牡蛎抗氧化活性肽的酶解工艺研究

以木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为工具酶,利用正交试验法确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶酶解制备牡蛎抗氧化活性肽的最佳酶解工艺。结果表明：当时间为150min、酶用量为6％、温度为45℃、pH为7．0时,木瓜蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强;当时间为110min、酶用量为3％、温度为65℃、pH为6．0时,中性蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析分析的结果表明,木瓜蛋白酶酶解液中最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1191和826左右,中性蛋白酶酶解液最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1074和735左右,其抗氧化活性峰值与蛋白肽在280nm下的吸收峰值分别相吻合。     

响应面优化双孢菇预煮液酶解工艺研究

以游离α-氨基氮为指标,对比了中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶对双孢菇(Agaricus bisporus)预煮液的酶解效果,并采用Box-Behnken响应面法优化了中性蛋白酶的酶解工艺。结果表明,中性蛋白酶酶解效果优于风味蛋白酶和木瓜蛋白酶,其最优工艺为添加量0.41%,p H 6.5,55℃酶解2.95 h,在此条件下,游离α-氨基氮为419.6 mg/L。     

牡蛎抗氧化活性肽的酶解工艺研究

以木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为工具酶,利用正交试验法确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶酶解制备牡蛎抗氧化活性肽的最佳酶解工艺。结果表明:当时间为150 min、酶用量为6%、温度为45℃、pH为7.0时,木瓜蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强;当时间为110 min、酶用量为3%、温度为65℃、pH为6.0时,中性蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析分析的结果表明,木瓜蛋白酶酶解液中最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1 191和826左右,中性蛋白酶酶解液最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1 074和735左右,其抗氧化活性峰值与蛋白肽在280 nm下的吸收峰值分别相吻合。     

酶解法提取鲐鱼鱼油工艺研究

分别采用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、碱性蛋白酶提取鲐鱼鱼头、鱼肉和内脏中的鱼油,对酶进行筛选和优化。结果表明：中性蛋白酶为最佳用酶;优化条件为鱼头：酶添加量2．0％,固液比1：1,pH值7,47．5℃酶解6h,鱼油提取率为53．86％;鱼肉：酶添加量2．0％,固液比1：1,pH值7,50℃酶解6h,鱼油提取率为63．29％;内脏：酶添加量2．0％,固液比1：0．75,pH值7,52．5℃酶解6h,鱼油提取率为58．47％。     

玉米蛋白粉水解多肽对光磷水蜈蚣的生根抑制活性

以木瓜蛋白酶、中性蛋白酶为水解酶,以玉米蛋白粉为底物,制备出不同酶解时间条件下的玉米蛋白水解多肽。用培养皿生物分析法检测不同玉米蛋白水解多肽在不同浓度(0.5 mg/mL、1 mg/mL、2 mg/mL、5 mg/mL)条件下对光磷水蜈蚣(Kyllinga brevitoliavar.leiolepis)种子生根抑制活性。结果表明:①两种蛋白酶不同水解时间制备的玉米蛋白粉水解多肽对光鳞水蜈蚣种子萌发生根均有抑制作用,且随着浓度增高生根抑制活性增强;②木瓜蛋白酶在水解3 h和6 h制得玉米多肽的生根抑制活性明显优于水解9 h和12 h制得的玉米多肽,而中性蛋白酶在不同水解时间水解玉米蛋白粉所得的水解多肽对光磷水蜈蚣的抑制活性无显著性差异;③木瓜蛋白酶制备的玉米多肽比中性蛋白酶制备的玉米多肽生根抑制活性强,并达到极显著性差异水平(P<0.01)。     

