不同酶解条件对Ti鱼蛋白水解物苦味及氨基酸组成的影响

研究了不同酶解的Ti鱼可溶性产物苦味及呈味氨基酸组成的差异，以及其水解时间、水解率对苦味的影响。结果表明，随着酶解时间延长和水解率的提高，几种水解液的苦味值都有不同程度增强。胃蛋白酶和胰蛋白酶的复合水解液表现出随水解时间的延长，水解率提高明显，苦味强度上升平缓。当水解率从42％提高到78％时，苦味值只提高了2，水解液总的苦味分值为3．5；枯草杆菌蛋白酶水解2h后苦味分值急剧提高，水解4h后苦味分值达到6，水解液味道很苦，水解率从32％提高到62％时，苦味分值提高到了7，水解液总的苦味值为8．5。两种方法水解获得的可溶性产物氨基酸及必需氨基酸组成含量接近，但胃蛋白酶、胰蛋白酶复合水解的可溶性产物具有更高的氨基酸分值，主要鲜味氨基酸含量略高于枯草杆菌蛋白酶水解产物，苦味氨基酸则相反。     

鲢酶解物对羟自由基的清除作用

通过测定酶解物对Fenton体系产生的羟自由基的清除效果，从胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶和复合蛋白酶5种酶中，筛选出木瓜蛋白酶和胰蛋白酶作为酶解鲢制备具有较高清除羟自由基活性酶解物的理想水解酶；用正交试验L9(3^4)对两种酶的水解条件进行了优化，并对最佳酶解条件下得到的酶解物进行Sephadex G-25凝胶柱分离，洗脱液分别在波长280nm处比色，测定酶解物中主要抗氧化活性肽的分子量分布。结果表明，木瓜蛋白酶在温度50℃、酶解时间15min、pH=6．5、酶质量分数1．50％、底物：水=1：2的水解条件下，酶解物对羟自由基清除效果较好，清除率为88．2％；胰蛋白酶在温度55℃、酶解时间60min、pH=8．0、酶质量分数0．25％、底物：水=1：2的水解条件下，酶解物对羟自由基清除效果较好，清除率为84．2％。木瓜蛋白酶酶解物在最大洗脱峰时有最大羟自由基清除率峰，清除率为95．1％，在最大峰处酶解物中活性肽的分子量为2．2kDa；胰蛋白酶酶解物在最大洗脱峰时也有最大羟自由基清除率峰，其清除率为89．6％，该峰处活性肽的分子量为14．2kDa。     

酶解罗非鱼鱼皮胶制备降血压肽的研究

为探讨罗非鱼鱼皮胶制备降血压肽的酶解工艺,研究选用Neutrase中性蛋白酶、Alcalase碱性内切蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和复合蛋白酶分别对罗非鱼鱼皮胶进行酶解,对其酶解液的水解度进行比较。结果表明复合蛋白酶的酶解效果最好。对复合蛋白酶的酶解工艺进行单因素优化,确定其最佳酶解工艺为:温度50℃、pH值7.0、料液比1∶5、酶量为底物量的1.5%。在此条件下水解6h时,水解度为60%,酶解产物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制率最高,达到78.96%。     

紫菜降血压肽酶法制备工艺的优化

摘要：降血压肽又称为血管紧张素转化酶抑制肽，是具有降血压活性的生物活性肽，对高血压患者有显著疗效。为探讨从紫菜中制备降血压肽的酶法工艺，本实验选用AS．1398中性蛋白酶、胰蛋白酶、复合酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶等6种蛋白酶分别对紫菜进行酶解，通过对其酶解液的ACE抑制活性和水解度的比较，发现采用AS．1398中性蛋白酶酶解的产物ACE抑制活性最高。对AS．1398中性蛋白酶的酶解工艺进一步优化，确定其最佳酶解工艺为：温度50℃、pH值7．5、加酶量E／S10000U·g^-1。在此条件下，酶解4h和10h的酶解产物抑制活性最高均达70％以上，并发现紫菜酶解液的ACE抑制率与水解度的增长不成显著的线性关系。     

