福州地区小菜蛾全长cDNA文库构建与分析

采用ZAP Express cDNA Gigapack Ⅲ Gold Cloning Kit试剂盒,构建了小菜蛾(Plutella xylostella)的全长cDNA文库.利用TRIzol试剂盒提取小菜蛾成虫总mRNA,通过Oligo试剂将mRNA反转录成cDNA,再以第一链cDNA产物为模板合成第二链cDNA,该cDNA产物经分级分离和体外包装,即获得小菜蛾cDNA原始文库,其滴度为1.5×106pfu.mL-1.扩增后的cDNA文库的滴度为1.4×1010pfu.mL-1.取适量扩增文库稀释并铺平板,挑取20-25个独立噬菌斑,用M13±通用引物PCR扩增后,测得文库的重组率大于95%,插入cDNA片段的长度平均为1.25 kb.该文库的构建,可为小菜蛾抗药性基因的相关研究提供一个平台.     

产菊粉酶菌株的筛选及其产酶条件的优化

从山东滨海盐碱地种植菊芋的根际土壤中分离得到能产菊粉酶的菌株46株,经过进一步的摇瓶复筛,获得了产菊粉酶能力较高的1株菌株,经初步鉴定为青霉Penicillium sp.B01.在对其发酵条件优化后,确立了Penicillium sp.B01最适宜的产酶条件为(g·L-1):菊芋提取液(EJA)120、酵母膏(YE)25、NH4H2PO4 2.5、NaCl 5.0、FeSO4·7H2O 0.1、ZnSO4·7H2O 0.1,初始pH 7,接种2.5×106 mL-1的孢子悬浮液3.75%, 250 mL的三角瓶中装40 mL的发酵培养基,在30 ℃、170 r·min-1下发酵3 d后菊粉酶活性最高可达25.78 U·mL-1.此酶主要为外切酶.     

腰带长体茧蜂cDNA文库的构建

从寄生在亚洲玉米螟 (Ostriniafurnacalis)幼虫体内 6d的腰带长体茧蜂 (Macrocentruscingulum)胚胎中提取总RNA和mRNA ,用分离到的微量mRNA合成cDNA第 1链。通过长距离PCR扩增得到足够量的双链cDNA。将SfiⅠ酶切后并纯化的cDNA片段连接到经SfiⅠ酶切的噬菌体λTripIEX2上 ,并对噬菌体进行包装 ,建成cDNA的全长库。经大肠杆菌XL1 Blue平板检测 ,未扩增文库的滴度为 0 75× 10 6pfu·mL-1,克隆重组百分率为 96 77% ,扩增后文库的滴度为 0 5×10 10 pfu·mL-1。     

不同土地利用方式对农田表土有机碳库的影响——以太湖地区吴江市为例

采用耕地质量监测资料,分析了2003年江苏省吴江市6种土地利用方式下的土壤有机碳含量的变化,并与该市1982年第二次土壤普查土壤肥力调查的结果进行了比较.结果表明,2003年吴江市土壤耕层平均有机碳密度比1982年提高(0.14±0.05)t·hm-2·cm-1;在稻田、桑园、菜地、林地、果园、旱地6种主要土地利用方式中,稻田土壤有机碳密度显著高于其他利用方式,并比1982年稻田耕层有机碳密度增加(0.21±0.06)t·hm-2·cm-1.近20多年来,吴江市水稻土的碳固定增加了1.8×103 t,但由于该市的耕地面积减少而造成的总土壤表层有机碳库的减少量为14.32×105 t.因此,稻田作为一种特殊的土地利用方式在陆地碳固定上有着特殊意义.     

紫外线辐射的葡萄幼果cDNA文库的构建

以紫外线辐射的葡萄幼果为材料提取总RNA,用SMARTTMcDNA文库构建试剂盒构建cDNA文库,初始文库含有1.5×106个独立的单克隆,扩增后滴度达到1.2×108pfu.mL-1.随机挑取噬菌斑进行PCR检测,发现重组率在92.9%以上.     

烤烟品种K326茎叶消减文库的构建及质量分析

利用抑制性消减杂交(SSH)技术,构建烤烟品种K326的茎叶抑制性消减cDNA文库.结果表明,文库的滴度为1.76×106cfu.mL-1,重组率为75%,随机扩增480个克隆,显示插入片段长度在200-1000 bp之间,符合建库的质量标准.     

PVP对白花水蜜桃品质及贮藏效果的影响

以水(对照)、1 mg·mL-1聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、1 mg·mL-1PVP+10 mg·mL-1壳聚糖(CTS)和3 mgmL-1PVP分别处理白花水蜜桃7 min,置于(1.0±0.5)℃下贮藏.冷藏期间测定桃果实的生理特性、品质和酶活性.结果表明:所有处理中以1 mg·mL-1PVP处理更有效降低果实呼吸强度,减少水分散失,降低果实维生素C、还原糖和含酸量的损失,保持硬度,抑制多酚氧化酶(PPO)、过氧化物氧化酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL),降低腐烂指数,且使果实贮藏期达到35 d.     