猪血红蛋白抗氧化肽的酶法制备及其体外抗氧化活力观察

为建立猪血红蛋白抗氧化活性肽的酶法制备工艺,采用6种食品级商业蛋白酶Alcalase 2.4L、胰蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和AS1398中性蛋白酶在各自最适反应条件下分别酶解猪血红蛋白8 h,结果显示：采用AS1398中性蛋白酶获得的产物水解度最高,其酶解过程中第2小时获得的抗氧化活性肽（NDAPⅡ）还原力最高,较猪血红蛋白还原力高31.8%;AS1398中性蛋白酶的酶解条件为底物5%（质量分数）,底物中含酶400U/g,温度45℃,pH 7.0。NDAPⅡ的还原力随浓度的增加基本呈线性增长趋势,虽然在低浓度下其还原力较阳性对照物BHT及VC弱,但在40 mg/mL质量浓度条件下,其还原力已略高于天然抗氧化剂VC,极具作为天然抗氧化剂的潜力。     

鱿鱼肝脏活性肽的制备及生物活性研究

[目的]为鱿鱼肝脏的高值化利用提供基础研究数据。[方法]以鱿鱼肝脏蛋白为原料,通过蛋白酶水解来制备生物活性肽,研究了多种蛋白酶水解鱿鱼肝脏制得水解液的抗凝血活性、抑制血管紧张素Ⅰ转换酶（ACE）活性及抗氧化活性。[结果]当鱿鱼肝脏水解液浓度为5 mg/ml时,中性蛋白酶的水解液对ACE抑制率为68.0%;APTT值为59.8 s,TT值为34.2 s,比空白对照组分别延长26.7和20.6 s,表明鱿鱼肝脏的中性蛋白酶水解液具有抗凝血活性。中性蛋白酶解液对Fe3＋的还原力为0.588,羟自由基清除能力为64.5%,说明鱿鱼肝脏中性蛋白酶水解液具有较好的抗氧化活性;而其余的木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶的鱿鱼肝脏水解液的抗凝血活性和ACE抑制活性均低于中性蛋白酶水解液的酶解液活性。[结论]鱿鱼肝脏蛋白质具有较好的综合利用价值。     

固定化木瓜蛋白酶水解制备乳酪蛋白肽工艺的研究

以戊二醛为交联剂,制备壳聚糖微球固定木瓜蛋白酶,研究固定化木瓜蛋白酶水解制备乳酪蛋白肽的工艺。结果表明,壳聚糖固定化酶的制备条件,给酶量为0．4％,壳聚糖浓度为4％,加入的戊二醛（终浓度达到1．0％）交联,制备微球交联时问为3h,制备得到的固定化酶活力最大,达167．1U／rag。水解试验结果表明,pH6．0,底物浓度4．0mg／ml,流速0．6ml／min,温度为55％的工艺条件下,固定化木瓜蛋白酶水解乳酪蛋白的水解度达43．65％。     

pH-stat法在测定酶促反应米氏常数中的应用

在pH值为7．2，温度为40C的条件下，As1．398中性蛋白酶水解大豆分离蛋白，采用pH—stat法结合Exeel软件方便准确地求出酶促反应的初始速度，从而根据Lineweaver—Burk双倒数方程计算出该酶的最大反应速度（Vmax）和米氏常数（Km）．实验条件下，As1．398蛋白酶的Km，值为1．46mg／mL．     

长白山林蛙肉酶解条件的研究

[目的]优化林蛙肉酶解工艺。[方法]以长白山雄性林蛙肉为原料,选用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶对其进行水解。通过单因素试验和正交试验筛选最佳酶解条件。[结果]酶解效果最好的是中性蛋白酶,其最适酶解条件为pH值6、加酶量7%、底物浓度55%,水解时间110min、温度50℃。在此工艺条件下,水解度达55.02%。[结论]该酶解工艺用酶少、分解快,适合长白山林蛙肉的酶解 更多还原     

鹿血血红蛋白最佳酶解用酶的筛选

以考察各自适宜条件下,中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和胰蛋白酶作用于鹿血血红蛋白的酶解效果为目的,以此筛选出酶解最佳用酶。以自由基清除率为指标,比较四种常用酶解用酶的酶解效果。对两种自由基的综合清除率,以碱性蛋白酶酶切产物的平均清除能力最强,为78.5%,依此往后为中性蛋白酶71.9%、木瓜蛋白酶64.6%和胰蛋白酶62.3%。     

