细菌L型的形成机制与特性

细菌细胞壁部分缺损或完全丧失而形成的细菌称为L型,细菌L型是细菌重要的形态变异类型。本文对细菌L型的形成机制、鉴定方法、致病性及细菌L型的耐药机制进行了综述,以期对兽医临床有其参考价值。     

猪胆囊中沙门菌L型的分离培养与invA基因检测

为了解猪胆囊中沙门菌L型携带情况,在贵阳市屠宰场采集970例健康生猪的胆囊组织与胆汁标本,用常规细菌学方法和非高渗分离培养法分离沙门菌及其细菌L型,用PCR和核酸序列分析方法对稳定L型纯培养物进行沙门菌的invA基因检测。结果显示,970例生猪胆囊标本未检出沙门菌细菌型,细菌L型检出率为8.25%;80例细菌L型分离物中有50例invA检测阳性,占5.15%;占细菌L型阳性分离物62.50%。研究结果为生猪胆囊沙门菌L型感染的流行病学及其检查提供了依据。     

鸟肠球菌L型的分离与鉴定

细菌L型是细菌在体外受到各种直接或间接损伤细胞壁的理化和生物因素的影响，其细胞壁受到破坏或合成受阻而转化成一种细胞壁缺失或缺陷的细菌。细菌侵入人或动物体后可因体内种种因素，如机体免疫和使用抗菌药物等的影响，出现细胞壁缺损而形成L型。     

氨苄西林诱导大肠杆菌L型的试验研究

为诱导大肠杆菌L型,以氨苄西林作为诱导剂,采用药物纸片法进行反复传代,对抑菌圈边缘菌落进行涂片、革兰氏染色及细胞壁染色、镜检,观察其菌落及菌体的形态,并对获得的稳定细菌L型进行致病性试验,以期为兽医临床开展L型菌检测及其相关试验提供理论基础.结果表明,采用氨苄西林药物纸片(200μg/片)经过9次传代,可获得稳定的细菌L型,且该L型菌具有致病性.     

支原体研究:历史回顾与热点分析

支原体研究始于1898年。支原体不仅是目前已知能自由生活的最小微生物,在自然界中广泛存在,很多种类还是动植物和人类的重要病原体,加上体外培养的细胞常常被多种支原体污染,其体积很小,能通过细菌滤器,因此支原体曾在最初的好几年中都被认为是一种病毒。随后,人们发现了L型细菌,这种细菌和支原体形态相似,它也具有奇特的"油煎蛋"样菌落,于是,支原体与这种部分或全部缺失细胞壁的L型细菌混淆。20世纪五六十年代,关于支原体的文献对将支原体定义为L型细菌存在分歧。直到60年代末期,用DNA杂交技术获得的第一份基因分析数据,排除了支原体与稳定L型细菌的任何关系。现在已经认为L型细菌是有细胞壁的。尽管如此,从长远发展的眼光来看,将支原体与L型细菌联系起来也不是完全错误的。尽管现在对支原体已不陌生,但对微生物学家来说,支原体的性质、与其它微生物的关系和分类学情况在很长一段时间里都是谜团。因此,支原体研究越来越备受关注。本专题从支原体细胞形态学、生态学、体外培养、代谢途径、基因组测序、构建合成、致病机制研究,以及支原体黏附、抗原变异、免疫系统的调节作用等进行了全面系统的阐述,供兽医工作者参考。     