牡蛎酶解工艺条件的研究

比较选择了牡蛎酶解的有效蛋白酶，研究了牡蛎酶解的工艺中各主要因素对提取率的影响。结果表明，A．SI，398枯草芽跑杆菌中性蛋白酶和胰蛋白酶对牡蛎有较好的酶解效果。酶解温度、加酶量、底物浓度对酶解提取率影响较大。确定了牡蛎酶解的最佳工艺条件为：酶解温度50℃；加酶量0．5％；底物浓度6％；酶解时间2h。     

不同酶解条件对鳀鱼蛋白水解物苦味及氨基酸组成的影响

研究了不同酶解的鱼可溶性产物苦味及呈味氨基酸组成的差异 ,以及其水解时间、水解率对苦味的影响。结果表明 ,随着酶解时间延长和水解率的提高 ,几种水解液的苦味值都有不同程度增强。胃蛋白酶和胰蛋白酶的复合水解液表现出随水解时间的延长 ,水解率提高明显 ,苦味强度上升平缓。当水解率从4 2 %提高到 78%时 ,苦味值只提高了 2 ,水解液总的苦味分值为 3.5 ;枯草杆菌蛋白酶水解 2h后苦味分值急剧提高 ,水解 4h后苦味分值达到 6,水解液味道很苦 ,水解率从 32 %提高到 62 %时 ,苦味分值提高到了 7,水解液总的苦味值为 8.5。两种方法水解获得的可溶性产物氨基酸及必需氨基酸组成含量接近 ,但胃蛋白酶、胰蛋白酶复合水解的可溶性产物具有更高的氨基酸分值 ,主要鲜味氨基酸含量略高于枯草杆菌蛋白酶水解产物 ,苦味氨基酸则相反。     

影响淡水鱼头酶解的因素研究

选用中性蛋白酶和碱性蛋白酶对草鱼鱼头进行水解,单因素分析和正交实验L9(34)相结合,对影响其酶解条件的因素进行了探讨.结果表明:碱性蛋白酶水解效果较中性蛋白酶好,其最佳酶解条件为酶用量0.018%、温度53℃、pH值7.6、水解5h,在此条件下酶解液中游离氨基酸可达1.25mg/ml.并分析了两种酶在最佳酶解条件下,可溶性蛋白质含量的变化.     

草鱼酶解技术研究

应用对比试验和正交试验方法对草鱼进行酶解技术研究。试验结果表明，胃蛋白酶酶解草鱼酶用量为（E／S）0．6％，温度55℃，pH2．0，酶解5h氨基态氮含量较高，为0．0190g／L；枯草杆菌蛋白酶酶解草鱼酶用量为（E／S）0．01％，温度45℃，pH6．5，酶解4h氨基态氮含量较高，为0．0417g/L；胰蛋白酶酶解草鱼酶用量为（E／S）0．64％，温度50℃，pH8．0，酶解5h氨基态氮含量较高，为0．0472g／L。通过对3种蛋白酶在最优条件下酶解草鱼肉的比较可知，枯草杆菌蛋白酶和胰蛋白酶酶解效果较好。为草鱼深加工提供了一定的科学依据。     

酶法制备脱脂鱼蛋白的初步研究

采用5种酶对脱脂鲢肉进行水解制备水解鲢蛋白。脱脂鲢肉是分别采用异丙醇、正己烷、乙酸乙酯3种溶剂萃取法进行脱脂后得到。分别用木瓜蛋白酶、枯草杆菌中性蛋白酶、枯草杆菌碱性蛋白酶、胰蛋白酶和复合蛋白酶对3种脱脂鲢肉及未脱脂鲢肉进行水解。试验结果表明，乙酸乙酯对鲢肉脱脂率最高，脱脂率为96．33％。复合蛋白酶为最适酶，乙酸乙酯脱脂鱼肉为最佳底物；在最佳水僻条件下：pH6．5，温度55℃，酶量3500U／g蛋白质，底物浓度（乙酸乙酯脱脂鲢肉：水）1：5，其水解度达到最大，为44．00％。     

复合酶提取牡蛎抗氧化肽的工艺研究

以牡蛎为原料,首先从木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶中筛选出胰蛋白酶为内切酶,以水解度为指标,得到最佳的酶解工艺条件:时间4h,温度50℃,pH8.0,料水比1∶2,加酶量3％(7 500 U/g),水解度为49.50％;同时以水解度为指标,得到外切酶风味蛋白酶的最佳酶解工艺:时间5h,温度50℃,pH8.0,料水比1∶2,加酶量3％ (450 U/g),实际水解度50.95％.最后,以清除羟自由基能力和水解度为指标,探讨内切酶(胰蛋白酶)和外切酶(风味蛋白酶)不同复合酶解方式的抗氧化能力.最终确定,复合酶解制备牡蛎抗氧化肽效果最好,其酶解条件为胰蛋白酶为3％(7 500 U/g)、风味蛋白酶加酶量为3％ (450 U/g),pH8.0,时间5h,料水比1∶2,温度50℃时,水解度高达53.94％,体外清除·OH的EC50为0.56 mg/mL.     

