31 3、AY1 73930、AY2 5 1 4 81。 BL AST分析结果表明 ,它们与 Gen Bank中其他基因无显著的同源性。其中 IR3为全基因 ,含897个碱基 ,编码 2 99个氨基酸 ,推测等电点 ( p I)为 6 .0 9,相对分子质量约为 331 90     

中华拟德氏吸虫与日本血吸虫的RAPD遗传标志分析

中华拟德氏吸虫(Paradeontacylix sinensis)是冷血吸虫,日本血吸虫(Schistosoma japonicum)是温血吸虫的重要代表。分别对中华拟德氏吸虫和日本血吸虫成虫的全基因组进行随机扩增多态性研究,筛选出31种随机引物,对2种成虫扩增得到189条多态性基因片断,S6、S46对中华拟德氏吸虫全基因组有特异性,分别扩增出一条大小约399bp和695bp的特异性强条带;引物S2对日本血吸虫基因组有特异性,只扩增1条1670bp的特异性强条带。多数引物对中华拟德氏吸虫和日本血吸虫成虫全基因组扩增出大小相似的条带,推测中华拟德氏吸虫与日本血吸虫的亲缘关系密切。     

编码日本血吸虫CIAPIN1 cDNA的克隆及其重组蛋白的原核表达

本研究利用生物信息学并结合分子生物学实验对日本血吸虫细胞因子诱导凋亡因子CIAPIN1（cytokine induced apoptosis inhibitor 1）基因进行了初步研究。研究表明日本血吸虫存在CIAPIN1同源基因,将其命名为SjCIAPIN1,SjCIAPIN1基因已知cDNA长1143 bp,包括完整的CDS,编码276个氨基酸,预测分子量为30.55863 kDa。通过原核表达系统对该蛋白进行了重组表达和纯化,并制备了多克隆抗体制备。Western blot分析表明,本研究制备的多克隆抗体能与SjCIAPIN1重组蛋白特异识别。     

新疆阿魏杀灭钉螺及血吸虫毛蚴的研究

目的:探讨新疆阿魏杀灭钉螺及血吸虫毛蚴效果。方法:(1)将新疆阿魏根浸泡24h,水浸液煮1h,配制成不同浓度的溶液处理钉螺及血吸虫毛蚴。(2)以95%乙醇提取、溶剂萃取、硅胶柱色谱分离等方法从新疆阿魏根中提取分离得7种化合物,并将其配制成不同浓度溶液作浸杀钉螺及血吸虫毛蚴的试验,统计钉螺及血吸虫毛蚴死亡率。结果:阿魏水浸液及其有效化合物具有显著的杀灭钉螺及血吸虫毛蚴的活性。