高原环境下两种变异L型细菌的分离培养及鉴定

研究高原环境下L型变异细菌的变异量和抗原特征,以期为高原家畜L型细菌引发相关性疾病的临床诊治及有效预防奠定基础。选用藏系绵羊消化道食糜、藏系绵羊鼻液、西藏黄牛粪便为分离培养对象,采用特殊培养基分离培养、染色镜检、生化鉴定、血清型鉴定及PCR检测方法进行相关性研究。结果表明:L型大肠杆菌在高渗XLD培养基上呈现3种菌落形态,西藏黄牛粪便中变异菌比例为(40.69±56.67)%的菌落呈"油煎蛋样"型(L型),(52.73±36.68)%的菌落为颗粒型(G型),(6.57±6.65)%的菌落为菌丝型(F型);藏系绵羊消化道食糜变异菌比例中(64.41±85.66)%的菌落为L型,(28.81±14.34)%的菌落为G型,(6.78±0.00)%的菌落为F型。L型巴氏杆菌在高渗TSLN培养基上生长出2种菌落形态,占藏系绵羊鼻液中变异菌的(97.67±89.50)%为G型,(2.65±10.50)%的菌落为L型;藏系绵羊消化道食糜中(82.28±88.92)%的菌落为G型,(17.72±11.08)%的菌落为L型。挑取纯化后的正常菌进行革兰染色,观察到正常大肠杆菌两端呈粉红色、钝圆,革兰阴性短杆菌;正常巴氏杆菌两端钝圆,中央微凸起,单个或成对存在的革兰阴性短杆菌;挑取L型细菌"油煎蛋样"菌落,镜检可见L型大肠杆菌呈卵圆形、长杆状的革兰阴性菌;L型巴氏杆菌呈棒状、杆状的革兰阳性菌;用鞣酸-龙胆紫染色法染色,在高倍镜下观察,L型大肠杆菌、L型巴氏杆菌全菌染成蓝紫色,菌体长是正常菌的2～3倍,菌体呈椭圆、棒状、杆状等多种形状。L型细菌因细胞壁的缺失,生化鉴定与正常菌不同。正常大肠杆菌及正常巴氏杆菌生化鉴定符合《伯杰氏系统细菌学手册》中描述的生化特性,L型大肠杆菌除与正常大肠杆菌苯丙氨酸差异最大,其余生化鉴定差异不明显;L型巴氏杆菌与正常巴氏杆菌生化鉴定相比,表现为氧化酶试纸条呈蓝色,半固体琼脂穿刺、V-P、鸟氨酸脱羧酶肉汤、赖氨酸脱羧酶肉汤、山梨醇、蜜二糖及棉子糖生化鉴定为阳性;色氨酸脱羧酶肉汤生化鉴定为阴性。L型大肠杆菌血清凝集强度低于正常大肠杆菌,最强为2+,正常大肠杆菌最强为4+。L型大肠杆菌条带亮度从高到低依次为O15-R、O91-2R、O8-F,正常大肠杆菌电泳条带亮度从高到低依次O91-2R、O15-R、O21-F;L型巴氏杆菌条带亮度从高到低依次为A-F、B-F、F-F,正常巴氏杆菌电泳条带A-F、B-F、E-F。综上,L型细菌的抗原性发生改变。不同细菌的基因型适应高原环境的能力、在强紫外线下发生变异的概率、细胞壁中抗原性等发生变异的概率也均不同。     

禽源大肠杆菌L型诱导及对常用抗菌药物敏感性研究

为了研究大肠杆菌L型,以氨苄青霉素作为诱导剂,采用药物纸片法对细菌进行反复传代,革兰氏染色及细胞壁染色、镜检,观察菌落及菌体形态,对稳定的L型菌进行致病性及药物敏感性试验。结果表明,大肠杆菌经11次传代可形成稳定的L型菌,且该L菌具有致病性;L型菌对氨苄西林、头孢他啶、头孢唑啉具有一定的耐药性。本研究为开展L型菌检测及指导临床用药提供理论依据。     

产气荚膜梭菌和腐败梭菌在厌氧菌基础培养基中的生长特性

测定了产气荚膜梭菌B型、D型和腐败梭菌在新研制的厌氧菌基础培养基中的生长曲线和产毒能力等特性。结果表明,这些细菌可以在新培养基中良好生长和产毒。产气荚膜梭菌B 型经2 h 的适应期后,很快进入对数生长期,培养到8 h细菌密度接近最高值,OD630为4.329;经检测,培养4 h~24 h的细菌所产生的毒素(培养物上清)1μL~2μL可致死KM小鼠。产气荚膜梭菌D型的生长速度也较快,无适应期就直接进入对数生长期,培养到12 h 时细菌密度最高, OD630 为1.75;细菌最佳产毒期在6 h~14 h,培养物上清0.5μL~0.65μL可致死KM小鼠。腐败梭菌生长速度较慢,经6 h的适应期后,才进入对数生长期,培养到14 h时细菌密度最高,OD630为1.335;细菌毒力在培养后的6 h~24 h内10μL菌液可达到在24 h内致死KM小鼠的效果。     

A型产气荚膜梭菌α-毒素生产发酵工艺

利用全自动机械搅拌发酵罐对A型产气荚膜梭菌α-毒素的生产发酵工艺进行研究。设立温度、pH值和发酵时间3个因素,采用L9(34)正交优化设计方法,确定各因素对A型产气荚膜梭菌α-毒素产毒量的影响程度,并绘制发酵过程细菌生长曲线和产毒曲线。结果显示,pH对细菌的产毒量影响显著(0.01P0.05),发酵时间、温度对细菌产毒量影响不显著(P0.05)。结果表明,pH7.0、发酵温度43℃、发酵时间6 h为A型产气荚膜梭菌α-毒素生产发酵工艺条件。     

