EBV-LMP对人高分化鼻咽癌细胞株(CNE1)体外增殖能力的影响

目的：探讨ＥＢＶ－ＬＭＰ对人高分化鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１增殖能力的影响。方法：以人高分化鼻咽癌细胞株（ＣＮＥ１）为对象,采用电穿孔基因转染技术,将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒转染ＣＮＥ１细胞。以载体质粒转染及ＣＮＥ１细胞为对照。用细胞体外增殖实验、细胞软琼脂克隆形成率测定、流式细胞仪测定各细胞周期和细胞ＰＣＮＡ的检测,观察细胞增殖能力的变化。结果：体外细胞增殖实验,Ａ比值实验组（２．８６±０．１２）显著高于空白组（１．６２±０．０５）及阴性对照组（１．３８±０．０３）（Ｐ＜０．０１）;实验组细胞软琼脂克隆形成率（２５．２％）显著高于空白组（１１．２％）及阴性对照组（１３．４％）（Ｐ＜０．０１）;ＦＣＭ法测定细胞周期,实验组Ｓ期细胞（３４．９％）高于空白组（２６．２％）及阴性对照组（３０．８％）;ＰＣＮＡ免疫组化染色,实验组细胞ＰＣＮＡ阳性率（８４．６％）明显高于空白组（６１．１％）及阴性对照组（６７．２％）（Ｐ＜０．０１）。结论：ＥＢＶ－ＬＭＰ对ＣＮＥ１细胞体外增殖能力有明显的促进作用,提示ＬＭＰ在ＮＰＣ细胞演进过程中可能起重要作用     

电穿孔技术在EBV—LMP表达质粒转染人鼻咽癌细胞中的应用

目的：观察人鼻咽癌细胞用电穿孔技术进行体外基因转染所需的转染电击条件ＥＢＶ－ＬＭＰ基因的转染表达。方法：以人高分化鼻咽癌细胞株（ＥＮＥ１）为对象，用电穿孔基因转染技术，观察不同电压及电容条件电击癌细胞对基存活率的影响；将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒转染ＣＮＥ１细胞，以载体质粒转染及未经转染的ＣＮＥ１细胞为对照。结果：ＣＮＥ１癌细胞存活率与电容及电压值的大小成反比。ＣＮＥ１细胞转染较合适条件是电压值６     

EBV感染对人鼻咽癌细胞株形态参数和DNA含量的影响

目的：观察ＥＢＶ体外感染对不同分化不同分化状态鼻咽癌细胞株形态参数和ＤＮＡ含量的影响。方法：应用ＰＣＲ法检测ＥＢＶ基因、免疫组化和图像分析仪分别检测了ＥＢＶ和ＥＢＶ＋ＴＰＡ对ＣＮＥ－１和ＣＮＥ－２Ｚ细胞Ｃｋｐａｎ表达及形态参数和ＤＮＡ含量的影响。结果：（１）ＥＢＶ在体外可感染ＣＮＥ－１细胞；（２）ＥＢＶ感染ＣＮＥ－１细胞使其Ｃｋｐａｎ表达降低，胞面积籴小和核浆比升高及ＤＮＡ含量明显减少（Ｐ〈０．０     

分泌抗BVDV McAb杂交瘤细胞株的建立

用牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）感染ＭＤＢＫ细胞,将感染细胞培养物冻融后离心取上汪经ＰＥＧ沉淀浓缩抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠,取血清抗体效价高遥免疫鼠的脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞在ＰＥＧ作用下融合,产生杂交瘤细胞,用间接ＥＬＩＳＡ法检测杂交瘤细胞生长孔上清,筛选阳性杂交瘤细胞株。以有限稀法克隆２－３次,得到８ 泌抗ＢＶＤＶ的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株。８株ＭｃＡｂ对ＢＶＤＶ,猪瘟均呈阳性反应。杂交     

芦荟茎段的组织培养

采用芦荟茎段培养,经实验得出最佳培养基配方。诱导分化培养基：Ｍｓ＋６－ＢＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ;增殖培养基：Ｍｓ＋６－ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ;生根培养基：Ｍｓ＋ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ。     