复合酶解法制备酵母抽提物的应用研究

[目的]为生产高辅料比啤酒确定最佳的酶制剂种类及酶解工艺。[方法]比较13种酶制剂在制备酵母抽提物中的酶解情况,选择并确定最佳的酶制剂种类及酶解工艺。[结果]在4种碱性蛋白酶中,碱性蛋白酶A的d一氨基氮得率最高。碱性蛋白酶A和风味蛋白酶的复合酶解试验表明,风味蛋白酶A的酶解情况优于风味蛋白酶B。β-葡聚糖酶和木瓜蛋白酶对α-氨基氮的得毫影响不大。酵母抽提酶的α-氨基氮得率高于干酵母酶A和B的共同酶解得率。当料水比为1：4时,滤液中α-氨基氮含量为900mg／L左右。100kg干燥酵母粉在酶解至α-氨基氮含量为4000mg／L时,可得浓度为10°P的醪液700L,即α-氨基氮的得率为1：7。[结论]应用蛋白酶复合酶解制备酵母抽提物具有收率高、时间短、设备简单、操作方便、成本低的优点,在高辅料比啤酒的生产中应用较为可行。     

藜麦抗氧化肽制备工艺研究

采用酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶对藜麦蛋白提取液进行酶解制得抗氧化肽,通过单因素试验筛选出最佳蛋白酶。以DPPH自由基清除率为指标,通过响应面试验对酶解条件进行优化,并采用HPLC法对酶解液进行氨基酸种类及含量的测定。结果表明,藜麦抗氧化肽的最佳制备工艺为木瓜蛋白酶、酶解pH值6.63、加酶量2.36%、酶解温度58.44℃、酶解时间1.0 h。藜麦抗氧化肽中共含有18种氨基酸,其中丝氨酸的含量最高,为65.46%。     

榛子粕抗氧化肽制备条件的优化及体外模拟消化的研究

为选出最佳的水解蛋白酶,选用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶3种蛋白酶水解榛子粕蛋白,研究单一蛋白酶和复合蛋白酶水解产物的水解度、DPPH自由基清除能力和氨基酸含量,对榛子粕抗氧化肽制备工艺进行优化,分析体外模拟消化前后榛子粕抗氧化肽DPPH自由基清除能力和氨基酸含量的变化。结果表明:木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解产物水解度分别为2.89%,6.26%,9.50%。1N复合蛋白酶水解产物、1A复合蛋白酶水解产物、2NA复合蛋白酶水解产物和2AN复合蛋白酶水解产物水解度分别为6.31%,7.20%,6.25%,4.99%。木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解产物清除DPPH自由基的IC50分别为12.0,4.60和2.53mg·mL~(-1)。1N复合蛋白酶水解产物、1A复合蛋白酶水解产物、2NA复合蛋白酶水解产物和2AN复合蛋白酶水解产物清除DPPH自由基的IC50分别为3.05,3.50,3.25和2.81mg·mL~(-1)。木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解产物氨基酸总量分别为22.08,34.13和41.36g·100g-1。1N复合蛋白酶水解产物、1A复合蛋白酶水解产物、2NA复合蛋白酶水解产物和2AN复合蛋白酶水解产物的氨基酸总量分别为18.18,18.47,26.70和24.49g·100g-1。因此,选用中性蛋白酶为水解榛子粕蛋白的最佳酶源;通过响应面分析,确定制备榛子粕抗氧化肽的最佳工艺条件为:温度43.7℃、时间1.7h、加酶量17000U·g-1,中性蛋白酶水解产物水解度为11.57%、DPPH清除率80.38%、氨基酸含量46.07g·100g-1;体外模拟胃肠消化后,榛子粕抗氧化肽的清除DPPH自由基的IC50升高3.27mg·mL~(-1)、氨基酸总量降低l0.05g·100g-1。     

