酵母水解物对低盐胁迫凡纳滨对虾非特异性免疫及抗氧化能力的影响

本实验旨在研究饲料中添加酵母水解物对凡纳滨对虾在低盐度胁迫条件下非特异性免疫和抗氧化能力的影响。选取凡纳滨对虾[初始体质量（15.82±0.08）g],平均分为2组,对照组投喂基础饲料（Y0）,实验组投喂添加了3%酵母水解物的实验饲料（Y3）,在室内养殖15d后分别放入盐度为4‰（S4）和28‰（S28）的水体中进行盐度胁迫实验,每组6个重复,每个重复30尾虾（根据饲料和盐度不同组合,分组命名为Y0S4、Y0S28、Y0S3、Y0S28）。结果表明：饲料中添加3%酵母水解物对凡纳滨对虾血清酚氧化酶（PO）、总一氧化氮合成酶（TNOS）活性没有显著影响,但低盐度胁迫1h时,Y3S4组PO、TNOS活性显著高于Y0S4组;盐度因素对PO、TNOS活性产生显著影响,低盐度胁迫1h时,S28组PO、TNOS活性显著高于S4;饲料中添加3%酵母水解物显著提高了凡纳滨对虾肝胰腺超氧化物歧化酶（SOD）活性;盐度因素对酸性磷酸酶（ACP）活性产生了显著影响,S28组ACP活性显著高于S4。由此可见,在饲料中添加酵母水解物能够提高凡纳滨对虾肝胰腺SOD活性,提高对虾的抗氧化能力;在遭遇低盐度胁迫时,对虾能迅速恢复PO、TNOS活性至正常水平,从而提高凡纳滨对虾的抵抗不良环境的能力。     

盐度对凡纳滨对虾血细胞吞噬与免疫相关因子基因表达的影响

在水温27～29℃下,将平均体长7.01 cm的凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei饲养在730 mm×530 mm×450 mm的水族箱中,每箱30只,盐度6、18和30,每个盐度组3个平行,饲养6周,探讨盐度对凡纳滨对虾血细胞吞噬与免疫相关因子基因表达的影响。结果表明:盐度30和18组凡纳滨对虾血细胞吞噬活性显著高于盐度6组对虾(P0.05),盐度18组血细胞吞噬活性最高。30和18盐度组凡纳滨对虾肝胰腺中Toll样受体(TLR)、免疫缺陷基因(immune deficiency,IMD)、酚氧化酶(PO)、过氧化氢酶(CAT)及溶菌酶(LZM)基因表达水平显著高于盐度6组(P0.05);18盐度组凡纳滨对虾血细胞中TLR、IMD、PO、SOD及LZM基因表达显著高于6盐度组(P0.05);盐度30组对虾的TLR基因表达水平显著高于盐度18组(P0.05),而盐度30组对虾的PO和CAT基因表达水平显著低于盐度18组(P0.05);其他免疫因子基因的表达水平没有显著性差异。综上,环境中盐度的变化可能通过影响凡纳滨对虾各组织的抗氧化能力、溶菌活性、识别能力和血细胞吞噬活性等,调控凡纳滨对虾细胞和体液免疫。     

海水养殖与低盐养殖凡纳滨对虾生长性能、酶活及RNA/DNA比值的差异

以初始体重为4.04d:O.14 g的凡纳滨对虾为研究对象,分别在盐度1.5和30的水体中用同一种配合饲料喂养50d,探讨海水养殖和低盐养殖对凡纳滨对虾生长性能、碱性磷酸酶及酸性磷酸酶和RNA/DNA比值的影响.结果显示,海水养殖凡纳滨对虾的成活率、特殊增长率(SGR)高于低盐养殖对虾(P＜O.05);海水养殖凡纳滨对虾的饲料系数(FCR)明显低于低盐养殖对虾(P＜O.05);海水养殖凡纳滨对虾肝胰脏碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性均明显高于低盐养殖对虾(P＜O.05);海水养殖凡纳滨对虾肌肉RNA/DNA比值明显高于低盐养殖凡纳滨对虾(P＜O.05).     