EGF对人鼻咽癌细胞体外生长和膜蛋白磷酸化与肌醇磷脂磷酸化的影响

本文观察了表皮生长因子（ＥＧＦ）与人低分化鼻咽癌上皮细胞系 　ＣＮＥ－２ Ｚ在软琼脂培养基上集落形成能力及膜蛋白、膜肌醇磷脂磷酸化的关系。 结果表明：（１）ＥＧＦ经受体介导，低浓度时（０．０１～０．１７ｎｍｏｌ／Ｌ）促进细胞生 长，高浓度时（≥１．６７ｎｍｏｌ／Ｌ）抑制细胞生长；（２） ＥＧＦ促进膜蛋白磷酸化反 应；（３） ＥＧＦ促进膜肌醇磷脂转换。提示了ＥＧＦ对ＣＮＥ－ ２ Ｚ细胞体外生长的影 响与其促进膜蛋白磷酸化和膜肌醇磷脂转换有关。本文根据实验结果探讨了ＥＧＦ 与人鼻咽癌的关系。     

鼻咽癌中EB病毒的原位杂交检测

目的：在分子水平探讨ＥＢＶ在鼻咽癌发生发展中的作用。方法：采用ＥＢＶｅｎｃｏｄｅｄｓｍａｌＲＮＡ（ＥＢＥＲ）原位杂交对２８例鼻咽癌和７例慢性鼻咽炎组织进行了检测。结果：２８例鼻咽癌组织中有２３例阳性,７例慢性鼻咽炎均是阴性。鼻咽高分化鳞癌、低分化鳞癌和未分化癌均存在ＥＢ病毒感染,不同分化程度的肿瘤组织间ＥＢＥＲ阳性率差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论：在鼻咽癌的发生中ＥＢＶ感染起非常重要作用。鼻咽活检组织中有ＥＢＶＲＮＡ片段的检出,对确定鼻咽癌的诊断具有一定的价值     

鼻咽癌中EB病毒的原位杂交检测

目的：在分子水平探讨ＥＢＶ在鼻咽癌发生发展中的作用。方法：采用ＥＢＶ ｅｎｃｏｄｅｄ ｓｍａｌｌ ＲＮＡ（ＥＢＥＲ）原位杂交对２８例鼻咽癌和７例慢性鼻咽炎组织进行了检测。结果：２８例鼻咽癌组织中有２３例阳性，７例慢性鼻咽炎均是阴性。鼻咽高分化鳞癌、低分化鳞癌和未分化癌均存在ＥＢ病毒感染，不同分化程度的肿瘤组织间ＥＢＥＲ阳性率差异无显著性（Ｐ〉０．０５）。结论：在鼻咽癌的发生中ＥＢＶ感染起非常重要作     

月季的离体快速繁殖技术

以月季良种红衣主教带腋芽茎段为外植体进行离体快速繁殖研究,结果表明：在ＭＳ＋２．００－３．００ｍｇ．Ｌ＾－１６－ＢＡ＋０．１０ｍｇ．Ｌ＾－１ＮＡＡ培养基上进行起始培养,其腋芽分化率达６３％以上,在ＭＳ＋２．００－３．００ｍｇ．Ｌ＾－１６－ＢＡ＋０．１０ｍｇ．Ｌ＾－１ＮＡＡ＋１．００ｍｇ．Ｌ＾－１ＧＡ３培养基上进行继代增殖,４５ｄ其增殖倍数达３．４以上,且长成的芽苗比较粗壮;增殖后的芽苗在１／２ＭＳ     

蚕豆萎蔫病毒单克隆抗体研制

用蚕豆萎蔫病毒提纯病毒粒子免疫ＢＡＬ Ｂ／ｃ小鼠,取其脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合,用纯化的ＢＢＷＶ病毒对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经三次有稀释法克隆,成功获得了２株ＢＢＷＶ特异性单克隆抗体的细胞株,分别命名为４Ｄ１１,３Ｇ１２．２株单抗腹水间接ＥＬＩＳＡ效价高达１：６４００００,抗体类型均为ＩｇＧ１,经Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ分析表明,２株单抗均是针对ＢＢＷＶ ４４．７ｋＤ的外壳蛋白     