载铜蒙脱石体外杀菌效果及其机理

选用断奶仔猪肠道中的大肠杆菌K88和猪霍乱沙门菌作为指示菌。杀菌性能的测定采用最低抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）,并绘制杀菌曲线。原子吸收光谱仪测定Cu2＋在肉汤和生理盐水中的释放量;透射电镜观察细菌细胞壁的变化;全自动生化分析仪测定细菌胞内酶的活性;通过K＋电极测定K＋释放量;采用SP-2型溶氧仪测定菌体悬浮液中的溶氧量。结果显示,载铜蒙脱石对E.coli K88的MIC为64mg/L,MBC为256mg/mL;对S.choleraesuis的MIC为128mg/L,MBC为512mg/L。而蒙脱石未显抗菌活性。透射电镜下观察细菌与载铜蒙脱石作用后形态发生了变化,细菌细胞膜受损,内容物外漏;细菌胞内酶活性结果显示,胞内酶的大量外漏,与对照组相比,均差异极显著（P〈0.01）;大量自由的K＋从细菌细胞内释放出来;呼吸代谢结果显示,载铜蒙脱石抑制了细菌呼吸代谢的三羧酸循环途径。结果表明,载铜蒙脱石具有强大的杀菌作用。     

鸡蛋储存过程中细菌生长繁殖规律分析

试验旨在研究新鲜鸡蛋在常温与冷藏保存条件下细菌生长繁殖规律,为鸡蛋的合理保存与消费提供参考。新鲜鸡蛋分2组,分别进行常温与冷藏储存,检测各组鸡蛋0、7、14、21和28 d蛋壳表面及蛋内容物细菌总数。结果显示:蛋壳表面的细菌总数,保存前(0 d)为8.5×10~3cfu/m L,常温与冷藏条件下均出现稳定增长,常温保存增长较快。28 d时常温与冷藏保存细菌总数分别达到3.99×10~4cfu/m L和3.25×10~4cfu/m L(P0.05);蛋内容物中细菌总数,保存前(0 d)与冷藏保存7 d均未检出细菌,常温保存14 d后细菌总数快速增加,常温和冷藏条件下28 d分别达到3.97×10~3cfu/m L和8.15×102cfu/m L(P0.01)。蛋壳表面与内容物细菌总数随保存时间延长呈上升趋势,低温保存能够抑制细菌生长,延长鸡蛋的保质期。     

一株禽多杀性巴氏杆菌的分离鉴定

为弄清湖南省某鸡场发病病因,对送检的病死鸡进行了解剖、组织细菌的分离,并对分离菌株进行了生化鉴定、16SrDNA扩增测序分析,且进一步测序分析了其荚膜和脂多糖PCR分型。解剖结果发现,6只鸡均有心包积液、肺脏实变、肝脏表面有许多针尖状灰白色的坏死点,脾脏和肠无明显症状。对采集组织脏器肝脏、肺脏、脾脏,接种TSA平皿后,均有长出卵圆形菌落。纯化后革兰氏染色为G-短小杆菌,经细菌鉴定仪鉴定为多杀性巴氏杆菌。16SrDNA测序结果显示其与巴氏杆菌美国株CCUG17978的同源性为100%;通过荚膜和脂多糖PCR分型鉴定为荚膜A型和脂多糖L1型。经使用巴氏杆菌较为敏感的磺胺类药物对应性治疗后,鸡群恢复健康。该鸡场发病系荚膜A型和脂多糖L1型巴氏杆菌感染。     

国内部分地区多杀性巴氏杆菌荚膜血清型和基因型的研究

为了解国内部分地区不同动物多杀性巴氏杆菌(P.multicida)流行情况,本研究以36株P.multicida为研究对象,通过多重荚膜PCR、多位点序列分型(MLST)和脂多糖多重PCR(LPS-m PCR)对其荚膜型和基因型进行鉴定。采用多重荚膜PCR方法将36株细菌的荚膜血清型分为A、B和D 3种,其中禽源P.multicida主要以A为主;以LPS-m PCR方法将P.multicida分为L1、L2、L3和L6 4种LPS基因型,禽源P.multicida主要为L1型;通过MLST技术将P.multicida分为ST-129、ST-8、ST-58、ST-5、ST-13、ST-50和ST-122 7种ST型,禽源P.multicida主要为ST-129型。本研究为P.multicida的流行病学监测和基因多样性提供了技术支撑。     