双低油菜华双3号幼苗全长cDNA文库的构建

利用RNA5′端模板转换技术,以甘蓝型双低油菜华双3号幼苗为材料,构建了其全长cDNA文库。结果表明:文库的原始滴度为1.25×106pfu·mL-1,重组率为87.3%;扩增后的文库滴度为1.13×109pfu·mL-1。随机挑取12个噬菌斑,利用PCR扩增插入片段,电泳结果显示其长度在0.6～1.5kb之间。     

缺刻缘绿藻cDNA文库的构建

缺刻缘绿藻（Myrmecia incise）富含花生四烯酸（arachidonic acid,AA）,是迄今为止所知道的花生四烯酸含量最高的藻类。采用Trizol法提取总RNA,然后按照Clontech公司的SMART cDNA文库构建的方法,构建了缺刻缘绿藻的cDNA文库,测得的原始文库滴度为6×10^6pfu／mL,随机挑选文库的阳性单克隆进行PCR鉴定,扩增出的片段主要集中在0．5-1．5kb,平均插入片段长度约为1kb,文库的重组率达95．83％,说明本实验所构建的cDNA文库质量合格。     

缺刻缘绿藻cDNA文库的构建

缺刻缘绿藻（Myrmecia incise）富含花生四烯酸（arachidonic acid,AA）,是迄今为止所知道的花生四烯酸含量最高的藻类。采用Trizol法提取总RNA,然后按照Clontech公司的SMART cDNA文库构建的方法,构建了缺刻缘绿藻的cDNA文库,测得的原始文库滴度为6×10^6pfu／mL,随机挑选文库的阳性单克隆进行PCR鉴定,扩增出的片段主要集中在0．5-1．5kb,平均插入片段长度约为1kb,文库的重组率达95．83％,说明本实验所构建的cDNA文库质量合格。     

《农技服务》2000年主要栏目总目录

致富明省歌钱塘‘.龟土”蒋张林··············……1一(4)养蜂求致富生活奔小康······……2一(4)陈逢楚与蛇共舞··················……3一(4)小鱼“钓”大钱····················……4一(4)竹子加工天地宽··················……5一(4)人生60方少年··················,…6一(4)农民王丙山的致富经验·········……7一(4)手持读书金钥匙阔步迈进幸 福门·······,······················……8一(4)“没脚蟹”闯出大市场············……,一(4)养蛇致富女能手朱文被······……10一(4)王利坚的特养之路············……11一(4)“泥饭碗”里淘金人一陆风英……11一‘6)农民果树专家宋世友······……12一(4) 仓J三二母卜月丸榕江酉瓜大展宏图···············……1一(7)养酬有待开发的新型产业······……2一(6)曹县特养火辣辣··················……3一(7)赵氏‘八项合一’微型高效庭 院农业创奇迹·····...     

奶牛乳腺上皮细胞三维培养的形态观察

本研究利用原代培养后纯化的奶牛乳腺上皮细胞,以Matrigel为基质胶原,进行奶牛乳腺上皮细胞的三维培养,细胞接种浓度分别为1×104细胞/ml、1×105细胞/ml和1×106细胞/ml。经过16d培养后,用DAPI对细胞染色,利用荧光显微镜观察细胞生长状况。结果表明,当细胞接种浓度为1×104细胞/ml~1×105细胞/ml时,细胞形成了团块状结构,出现了类似腔状的腺泡形态。     

慢病毒载体介导外源基因在不同细胞及鸡体不同组织中的表达

以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）为标记基因构建复制缺陷型慢病毒载体生产病毒,以病毒感染不同来源、不同分化特征的细胞,并进行鸡囊胚注射,观测外源基因的表达情况。试验结果表明,在所有类型细胞中均可检测到EGFP较高水平的表达,其中在HeLa、293FT细胞中的转染效率约1×10^8TU·mL^-1（TU：转染单位）,在C127细胞中为5×10^7TU·mL^-1,在鸡胚胎成纤维细胞（CEF）中约为1×10^6TU·mL^-1,病毒在鸡原生殖细胞（cPGC）中转染效率最低为1×10^2TU·mL^-1。病毒的感染可引起细胞表型的不利改变。用该病毒载体注射鸡囊胚获得了可直接活体观察绿色荧光信号的转基因鸡,转基因效率约53％;外源基因在鸡体不同组织如表皮、消化道等器官中检测到不同水平的表达,并表现出不同的分布特征。     