扇贝边酶解技术研究

研究了混合酶水解扇贝边蛋白质的技术条件，并和单酶水解情况进行了比较。结果表明，混合酶水解可提高水解液中氨基酸态氮（AAN）含量，同时改善了水解液风味。本文引进二次正交旋转组合试验设计方案，系统地研究了影响混合酶水解效果的相关因素，得出了扇贝边水解液中氨基酸态氮生成量的变化规律一回归模型。应用该模型可对水解液中AAN生成量进行预测，也可进一步优化选择扇贝边的酶解条件。     

酶法从鳕鱼皮中提取胶原多肽的研究

胶原多肽具有多种生理活性。鳕鱼皮中含有丰富的胶原蛋白。本实验以鳕鱼皮为研究对象，采用酶法从鱼皮中提取胶原多肽，以氨基含量和水解度为指标，通过单因素和正交实验确定酶解的最佳条件。实验结果表明，采用碱性蛋白酶，加酶量4．5％、酶解温度50℃、pH8．5、酶解时间5小时，蛋白质水解度可达到13．87％。     

超声辅助酶解鲣加工副产物制备蛋白胨

为了提高水产加工副产物的利用率和附加值,以鲣加工副产物为原料,采用胰蛋白酶结合超声处理制备蛋白胨,并分析了鲣加工副产物超声辅助酶解过程中蛋白酶活性、水解度、氮回收率、TCA-可溶性氮回收率、酶解产物分子量分布等指标的变化,探究了超声辅助酶解的作用时间、温度以及超声功率等因素对鲣加工副产物酶解产物的影响,通过单因素实验优化确定了蛋白胨制备的最佳酶解工艺条件。结果显示,超声处理造成胰蛋白酶酶活发生显著变化,在功率为120 W的超声场下,胰蛋白酶酶活在30 min内呈上升趋势,但在超声场处理30 min后,胰蛋白酶的酶活呈明显下降趋势,至4 h后酶活变化趋势趋于平缓。超声功率和酶解温度都会影响胰蛋白酶对鲣加工副产物的酶解效率,在超声功率240 W和酶解温度50°C条件下,氮回收率比无超声处理组提高了18.66%,水解度提高了30.43%,TCA-可溶性氮回收率提高了33.20%,且超声处理有效提高了酶解液中小分子肽的含量。超声辅助酶解鲣加工副产物的最佳工艺条件为温度55°C,超声功率240 W,酶解时间4 h,此时氮回收率为81.40%,TCA-可溶性氮回收率为40.75%。     

蛋白酶对文蛤肉水解效果的研究

本文探讨了木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、精制中性蛋白酶、酸性蛋白酶、复合蛋白酶和风味蛋白酶等6种蛋白酶对文蛤肉的水解效果,以文蛤肉水解液的水解度、氮收率及水解得率为指标,并对酶解液进行感官鉴评和风味评分,结果表明精制中性蛋白酶、胰蛋白酶和风味蛋白酶为适用于文蛤肉水解的蛋白酶。     

酶法提取鱿鱼皮胶原蛋白工艺条件的研究

研究了酶法提取鱿鱼皮胶原蛋白的工艺条件。根据5种蛋白酶水解液中羟脯氨酸（HYP）的含量,确定了胰蛋白酶和木瓜蛋白酶这2种提取率高的酶为水解用酶,采用L16（4^5）正交试验确定了这2种酶水解鱿鱼皮以制备胶原蛋白的最佳酶解条件。结果表明,胰蛋白酶和木瓜蛋白酶水解鱿鱼皮以制备胶原蛋白的最佳温度、加酶量、底物浓度、pH、时间分别为55℃、1200U·g^-1、1：20、pH8.0、4h和50℃、3200U·g^-1、1：20、pH6.0、6h。2种蛋白酶提取的胶原蛋白含量分别为11.08%和11.36%,提取率分别为95.16%和97.56%。     