不同絮凝剂对光合细菌采收的影响

相对于高速离心分离,采用絮凝技术采收光合细菌,具有耗能少、成本低、操作简单等特点。因此,本试验旨在研究不同质量浓度的硫酸铝、聚合氯化铝、硫酸亚铁、氯化铁及酵母细胞壁絮凝采收光合细菌的效果。结果显示：5 种絮凝剂均能高效回收光合细菌,氯化铁采收光合细菌的最适质量浓度为 1000 mg/L,回收率高达（98.11±0.24）%|硫酸铝的最适质量浓度为1000 mg/L,回收率为（94.12±0.13）%|硫酸亚铁的最适质量浓度为 1500 mg/L,回收率为（90.56±0.16）%|酵母细胞壁的最适质量浓度为 80 mg/L,回收率为（77.65±0.33）%|聚合氯化铝的最适质量浓度为 2000 mg/L,回收率为（70.83±0.44）%。酵母细胞壁用量低、无毒害,更适合用于采收光合细菌|综合考虑,酵母细胞壁添加浓度以80 mg/L最宜,沉降浓缩时间为1 h。 [关键词] 光合细菌|絮凝|采收|硫酸铝|聚合氯化铝|硫酸亚铁|氯化铁|酵母细胞壁     

犊牛肺炎多杀性巴氏杆菌荚膜血清型和基因型的研究

从石河子及附近地区规模化牛场死于肺炎的犊牛肺脏中共分离8株多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm),为了确定分离菌株的血清型和基因型,分别进行了多重荚膜特异基因PCR检测、脂多糖多重PCR(LPS-m PCR)分型和多位点序列分型(MLST)鉴定和分析。结果显示8株分离菌中,7株为荚膜A型,1株为荚膜B型;LPS-m PCR结果显示其中7株菌为L2,1株为L3基因型;MLST技术将8株细菌中的7株分为ST1型,1株分为ST44型,且两者亲缘关系较近。结果表明8株Pm以荚膜血清A型为主,根据LPS基因特异性将其分为2个基因型,基于管家基因的MLST将8株Pm分为两种ST型。     

养猪场头孢噻呋巧用的技巧

正1)最常见的小猪保健。一般用量是0.5、0.5、1.0 m L,主要预防小猪葡萄球菌、链球菌、副猪等细菌病效果较好,而且可以预防小猪拉稀。2)副猪的治疗。头孢+恩诺沙星治疗关节型效果良好,呼吸道型一般都有其他病干扰,所以效果不好。3)治疗方面。链球菌(关节型头孢+安痛定效果比较好)、乳房炎(高配方案可用林可霉素+头     

日粮纤维水平对鹅盲肠细菌多样性的影响

旨在探讨不同纤维水平日粮对卡洛斯鹅盲肠细菌多样性的影响。选用35日龄健康卡洛斯公鹅90只,随机分成5%纤维水平组(L组)和8%纤维水平组(H组),每组3个重复,每个重复15只鹅,试验期为42d。试验结束后,采用高通量测序方法对鹅盲肠黏膜细菌进行分析。结果表明,H组检测出的细菌属于17门类的199个属,L组检测出的细菌属于19门类的226个属;H组和L组细菌多样性无显著差异(P0.05);H组Verrucomicrobia、Deferribacteres菌门和Desulfovibrio、Prevotella、Helicobacter、Mucispirillum、Akkermansia菌属相对丰度显著高于L组(P0.05),L组Synergistetes、Euryarchaeota菌门和Bacteroides、Methanobrevibacter菌属相对丰度显著高于H组(P0.05)。结果提示,5%和8%日粮纤维水平对鹅盲肠细菌多样性无显著影响,但可显著影响Desulfovibrio、Prevotella、Helicobacter、Mucispirillum、Akkermansia、Bacteroides、Methanobrevibacter菌属的相对丰度。     

熊胆滴眼液药理作用的初步研究

采取常规药理实验方法研究了熊胆滴眼液的药理作用。结果显示 :熊胆滴眼液对绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌有较强的抑菌、杀菌作用。每毫升眼药水含 2 .8× 10 3 个细菌时 ,作用 30 min有抑菌作用 ;每毫升眼药水含 2 .8× 10 2 个细菌时 ,在 5 min内能杀死绿脓杆菌 ;每毫升眼药水含2 .8× 10 2 个细菌时 ,作用 30 min有抑菌作用 ,作用 2 h能杀死金黄色葡萄球菌。熊胆滴眼液稀释1∶ 2 0以下时对 3型腺病毒感染 He L a细胞及疱疹病毒感染 L92 9细胞具有良好的保护作用 ,即有抗病毒作用 ,其对疱疹病毒作用更明显。对小鼠耳肿胀具有明显的消炎作用。熊胆滴眼液滴眼后 ,眼球结膜血流速度有所加快 ,血管管径有所增加 ,但统计学处理没有明显差异     

猪呼吸道疾病的诊治

猪呼吸道疾病分为多种类型,有细菌型、病毒型、细菌和病毒混合型和寄生虫型等,因此,对不同类型的呼吸道疾病要有针对性的治疗措施。     

猪呼吸道疾病的诊治

猪呼吸道疾病分为多种类型,有细菌型、病毒型、细菌和病毒混合型和寄生虫型等,因此,对不同类型的呼吸道疾病要有针对性的治疗措施。