鸽蛋全蛋粉制备工艺的研究

试验以新鲜鸽蛋为基本原料，旨在研究全蛋粉最佳酶解工艺和干燥工艺参数。采用三种酶制剂进行复合水解、三种不同干燥方式进行干燥，运用单因素、正交试验分析方法确定最适酶制剂、酶解时间、复合酶添加量、酶解pH值、复合酶酶解温度以及干燥方式、进料液浓度、进料速度、进风温度和出风温度等，并对该工艺条件生产的全蛋粉进行质量评定。结果显示：酶解工艺和干燥工艺最佳参数为：在室温（25 ℃）条件下，添加2 万 U 复合酶（木瓜蛋白酶:中性蛋白酶为 1:2），溶液 pH 值为 6，水浴锅温度 50 ℃，酶解 180 min 后进行喷雾干燥，进料液浓度为25%，进料速度（蠕动泵转速）为45 r·min^(-1)，进风与出风温度为120 ℃/70 ℃。根据确定的最佳工艺参数制备全蛋粉，全蛋粉的综合评定结果良好。     

中性蛋白酶酶解谷朊粉制备抗氧化多肽研究

以谷朊粉为原料,采用中性蛋白酶制备抗氧化多肽,并对其酶解工艺进行优化。结果表明,对中性蛋白酶酶解谷朊粉制备抗氧化多肽的影响顺序依次为酶解温度>加酶量>酶解时间;通过响应面分析优化酶解条件为底物浓度8%,加酶量2 800 U/g,温度52℃,时间280 min,此时酶解液羟自由基清除率达到65.3%,多肽含量为60.4 mg/mL。     

河蚬酶解液抗氧化作用的研究

以河蚬为原料,对六种蛋白酶的酶解液清除羟自由基的能力进行研究。结果表明:河蚬经酶解后可提高清除羟自由基能力;不同蛋白酶酶解液对羟自由基清除率不同,木瓜蛋白酶酶解液清除能力最强;通过正交优化试验条件:底物质量浓度为40 g/L,木瓜蛋白酶用量为22000 U/g蛋白质,酶解温度45℃,pH=7.5,酶解2 h的酶解液,对羟自由基(.OH)的清除率可达到57.89%。     

酶法水解海鳗肉的工艺条件

采用添加枯草杆菌中性蛋白酶与木瓜瓣双酶同时水解技术，对海鳗肉进行水解。正交试验的方差分析及多重比较结果表明，适宜的酶解工艺条件为pH7.0，温度45℃，加酶量为原料的2％（枯草杆菌中性蛋白酶：木瓜蛋白酶＝1：1），水解时间为2.5h。蛋白质水解率为75％，所得水解液的α－氨基氮含量为166mg/100mL，经浓缩后的氨基酸总量为1.23g/100mL，其中必需氨基酸占氨基酸总量的57．8％，谷氨酸（Glu),天门冬氨酸（Asp)，甘氨酸（Gly)，丙氨酸（Ala) 等呈味氨基酸含量较高，占总量的23％。     

酶法水解海鳗肉的工艺条件

采用添加枯草杆菌中性蛋白酶与木瓜瓣双酶同时水解技术，对海鳗肉进行水解。正交试验的方差分析及多重比较结果表明，适宜的酶解工艺条件为pH7.0，温度45℃，加酶量为原料的2％（枯草杆菌中性蛋白酶：木瓜蛋白酶＝1：1），水解时间为2.5h。蛋白质水解率为75％，所得水解液的α－氨基氮含量为166mg/100mL，经浓缩后的氨基酸总量为1.23g/100mL，其中必需氨基酸占氨基酸总量的57．8％，谷氨酸（Glu),天门冬氨酸（Asp)，甘氨酸（Gly)，丙氨酸（Ala) 等呈味氨基酸含量较高，占总量的23％。     

双酶分步水解低值鱼蛋白的研究

选用中性蛋白酶、木瓜蛋白酶两种酶对低值鱼蛋白进行分步水解,分析各因素对鱼蛋白水解的影响,以水解度为特征性指标。单因素试验结果表明,先添加中性蛋白酶的水解效果优于先添加木瓜蛋白酶。通过L9(34)正交试验确定水解的最佳条件为水解时间为6 h,中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶量比(g∶g)为3∶1,水解温度为55℃,料液比(m/V,g∶mL)为1∶10,水解效果是最好的,在此条件下水解度为35.85%。