β-1,3-葡聚糖对低盐度凡纳滨对虾血液代谢物和免疫的影响

为研究长期投喂β-1,3-葡聚糖对低盐度(5)养殖凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)血液代谢物和肌肉免疫相关酶活性的影响,以初始体质量为(0.65±0.01) g的凡纳滨对虾为研究对象,分别投喂添加0、250、500和1 000 mg·kg~(-1)β-1,3-葡聚糖的4种等氮等脂试验饲料,试验期84 d。结果显示,凡纳滨对虾血清乳酸盐和肌肉溶菌酶活性最高值出现在摄食后的第14天,总蛋白、甘油三酯、胆固醇、葡萄糖含量最高值出现在第42天,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、抗超氧阴离子水平的最高值出现在第56天。与对照组相比,饲料中添加250 mg·kg~(-1)β-1,3-葡聚糖显著提高了凡纳滨对虾血清甘油三酯、胆固醇、葡萄糖、乳酸盐含量和超氧化物歧化酶活性(P0.05);500 mg·kg~(-1)β-1,3-葡聚糖显著提高了其血清总蛋白、抗超氧阴离子水平(P0.05),250或500 mg·kg~(-1)β-1,3-葡聚糖可显著增强过氧化氢酶、溶菌酶活性(P0.05)。饲料中添加250或500 mg·kg~(-1)β-1,3-葡聚糖14、42或56 d,可显著提高低盐度养殖凡纳滨对虾营养物质代谢和非特异性免疫功能。     

不同盐度对凡纳滨对虾血淋巴及肌肉游离氨基酸组成的影响

以平均体重为10.50±1.75g的凡纳滨对虾为研究对象,分别在盐度为0、15和30的水体中用同一种饲料喂养20d,探讨不同盐度对凡纳滨对虾肌肉及血淋巴游离氨基酸组成的影响。结果表明,盐度在0、15和30变化时,凡纳滨对虾血淋巴中总游离氨基酸总量随盐度升高而显著增加（P〈0.05）;甘氨酸、谷氨酸、精氨酸和丙氨酸是凡纳滨对虾血淋巴中主要的游离氨基酸成分,其含量随盐度的增加而急剧增加。盐度为0、15和30时,凡纳滨对虾肌肉中游离氨基酸总量随着盐度的增加有增加趋势,但无显著性差异（P〉0.05）。甘氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸及精氨酸的含量随盐度由0、15、30的增加而显著增加（P〈0.05）;其他氨基酸在盐度0、15和30增加时,虽无显著性增加（P〉0.05）,但大部分氨基酸有增加趋势。当盐度在0、15和30变化时,游离甘氨酸、谷氨酸、精氨酸和丙氨酸是凡纳滨对虾体内渗透压调节的主要氨基酸。     

盐度突变对凡纳滨对虾非特异性免疫因子的影响

研究了盐度对凡纳滨对虾非特异性免疫因子的影响。结果表明,盐度突变对凡纳滨对虾非特异性免疫因子的影响是显著的。研究结果表明,盐度突变组(30～27、30～24、30～21、30～18和30～15)血细胞内O2-产量呈先升后降的趋势;酚氧化酶(PO)活力升高,盐度突变组显著高于对照组(P<0.05);盐度突变组SOD活性显著低于对照组(P<0.05);血清蛋白含量逐渐降低,对照组显著高于盐度突变组(P<0.05)。     

中草药对凡纳滨对虾生长、免疫功能的影响

以凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）为实验对象，基础饵料中分别添加不同水平的中草药（0％、1．0％、2．0％）,结果表明，添加不同剂量的中草药能显著提高凡纳滨对虾的增重率和增长率，显著地降低对虾的饵料系数，对凡纳滨对虾的成活率有极显著提高．能极显著提高对虾血清中溶菌酶和SOD活性，能显著提高ACP活性，极显著提高对虾对溶藻弧菌的免疫保护率。     