青花菜子叶和下胚轴原生质体的遗传转化系统

用根癌农杆菌共培养法将外源基因导入青花菜上海１号的无菌苗子叶及下胚轴原生质体。菌株为ＥＨＡ１０５,携带质粒ｐＭＯＧ４１０,含ＧＵＳ和ＮＰＴⅡ基因,实验得出其子叶芽分化率最高的激素组合为６－ＢＡ ５ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ ０．１ｍｇ／Ｌ。原生质体以８￣１０℃暗培养５￣６ｄ,然后于２５℃光照８ｈ生长的无菌苗下胚轴切片游离出的密度最高,Ｋ８Ｐ培养基激素组合（ｍｇ／Ｌ）以２,４－Ｄ１．０＋ＢＡ０．５＋ＮＡＡ０．     

甜瓜抗CMV转基因植株的分子生物学研究

本研究建立了转目的基因植物基因整台及表达的分子生物学鉴定系统，并用报告基因检测、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ特异扩增、Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ等方法，研究了用叶盘法经Ｔｉ质粒转化的甜瓜再生植株ＣＭＶ－ＣＰ基因的整合与表达。结果表明：再生植株基因组中整合了ＣＭＶ－ＣＰ基因，长度为１ｋｂ，并能有效表达。表达产物分子量为２４Ｋｄ，确为ＣＭＶ的外壳蛋白，其表达量占细胞总蛋白约５％。     

草莓叶片愈伤组织形成及再生芽分化的组织学研究

本文将草莓品系Ｍ１４的叶片分别在培养基ＣＫ（ＭＳ＋Ｂ５）、培养基Ａ（组成为ＭＳ＋Ｂ５＋ＴＤＺ１．０ｍｇ．Ｌ－１＋ＩＡＡ１．０ｍｇ．Ｌ－１）、培养基Ｂ（组成为ＭＳ＋Ｂ５＋ＴＤＺ２．５ｍｇ．Ｌ－１＋ＩＡＡ０．１ｍｇ．Ｌ－１）中培养,对细胞的脱分化、愈伤组织的形成、叶状体的产生及再生芽分化进行组织学观察。结果表明,激素可诱导叶表皮细胞、叶肉细胞及维管束周围的其他薄壁细胞脱分化;愈伤组织就是由后两类细胞脱分化形成分裂中心,进一步发育而成的;叶状体可由表皮细胞脱分化后直接分裂形成,不经愈伤组织阶段,但更普遍的是在愈伤组织表层产生;再生芽发生于叶状体上。     

玫瑰海棠的组织培养和快繁

对玫瑰海棠在不同的生长素、细胞分裂素组合条件下的生长,分化进行了试验,选择出适合玫瑰海棠高效增殖、生根的快繁体系,其中以ＭＳ＋６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ继代增殖最佳,１／２ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ生根最好。     

苹果属－亚种──中国苹果

苹果属－亚种──中国苹果李育农（西南农业大学）关键词：苹果属；西洋苹果；亚种ＭＡＬＵＳＤＯＭＥＳＴＩＣＡＳＵＢＳＰ．ＣＨＩＮＥＮＳＩＳＹ．Ｎ．ＬＩ．－ＡＳＵＢＳＰＥＣＩＥＳＯＦＭＡＬＵＳＭＩＬＬ．￥ＬｉＹｕｎｏｎｇ（ＳｏｕｔｈｗｅｓｔＡｇｒｉｃｕｌｔ...     

健康鸵鸟(1～6月龄)38项血清生化参数的测定

建立健康鸵鸟（Ｓｔｒｕｔｈｉｏｃａｍｅｌｕｓ）的血清全套生化参数,采用日本岛津ＣＬ ７２００型全自动生化分析仪,对３０只１～６月龄健康鸵鸟３８项血清生化参数进行测定．结果如下：（１）血清蛋白参数／ｇ·Ｌ－１：ＴＰ３１．８２,ＡＬＢ１５．４１,ＧＬＯ１６．１８（ＡＬＢ／ＧＬＯ０．９５）,Ａｐｏ Ａ１０．１２,Ａｐｏ Ｂ０．１４（Ａｐｏ Ａ１／Ａｐｏ Ｂ０．８０）;（２）血清酶参数／ｕ·Ｌ－１：ＡＬＴ１４．３,ＡＳＴ４５６．８（ＡＬＴ／ＡＳＴ０．３８）,ＧＧＴ３．４,ＬＤＨ１６０３．１,ＣＫ３９３６．８,ＣＫ ＭＢ１４３０．８,ＡＭＹ３４１５．１,ＡＫＰ５７１．７,ＨＢＤＨ３７３．３;（３）血清糖、蛋白质、脂类及其代谢产物参数／ｍｍｏｌ·Ｌ－１：ＧＬＵ９．４１,ＴＲＩ１．９７,ＢＵＮ０．９４,ＬＤＬ２．１９,ＨＤＬ１．５４,ＣＨＯ３．５８（ＨＤＬ／ＣＨＯ０．４１）;ＣＲＥ１２．６５μｍｏｌ·Ｌ－１（ＢＵＮ／ＣＲＥ０．０６３）,ＵＡ５０５．２４μｍｏｌ·Ｌ－１,ＴＢＡ３７．１μｍｏｌ·Ｌ－１,ＴＢＩＬ５．３２μｍｏｌ·Ｌ－１,ＤＢＩＬ３．２１μｍｏｌ·Ｌ－１,ＩＢＩＬ２．０８μｍｏｌ·Ｌ－１,ＴＴＴ４．１２ｕ;（?     