鱼鳞酶解工艺的研究

应用正交实验优选鱼鳞蛋白酶解的最佳条件，结果表明，鱼鳞酶解宜采用条件温和的枯草杆菌中性蛋白酶，用醋酸作软化的预处理，可使鱼鳞蛋白得到较高程度的水解，酶解时最佳温度为５０℃，酶量宜采用１．５％，酶解的最佳时间为６ｈ底物浓度宜选择２０％。     

酶解扇贝裙边制备复合氨基酸螯合钙的研究

扇贝裙边富含蛋白质、脂质等营养成分。为了高值化利用扇贝裙边，本研究选用中性蛋白酶、动物蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和酸性蛋白酶5种酶，以酶解液中游离氨基酸态氮为考察指标，对扇贝裙边进行酶解工艺条件探讨。首先，将5种酶制成复合蛋白酶进行正交实验，确定最佳酶解时间、温度、pH及加酶量，经检验，氨基酸转化率为77%；然后，通过实验确定CaCl2为最适钙源，以贝壳为原料，通过水飞法和酸法转化可制得贝壳源CaCl2。将扇贝裙边酶解液中复合氨基酸与来源于贝壳的钙螯合制备复合氨基酸螯合钙，以正交实验筛选出最佳螯合条件。经检验，该螯合反应螯合率达92%。     

扇贝裙边氨基酸营养粉的制备工艺研究

为了对扇贝裙边进行综合利用，本文选择由中性蛋白酶、胰蛋白酶和复合蛋白酶3种酶组合成3对混合酶对扇贝裙边进行酶水解实验，以水解液中游离氨基酸态氮为考察指标，采用正交实验设计研究了加酶量、酶解时间、酶解温度及酶的种类对酶解效果的影响，从而优化了扇贝裙边的酶法水解工艺条件。以最佳水解工艺条件获得的酶解液经喷雾干燥制成的氨基酸营养粉，经检测，其粗蛋白含量为82.89%，粗脂肪含量为1.55%，总糖含量为6.82%。该氨基酸营养粉中氨基酸种类齐全，每100g粗蛋白中氨基酸总量达79.06%，其中游离氨基酸总量达51.53%。     

利用大西洋鲑内源酶酶解加工废弃物制取抗氧化肽的研究

大西洋鲑(Salmo salar)加工废弃物中含有丰富的蛋白质,具有较高的开发利用价值,直接遗弃会造成资源浪费和环境污染,探索利用自身内源蛋白酶酶解制取抗氧化肽具有重要的意义。对大西洋鲑内脏所含内源蛋白酶的性质进行了初步研究,测得主要含有3种内源蛋白酶,最适p H为2.0、6.0、9.0,p H 9.0的碱性蛋白酶具有最高的酶比活力。以水解度和总抗氧化活性为指标,通过单因素试验确定大西洋鲑内源蛋白酶处理鲑鱼的加工废弃物干粉料的最适条件,再用正交实验L16(45)对其酶解条件进行优化,确定影响酶解液总抗氧化活性的主要影响因素(P﹤0.05)为温度、p H和酶解时间,比较后得到最佳酶解条件为:温度35℃、加酶量0.7 m L/50 m L、料液比0.7 g/50 m L、p H 9.0、酶解时间7 h,该条件下酶解液的总抗氧化活性为258.29 U,大西洋鲑加工废弃物干粉料水解度为15.00%。研究表明,采用大西洋鲑内源蛋白酶酶解鲑鱼加工下脚料并制取抗氧化肽,具有一定的可行性。     

翡翠贻贝双酶水解法的建立

研究了双酶法水解技术水解翡翠贻贝并制作海鲜调味料。研究结果表明：（１）水产品快速自溶技术不能应用于翡翠贻贝贝肉蛋白的水解；（２）翡翠贻贝贝肉蛋白可以用外源酶对其水解；（３）枯草杆菌中性蛋白酶和胃蛋白酶都可以对贝肉蛋白水解；（４）利用正交试验分别确定了两种酶的最适水解条件并用双酶法水解新技术对贝肉蛋白水解；蛋白质水解率达到８２％；（５）试验中确定的酶的水解条件为枯草杆菌中性蛋白酶：ｐＨ７．５，温度４