海水和淡水养殖凡纳滨对虾肌肉营养成分的比较

测定和分析了海水和淡水养殖的凡纳滨对虾肌肉常规营养成分、氨基酸含量和脂肪酸组成。试验结果表明,海水养殖凡纳滨对虾肌肉中粗蛋白和粗灰分含量显著高于淡水养殖凡纳滨对虾(P0.05),而水分的含量显著低于淡水养殖凡纳滨对虾(P0.05);海水养殖凡纳滨对虾氨基酸总量、必需氨基酸量、鲜味氨基酸总量均显著高于淡水养殖凡纳滨对虾(P0.05);海水和淡水养殖凡纳滨对虾肌肉中均含有丰富的不饱和脂肪酸,总量分别达68.48%和69.80%,但海水虾肌肉中饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸总量显著高于淡水虾(P0.05),而多不饱和脂肪酸总量显著低于淡水虾(P0.01);海水虾肌肉中n-3多不饱和脂肪酸总量亦显著低于淡水虾(P0.05),表明在海水环境中凡纳滨对虾合成n-3多不饱和脂肪酸的能力较差。综合分析表明,海水养殖凡纳滨对虾肌肉的营养价值和风味稍优于淡水养殖凡纳滨对虾。     

壳寡糖对凡纳滨对虾生长和免疫力的影响

为研究壳寡糖（ch itooligosaccharides,COS）对凡纳滨对虾（Litopemaeus vannam ei）生长和非特异性免疫水平的影响,设置了含COS分别为0（对照）、250 mg.kg-1、500 mg.kg-1、750 mg.kg-1和1 000 mg.kg-1的5组试验饲料,进行了4周的饲养试验。结果显示,COS添加量为250 mg.kg-1和500 mg.kg-1时凡纳滨对虾血细胞总数、生长率和成活率显著提高（P〈0.05）,含COS 250 mg.kg-1时对虾血清中的过氧化物酶（peroxidase,POD）活力显著提高（P〈0.05）,添加量为500 mg.kg-1时酸性磷酸酶（ac id phosphatase,ACP）和溶菌酶（lysozym e,LSZ）活力显著提高（P〈0.05）,添加量为250 mg.kg-1和500 mg.kg-1时总超氧化物歧化酶（total superoxide d ismutase,T-SOD）活力提高不显著（P〉0.05）。由此表明饲料中添加250～500 mg.kg-1COS可使凡纳滨对虾细胞免疫和体液免疫因子总体活力达到较高水平,可显著提高凡纳滨对虾的生长率和成活率。     

高盐对凡纳滨对虾仔虾生长、渗透调节及免疫相关酶活性的影响

为探讨高盐条件下凡纳滨对虾仔虾的耐盐性和免疫响应,进行了为期30 d的生长实验。实验设置4个盐度梯度(40、50、60、65),以盐度30为对照,称量实验起始和结束时仔虾的体质量,计算平均日增重,实验结束时检测体内总ATPase、Na~+-K~+-ATPase、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和溶菌酶(LZM)、丙二醛(MDA)含量。结果显示,高盐能显著抑制凡纳滨对虾仔虾的日增重,盐度40、50、60、65平均日增重分别为对照组的84.53%、60.99%、46.19%、27.71%;存活率随盐度升高而显著降低。随着盐度的升高,仔虾体内Na~+-K~+-ATPase活性缓慢升高,盐度60后趋于稳定。总ATPase活性表现出先小幅下降后稳定的趋势,最终维持在1.4 U/mg prot左右。T-SOD和CAT活性随盐度升高均呈现出先升高后降低的趋势,盐度50时达到峰值;ACP和AKP活性随盐度升高呈上升趋势,不同盐度间差异显著。此外,盐度显著影响凡纳滨对虾仔虾的MDA含量,对LZM含量无显著影响。研究表明,盐度越高,仔虾生长越缓慢,用于渗透调节的能量增加。在一定的盐度范围内,高盐能激发仔虾机体部分非特异性免疫酶活性以适应高盐胁迫。     

