蜂胶提取液对鸡蛋保鲜的效果

采用水、95%乙醇及其分别与超声波的综合作用从原蜂胶中提取蜂胶液,将得到的蜂胶提取液稀释成8、4、2、1mL/L,并分别对蜡样芽胞杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌进行抑菌圈直径和最小抑制浓度(MIC)的测定,选取提取效果最好方法中的两个浓度进行鸡蛋保鲜效果试验。结果表明,超声波作用于95%的乙醇蜂胶液的方法提取效果最好;不同提取方法得到的蜂胶提取液的抑菌作用存在差异,以超声波和乙醇提取的蜂胶液对受试菌作用最强;蜂胶提取液对大肠杆菌的抑制作用最强,其次是沙门氏菌和蜡样芽胞杆菌;在鲜蛋保鲜试验中发现,两种浓度、两种方法均有不同程度的保鲜效果。     

应用PCR方法检测蜡样芽胞杆菌的研究

采用PCR技术,通过扩增蜡样芽胞杆菌的gyrB基因来实现对蜡样芽胞杆菌的快速检测。结果表明,以gyrB为目的基因设计引物建立的PCR检测方法能特异性地扩增出蜡样芽胞杆菌,且与其他芽胞杆菌菌株均无交叉反应,其检测敏感性可达9 cfu/mL,能够应用于蜡样芽胞杆菌的鉴定。     

鱼腥草乙醇浸提液对体外细菌抑制的对比研究

鱼腥草乙醇浸提液对4种细菌抑制试验结果表明:鱼腥草乙醇浸提液对4种细菌都有非常强的抑制作用,其中对蜡样芽孢杆菌的抑制效果最强,痢疾杆菌和金黄色葡萄球菌次之,大肠杆菌最差.金黄色葡萄球菌在75%乙醇浸提液中的抑菌效果最好,而对蜡样芽孢杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌的抑制效果随着乙醇浓度降低逐渐降低,乙醇浓度降低到55%后,对4种细菌的抑制作用逐渐接近.     

医院使用的75%乙醇污染调查分析

目的:对医院使用的75%乙醇污染状况进行调查分析,为防止消毒剂的污染及医院内感染发生提供实验依据。方法:按照《消毒技术规范》标准进行细菌总数检测;用VITEK-32型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌。结果:75%乙醇消毒剂细菌超标率为8.1%(5/62);经鉴定为解淀粉芽孢杆菌、地衣芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、嗜热芽胞杆菌。结论:75%乙醇易受到革兰阳性芽胞杆菌的污染,医护人员应树立严格的消毒灭菌观念,在使用中容器应加盖,小瓶盛装并及时更换;配制时应对环境空气和容器进行严格消毒灭菌。同时应建立、健全医院消毒管理、监督制度。     

山鸡椒酒精浸提液对体外细菌的抑制对比研究

山鸡椒酒精浸提液对大肠杆菌、蜡样芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌等4种细菌的抑制试验结果表明:山鸡椒酒精浸提液对这4种细菌都有非常强的抑制作用,且抑制的效果随着酒精浓度的降低逐渐降低。其中,对金黄色葡萄球菌的抑制效果最好,蜡样芽胞杆菌次之,大肠杆菌第三,痢疾杆菌最差。对抑制时间的研究结果表明,山鸡椒酒精浸提取液对大肠杆菌起杀菌作用,对金黄色葡萄球菌抑制时间最长,蜡样芽胞杆菌次之,痢疾杆菌最短。     

乳源蜡样芽胞杆菌耐药性、毒力因子检测及分子特征研究

为了解乳品来源蜡样芽胞杆菌携带的毒力因子、分子特征及耐药性,对2016—2019年分离自乳品的122株蜡样芽胞杆菌,采用纸片扩散法（K-B纸片法）测定了分离株对氯霉素、庆大霉素等9种抗生素的耐药性,使用聚合酶链式反应法检测了菌株携带的毒力因子,同时采用脉冲场凝胶电泳（pulsed field gel electrophoresis,PFGE）检测分离株的分子特征。结果表明,122株蜡样芽胞杆菌均对氯霉素、庆大霉素、阿米卡星敏感;对红霉素、克林霉素和环丙沙星的中介率分别为5.74%、4.92%和0.82%, 9.84%的菌株对复方新诺明具有耐药性,8.20%的菌株对四环素具有耐药性,4.10%的菌株对利福平具有耐药性。122株蜡样芽孢杆菌都检出了蜡样芽孢杆菌的非溶血型肠毒素基因nheA、nheB及肠毒素FM基因entFM;nheC、bceT、cytK、hblA、hblC、hblD、ces和EM1基因的检出率分别为99.18%、37.70%、31.15%、29.51%、24.59%、8.20%、、6.56%和6.56%。122株蜡样芽胞杆菌被分成15簇,未见明显的优势带型。由此可见,2016—2019年收集的蜡样芽胞杆菌乳品分离株携带多种毒力基因,约10%的菌株对复方新诺明、四环素、利福平等具有耐药性,PFGE呈现多种带型,为蜡样芽孢杆菌引起的食源性疾病的预警、预防和治疗提供参考。     