甘薯青枯病菌单克隆抗体的分类及其血清型研究

用甘薯青枯病菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｏｌａｎａｃｅａｒｃｕｍ）免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与鼠骨髓瘤细胞杂交融合，建立了４株分泌抗甘薯青枯病菌的特异性、有鉴别力的杂交瘤细胞株：ＰＳＢ２４、ＰＳＢ２８、ＰＳＢ４６、ＰＳＢ５６。 交瘤细胞株染色体数范围为９８－１０４，ＥＬＩＳＡ试验培养液抗体滴度为保这ＭｃＡｂ的玫＃＃     

澳洲坚果组织培养研究

澳洲坚果优良品种ＨＡＥＳ８００的茎顶,于培养基ＭＳ＋ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＣＭ１００ｍｌ／Ｌ＋Ｓｕｃｒｏｓｅ３％＋ａｇａｒ０．５％中培养至２５天时,于第二轮叶的叶尖产生白色愈伤组织和畸胚。将它们接种到培养基ＭＳ＋ＢＡ１－７ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１－７ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．１－０．５ｍｇ／Ｌ＋Ａ．Ｃ．０．２％＋Ｓｕｃｒｏｓｅ３％＋ａｇａｒ０．５％上,愈伤组织能不断增殖并分化出畸胚;畸胚自身也以出芽方式增殖,且由白逐渐转绿,并分化出丛芽。将单芽切下,于培养基１／２ＭＳ＋ＩＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋Ａ．Ｃ．０．２％＋Ｓｕｃｒｏｓｅ２％＋ａｇａｒ０．５％中诱根６０天后,将无根苗放在沙床上炼苗６０天,可以获得生根良好的种苗。     

蚕豆萎蔫病毒单克隆抗体研制

用蚕豆萎蔫病毒（ＢＢＷＶ）提纯病毒粒子免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,取其脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合,用纯化的ＢＢＷＶ病毒对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经三次有限稀释法克隆,成功获得２株ＢＢ－ＷＶ特异性单克隆抗体的细胞株,分别命名为４Ｄ１１,３Ｇ１２．２株单抗腹水间接ＥＬＩＳＡ效价高达１∶６４００００,抗体类型均为ＩｇＧ１,经Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｉｎｇ分析表明,２株单抗均是针对ＢＢＷＶ４４．７ｋＤ的外壳蛋白大亚基的特异性抗体．单抗抗原结合位点分析表明４Ｄ１１和３Ｇ１２两单抗作用于同一抗原决定簇     

EB病毒感染体外培养人胚鼻咽上皮细胞对c—myc和p53表达的 …

目的：观察体外培养人胚鼻咽上皮（ＨＥＮＥ）被ＥＢ病毒（ＥＢＶ）感染后，ｃ－ｍｙｃ和ｐ５３表达的变化，以探讨ＥＢＶ和这些癌基因在鼻咽癌发生发展中可能起的作用，方法：体外培养的人胚鼻咽上皮用ＥＢＶ或ＥＢＶ加ＴＰＡ感染（简称Ｅ和ＥＴ组）分别用抗体补体免疫法（ＡＣＩＦ）和碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法（ＡＰＡＡＰ）检测ＥＢＶ核抗原（ＥＢＮＡ）及癌基因ｃ－ｍｙｃ和ｐ５３的表达。结果：体外培养１０例人胚鼻咽上皮细胞