美人鱼发光杆菌对凡纳滨对虾非特异性 免疫功能及抗病力的影响

在基础饲料中分别添加0.1%和1%美人鱼发光杆菌灭活菌、0.1%美人鱼发光杆菌活菌配制成3种免疫实验饲料,以基础饲料为空白对照组饲料,每组设3个平行样。对个体质量为(4.83±0.36)g的凡纳滨对虾进行为期20 d的饲养实验,分别在0、5、10、15和20d进行取样,以血清中的酚氧化酶(PO)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)和溶菌酶(UL)活性为免疫指标,探讨了美人鱼发光杆菌作为免疫制剂对凡纳滨对虾非特异性免疫效应的影响;在投喂免疫饲料后的第22天,按0.004 2 kg/kg体重的剂量,直接投喂对虾白斑综合征病毒(WSSV)病料,并记录累积死亡率。结果表明,美人鱼发光杆菌免疫实验组对凡纳滨对虾血清中PO、ACP、AKP、UL和SOD活性影响明显高于对照组,并且在饲料中添加美人鱼发光杆菌后,明显提高了对虾抵御WSSV感染的能力。其中0.1%美人鱼发光杆菌活菌实验组的抗病毒感染能力最强,WSSV感染14d内累计死亡率为63.3%±5.8%;而对照组为96.7%±3.3%。研究表明,美人鱼发光杆菌添加在对虾饲料中能提高凡纳滨对虾非特异性免疫水平,增强抵抗疾病的能力,将其作为对虾免疫增强剂具有良好的应用前景。     

增加饲料中Vc质量分数对银鲳血清溶菌酶活性及组织抗氧化能力的影响

研究了增加饲料中维生素C（VC）质量分数对银鲳（Pampus argenteus）血清溶菌酶活性及组织抗氧化能力的影响.以鱼粉、虾粉为蛋白源,鱼油为脂肪源配制VC质量分数分别为104.21 mg·kg^-1、455.33 mg·kg^-1和800.54 mg·kg^-1的3组饲料,依次编号为C1（对照组）、C2、C3.每组饲料设3个重复,投喂平均体质量为（6.18±0.15）g的银鲳幼鱼9周.结果显示,随着饲料中VC质量分数的增加,血清溶菌酶活性逐渐升高,C3组较C1、C2组溶菌酶活性显著性升高（P＜0.05）.增加VC质量分数可显著提高组织中的超氧化物歧化酶（SOD）活性及总抗氧化能力（T-AOC）（P ＜0.05）,但VC对不同组织中SOD活性的影响程度并不相同.随着饲料中VC质量分数的增加,肝脏与肌肉中VC水平显著性升高（P＜0.05）.同时,高水平VC也显著降低了组织中丙二醛（MDA）的质量摩尔浓度.分析表明,增加饲料中VC质量分数（大于455.33 mg·kg^-1）可提高银鲳血清溶菌酶活性与组织抗氧化能力,降低组织中的脂质过氧化反应.     

壳聚糖硫酸酯提高凡纳滨对虾抗白斑综合征病毒感染力的研究

论述如下一项研究,采用壳聚糖硫酸酯添加到饲料中投喂凡纳滨对虾,4周后检测对虾血清酚氧化酶、超氧化物歧化酶和溶菌酶活性;同时进行白斑综合征病毒(WSSV)的肌肉注射感染实验,以检测壳聚糖硫酸酯对病毒的抗感染能力。实验结果显示,饲料中壳聚糖硫酸酯添加量为0.15‰和0.50‰,能显著提高凡纳滨对虾血清酚氧化酶活性;添加量为0.15‰时,能显著提高对虾血清超氧化物歧化酶活性,但添加量继续增大时反而下降;在低添加量时,对虾血清溶菌酶活性与对照组相近,添加量为0.15‰和0.50‰时,对虾血清溶菌酶活性随添加量增大而升高。凡纳滨对虾摄食添加壳聚糖硫酸酯饲料4周后,经注射WSSV攻毒感染,壳聚糖硫酸酯添加量为0.04‰、0.15‰和0.50‰试验组,对虾比成活率分别为39.3%、42.9%和53.6%,而未摄食壳聚糖硫酸酯的对照组成活率仅为17.9%。结果表明,摄食壳聚糖硫酸酯可以明显提高对虾抵御WSSV感染的能力。     