牛奶中蜡样芽孢杆菌的分离和鉴定

蜡样芽孢杆菌是乳制品中容易污染的一种致病菌。为了鉴定市售牛奶中是否含有蜡样芽孢杆菌,该研究通过生化和分子生物学鉴定方法对牛奶中蜡样芽孢杆菌进行了分离和鉴定。结果表明,市售牛乳中分离、鉴定了一株蜡样芽胞杆菌,这表明蜡样芽胞杆菌对牛奶产品具有较大的食品安全风险。     

河南蜂胶对枯草芽孢杆菌的抑制作用研究

为探讨河南蜂胶对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的抑菌活性,采用琼脂平板扩散法,以枯草芽孢杆菌为试验菌种,将试验分为7个不同pH组(蜂胶浓度31％),以及在pH 5.5环境下设置10个不同浓度组,记录蜂胶对枯草芽孢杆菌的抑菌效果.结果表明,河南蜂胶对枯草芽孢杆菌有明显的抑菌活性,随pH增高,河南蜂胶对枯草芽孢杆菌的抑菌活性减弱;随着蜂胶浓度的降低,河南蜂胶对枯草芽孢杆菌的抑菌活性减弱,河南蜂胶可观测到抑菌环的最小浓度为0.12％.     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱快速鉴定蜡样芽胞杆菌研究与应用

建立基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术针对食源性蜡样芽胞杆菌快速鉴定方法。以蜡样芽胞杆菌模式菌株为研究对象,优化该菌样品处理方法,并选取17株蜡样芽胞杆菌标准菌株补充MALDI-TOF-MS数据库,探讨方法灵敏度、稳定性和准确性。结果表明,蜡样芽胞杆菌最佳样品处理方法是甲酸提取法,数据库补充可提高该菌鉴定可信度,MALDI-TOF-MS鉴定方法准确度高、稳定性好,灵敏度为104cfu并通过聚类分析分型。研究确定的MALDI-TOF-MS鉴定方法准确快速,可为食源性蜡样芽胞杆菌快速鉴定和分型提供技术支持。     

3个生物防腐剂抑制蜡样芽胞杆菌的效果研究

为研究生物防腐剂壳聚糖、ε-聚赖氨酸、乳酸链球菌素能否代替化学性食品防腐剂,本研究通过敏感性测定、杀菌动力学测定、正交优化实验,应用效果试验研究了其对指示菌蜡状芽孢杆菌的抑制效果。结果表明,壳聚糖、Nisin、ε-聚赖氨酸的最小抑菌浓度分别为10 mg·mL^-1、2.5 mg·mL^-1、0.039 mg·mL^-1。当壳聚糖、Nisin、ε-聚赖氨酸的浓度分别为5 mg·mL^-1、0.02 mg·mL^-1、0.01 mg·mL^-1时对蜡样芽胞杆菌的抑制作用最好,在这一最佳组合条件下对蜡样芽孢杆菌杀菌率达83.85%。     

半乳糖基甘油糖脂对蜡样芽胞杆菌的抑菌活性及其构效关系

[目的]本文旨在研究酶促反应合成的18种含有不同脂肪酸链数量及碳链长度(C_(8∶0)—C_(18∶3))的半乳糖基甘油糖脂对5株蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)的抑菌活性,并初步探讨其活性构效关系。[方法]通过测定半乳糖基甘油糖脂对蜡样芽胞杆菌的抑菌圈直径、最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)以及抑菌率来研究半乳糖基甘油糖脂的抑菌活性及其构效关系。[结果]本试验共合成9种半乳糖基甘油单酯和9种酰化半乳糖基甘油单酯。半乳糖基肉豆蔻酸甘油单酯(MMGG)的抑菌效果最好,对5株蜡样芽胞杆菌的抑菌圈直径均为16～20 mm, MIC值和MBC值均为0.039 mg·mL~(-1),且抑菌率均在99%以上;半乳糖基月桂酸甘油单酯等其余含有饱和中链脂肪酸(C_(8∶0)—C_(14∶0))的半乳糖基甘油糖脂以及含有不饱和脂肪酸的半乳糖基甘油糖脂的抑菌效果次之;在含有不饱和脂肪酸的半乳糖基甘油糖脂中,半乳糖基亚麻酸甘油单酯的抑菌效果最好,而含有饱和长链脂肪酸(C_(16∶0)、C_(18∶0))的半乳糖基甘油糖脂抑菌效果较差。半乳糖基甘油糖脂的抑菌活性与其所含脂肪酸链的不饱和度呈极显著负相关,与其所含脂肪酸链的长度存在截断效应,而不是简单的线性关系。[结论]脂肪酸链的链长、数量以及不饱和度都会影响半乳糖基甘油糖脂的抑菌活性。     