家蚕春用品种黄·山×平·湖的组配及推广

[目的]研究家蚕春用品种黄·山×平·湖的组配及推广,为家蚕品种资源引进、改良和利用研究提供参考。[方法]通过对引进品种资源的系统研究,在基本掌握其生物学、经济性状和利用价值综合评估的基础上,按不完全双列杂交组配,最后测定配合力。[结果]经配合力测定,组配成春用杂交组合黄·山×平·湖全茧量2.269 g,茧层量0.509 g,茧层率23.58%,茧丝长1 323 m,解舒率86.71%,净度93.8分,纤度3.011 D,符合国家审定标准,通过安徽省认定。该品种强健好养、抗逆性强、茧形大、丝质优、稳产丰产,受蚕农、丝厂欢迎,迅速在安徽省主要蚕区推广应用。[结论]引进了品种资源,丰富了家蚕基因库;通过育种手段实现了种质创新;组配成适合当地生态条件和饲养水平的实用品种,加快了育种速度,降低了育种成本。     

粳稻品种间种子贮藏蛋白多态性分析

用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对115个不同生态型粳稻品种种子贮藏蛋白多态性进行了分析.根据相对分子质量为65×103带的有无,70×103、60×103、57×103、37×103～39×103、22×103～23×103、13×103 、10×103带染色的深浅, 35×103带迁移的速率,及57×103位置带的数量这4种蛋白谱带变异,共鉴别出19种蛋白图谱类型.品种间蛋白谱带相似系数范围在0.75～1.00之间,采用类平均法进行聚类分析,在相似系数0.894处明显地可以将供试品种分为3组:第1组为8个高直链淀粉含量的品种;第2组为15个高贮藏蛋白含量的品种;其他92个品种为第3组,占供试品种的80%.除了中熟中粳生态型与高直链淀粉含量组有关联外,依据熟期划分的生态型与依据贮藏蛋白聚类分析划分的组之间没有明确的关联.     

大黄鱼溶藻弧菌外膜蛋白ISCOMs的免疫效果初步研究

以溶藻弧菌外膜蛋白为模式抗原,制备其ISCOMs,免疫大黄鱼,进行安全和免疫力试验测定,结果显示溶藻弧菌外膜蛋白ISCOMs安全、纯净;免疫组菌体凝集效价比对照组高,但免疫组个体间有差异,而免疫组的血清ELISA抗体水平明显高于对照组;攻毒试验组（O．3×10^7个·尾^-1）存活率可达100％,对照组（0．3×10^7个·尾^-1）存活率为20％;试验表明溶藻弧菌外膜蛋白ISCOMs安全,免疫大黄鱼后可产生免疫保护力。     

镰刀菌诱导后苦瓜幼叶cDNA文库的构建和鉴定

以白粉病菌侵染的苦瓜幼叶为材料,以λTrip IEx 2为载体,利用SMART技术构建了1个由镰刀菌病原诱导后的苦瓜幼叶cDNA文库.结果显示,初始文库的滴度为4.0×106pfu.mL-1,扩增后滴度为8.1×109pfu.mL-1,插入片段大小分布在500~3 000 bp,平均值大于1 000 bp,重组效率为98%.     

应用性诱剂监测高山蔬菜小菜蛾的发生动态

应用性诱剂对湖北高山蔬菜小菜蛾的发生动态进行了监测。结果表明．2002年小菜蛾在第一茬甘蓝上有两个发生高峰．诱蛾量分别为11．7±2．4头·盆^-1和9．2±1．0头·盆^-1,在第二茬甘蓝上有3个发生高峰,诱蛾量分别为70．9±8．1头·盆^-1、16．1±2．7头·盆^-1和11．1±1．9头·盆^-1：2003年小菜蛾在第一茬甘蓝上有3个发生小高峰,诱蛾量分别为4．7±1．7头·盆^-1,6．2±1．9头·盆^-1和6．3±2．0头·盆^-1,在第二茬甘蓝上有3个发生高峰,诱蛾量分别为62．5±27．4头·盆^-1．88．7±25．1头·盆^-1和12．6±3．4头·盆^-1。性诱剂与频振式杀虫灯相比,性诱剂监测小菜蛾更为灵敏,诱捕效果更好。     

湖·滨×明·光品种性状与饲养注意事项

湖·滨×明·光是湖南省蚕桑科学研究所培育而成的夏秋用四元杂交桑蚕新品种。可在长江流域和南方蚕区推广和应用。     

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△北京读者（手机号：135××××2563）问：如何防治山羊痘？ 答：山羊痘是滤过性病毒引起的一种急性、热性传染病。其防制措施：1.封锁隔离。发现病羊立即隔离、防疫、治疗,并派专人管理。对病死的羊应运到远离村庄、水源处深埋作无害化处理。