密度胁迫对凡纳滨对虾稚虾免疫指标及生长的影响

将体长为（3.59±0.26）cm的凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）按1 800尾.m-3、1 500尾.m-3和1 200尾.m-3的密度分别饲养在注水0.3 m3的圆形玻璃纤维桶（容量为0.5 m3）中30 d,检测了基本水质因子、对虾肝胰腺和肌肉组织中的酚氧化酶（PO）活力、超氧化物歧化酶（SOD）活力、抗菌活力（Ua）、碱性磷酸酶（AKP）活力、体质量增长和成活率,研究了不同放养密度对凡纳滨对虾稚虾免疫指标及生长的影响。统计分析发现,试验过程中水体理化因子均在适宜范围,各处理间水质因子的差异不显著;对虾的PO活力、Ua和AKP活力均随着密度的增加而降低,SOD活力则反之;对虾的体质量增长、体质量特定增长率和成活率随着密度的增加而降低,成活率差异显著（P〈0.05）。结果表明,凡纳滨对虾（体长〈4.8 cm或体质量〈1.2 g）在密度为1 200～1 800尾.m-3时,密度胁迫可明显影响其免疫指标和生长。     

盐度胁迫对近江牡蛎几种免疫因子的影响

试验分析了盐度从18骤变至3、25、40的第24 小时和第48 小时江牡蛎（Crassostrea hongkongensis）血淋巴超氧化物歧化酶（SOD）、碱性磷酸酶（AKP）、过氧化氢酶（CAT）和溶菌酶（LSZ）的活力变化,旨在研究盐度骤变对相关免疫因子的影响。结果显示,对照组（盐度18）4项免疫因子变化不显著（P＞0.05）。盐度25组AKP、LSZ活力在第24 小时极显著高于对照组（P〈0.01）。盐度3组SOD活力在第24 小时显著高于对照组（P〈0.01）,其他酶活力与对照组相比差异不显著。盐度40组SOD活力在第24 小时显著低于对照组（P〈0.01）,而LSZ活力在第48 小时急剧下降,极显著低于对照组（P〈0.01）,其他酶活力与对照组相比差异不显著。由此可见,盐度骤变对近江牡蛎的免疫活力有明显的刺激作用,且可能在一定范围内能够增强机体免疫力。近江牡蛎对低盐有很强的适应能力,但在高盐胁迫下其免疫活力下降。     

盐度对云纹石斑鱼（♀）×七带石斑鱼（♂）杂交子一代胚胎发育和仔鱼 活力的影响

观察了在9个盐度梯度（5、10、15、20、25、30、35、40、45）下云纹石斑鱼（♀）×七带石斑鱼（♂）杂交子一代受精卵和初孵仔鱼在水中的分布状态;对不同盐度条件下其胚胎发育周期、孵化率和畸形率进行比较;并对其初孵仔鱼进行了耐饥饿试验,测定其生存活力指数（Survival activity index,SAI）.结果表明,其受精卵孵化的适宜盐度范围是25～40,最适盐度范围为30～35,盐度低于30时,盐度越低,孵化率越低,畸形率越高;盐度高于35时,盐度越高,孵化率越低,畸形率越高;仔鱼的最适生存盐度范围为30～35,此盐度下的SAI值分别为33.3±0.8和24.1±0.2,盐度低于30时,盐度越低,仔鱼的存活率及SAI值越低;盐度高于35时,盐度越高,仔鱼的存活率及SAI值越低.     

孔雀石绿在凡纳滨对虾体内的残留与消除规律

研究了不同养殖环境下孔雀石绿在凡纳滨对虾（Litopenaeu svannamei）体内的残留和消除规律。试验对虾刚0．20mg·L^-1。的孔雀石绿溶液药浴2h后转移至室内或室外水泥池中用盐度为28的海水养殖,采用高效液相色谱一串联质谱法（LC／MS／MS）测定对虾头部和肌肉中的有色孔雀石绿（MG）及其代谢产物无色孔雀石绿（LMG）的残留量。结果表明,药浴2h时对虾体内孔雀石绿的残留量达到峰值,转入清水养殖168h,2种环境养殖对虾体内的孔雀石绿残留量均降低至检测限以下,孔雀石绿在对虾体内的消除速率是室外环境养殖的快于室内环境养殖,对虾头部快于肌肉组织,且MG的消除快于LMG。