蜂胶对炭疽杆菌弱毒株的抑菌效果

为了解产自河南省的蜂胶对炭疽杆菌(Bacillus anthracis)弱毒株的抑菌作用,采用琼脂平板扩散法将实验分为pH 5.5～8.5不同组(蜂胶浓度31%),以及在pH 5.5下将31%蜂胶溶液倍比稀释至0.06%(1∶512)及空白组(0%),在每张滤纸片上滴加蜂胶溶液7μL,记录蜂胶的抑菌效果。结果表明,河南省蜂胶在pH 5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5平板上的抑菌环直径依次为(19.16±0.29)、(17.67±0.29)、(14.67±0.58)、(13.67±0.29)、(14.00±0.00)、(13.33±1.15)、(12.00±0.00)mm,蜂胶浓度分别为15.50%、7.75%、3.88%、1.94%、0.97%、0.48%、0.24%、0.12%、0.06%和0%(空白组)的抑菌环直径依次为(19.50±1.80)、(19.67±1.04)、(17.75±0.35)、(15.67±0.58)、(14.00±2.29)、(13.17±1.04)、(11.83±1.53)、(10.83±1.26)、(9.00±0.00)和(0.00±0.00)mm。说明河南蜂胶对炭疽杆菌弱毒株有明显的抑菌活性,对炭疽杆菌的抑菌活性随pH值增加或浓度降低而减小。     

医院使用的75％乙醇污染调查分析

目的：对医院使用的75％乙醇污染状况进行调查分析，为防止消毒剂的污染及医院内感染发生提供实验依据。方法：按照《消毒技术规范》标准进行细菌总数检测；用VITEK-32型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌。结果：75％乙醇消毒剂细菌超标率为8．1％（5／62）；经鉴定为解淀粉芽孢杆菌、地衣芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、嗜热芽胞杆菌。结论：75％乙醇易受到革兰阳性芽胞杆菌的污染，医护人员应树立严格的消毒灭菌观念，在使用中容器应加盖。小瓶盛装并及时更换；配制时应对环境空气和容器进行严格消毒灭菌。同时应建立、健全医院消毒管理、监督制度。     

四种活菌剂对仔猪黄痢病原菌的体外抑菌试验

 用不致病的1种蜡样芽胞杆菌,3种乳酸菌制成活菌剂,对仔猪黄痢病原菌(大肠杆菌)进行体外抑制试验。试验结果显示:3种乳酸菌对大肠杆菌均有程度不同的抑制作用,而蜡样芽胞杆菌则无抑制作用。     

四味中草药体外抗菌作用研究

[目的]通过黄连、黄柏、地榆、五味子4味中草药对金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、炭疽杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、蜡样芽胞杆菌6株细菌的抗菌试验,比较不同药物活性大小。[方法]采用水煎法提取中药有效成分,然后采用改进K-B纸片琼脂扩散法测定抑菌圈直径,并用试管稀释法测定最小抑菌浓度。[结果]4味中草药均明显抑制金黄色葡萄球菌,炭疽杆菌、志贺氏菌次之;对其余3种细菌仅部分药物有一定的抑菌活性。[结论]4味中草药具有抗菌作用。     

蜡样芽胞杆菌菌体及其胞外聚合物对Cd~(2+)的吸附作用

通过液体培养及吸附试验,研究了Cd~(2+)胁迫下蜡样芽胞杆菌生长及其胞外聚合物(EPS)的产生规律、产量和组成,以及菌体和EPS对Cd~(2+)的吸附作用。结果表明,蜡样芽胞杆菌在不同Cd~(2+)浓度胁迫下均可生长,随着Cd~(2+)浓度的增加,各生长时期均有所延后,EPS的生成量与菌体生长曲线具有一定耦合关系,EPS最大生成量为1.707 g/L,多糖与蛋白质含量之和占EPS干质量的68%~87%。对Cd~(2+)的吸附能力大小顺序为细菌菌体-EPS复合物EPS细菌菌体(不含EPS)。透射电镜-X射线光散射能谱(SEM-EDX)分析结果显示,吸附Cd~(2+)后蜡样芽胞杆菌细胞形态及表面结构发生改变,细胞表面形成Cd~(2+)吸收峰,EPS吸附Cd~(2+)后表面形成不规则的含有Cd~(2+)的颗粒状物质。     

腐乳中产生物胺菌株的筛选鉴定及产生物胺能力评价

为筛选腐乳样品中产生物胺的菌株,以24种市售腐乳样品为研究对象,通过生物胺初筛培养基显色反应进行初筛,再采用高效液相色谱(HPLC)定量分析其产胺能力,获得61株具有氨基酸脱羧酶活性的菌株。选取产生物胺总量较高的20株菌,经16S rDNA分析,这20株菌均为芽孢杆菌属,其中包括6株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、5株巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、3株长形赖氨酸芽胞杆菌(Lysinibacillus macrolides)、2株蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)和4株热带芽孢杆菌(Bacillus tropicus)。还分析了温度、氨基酸浓度、NaCl浓度、乙醇浓度、pH值对产胺量较高的枯草芽孢杆菌和热带芽孢杆菌产胺能力的影响。结果表明:NaCl浓度8%和乙醇浓度10%对生物胺的合成有显著的抑制作用,可应用于腐乳生产中,能有效控制腐乳中生物胺的含量。     

产挥发性物质芽胞杆菌对枇杷炭疽病菌的抑制作用及其鉴定

采用二分隔特殊平板研究芽胞杆菌挥发性物质对枇杷炭疽病菌Colletotrichum acutatum的抑制作用。研究结果表明,筛选得到的8株芽胞杆菌菌株中,抑菌效果最好的菌株为FJA T-4748,抑菌率达90.06％;其次为FJAT-10011,抑菌率达54.99％。经16S rDNA序列鉴定结合菌落形态观察,确认这8株芽胞杆菌分别为解木糖赖氨酸芽胞杆菌 Lysinibacillus xylanilyticus、波茨坦短芽胞杆菌 Brevibacillus borstelensis、短短芽胞杆菌Brevibacillus brevis、土壤短芽胞杆菌 Brevibacillus agri、阿氏芽胞杆菌 Bacillus aryabhattai、美丽短芽胞杆菌Brevibacillus formosus及简单芽胞杆菌Bacillus simplex。本研究筛选的产挥发性物质芽胞杆菌菌株可为枇杷采后炭疽病的生物防治提供菌株参考。     

23株芽胞杆菌及其脂肽类化合物抑菌活性比较

为了比较9个种23株芽胞杆菌及其脂肽类化合物抑菌活性差异,本研究以选择性培养基检测各菌株胞外酶分泌物,采用酸沉淀法提取各菌株脂肽类化合物,用对峙生长法分别测定芽胞杆菌及其脂肽类化合物的抑菌活性,高效液相色谱串联质谱(LC-MS)进行脂肽类化合物种类分析。结果表明:23株芽胞杆菌均能产生蛋白酶,枯草芽胞杆菌PTS-394等9个菌株抑菌能力显著,对尖孢镰刀菌、立枯丝核菌、胶孢炭疽病菌和油菜菌核病菌的抑菌带宽分别为33.4~42.0 mm、34.6~58.2 mm、34.6~40.0 mm和30.1~39.2 mm。枯草芽胞杆菌JND等6个菌株的脂肽类粗提物抑菌作用显著,对尖孢镰刀菌和立枯丝核菌的抑菌带宽分别为26.2~39.4 mm和30.5~34.2 mm。LC-MS检测到有抑菌作用的15株芽胞杆菌的脂肽类化合物种类包括表面活性素家簇、伊枯草素家簇和泛革素家簇。     

不同助溶剂作用下桉叶油对痤疮丙酸杆菌的作用

目的 观察不同助溶剂作用下桉叶油对痤疮丙酸杆菌的作用,为痤疮的治疗提供一定实验参考,同时为开发利用桉叶油资源提供支撑。方法 采用平板牛津杯法及试管法,观察桉叶油在不同助溶剂作用条件下对痤疮丙酸杆菌的抑菌环直径及最低抑菌浓度。结果 纯桉叶油（80%浓度）、桉叶油乙醇溶液（40%浓度）及桉叶油丙酮溶液（40%浓度）对痤疮丙酸杆菌能表现出完全抑菌作用,平板上无细菌生长,阳性对照药（16 μg/mL红霉素）对痤疮丙酸杆菌平均抑菌圈直径为29.44 mm;助溶剂95%乙醇及丙酮对痤疮杆菌无抑菌作用;空白对照（蒸馏水）对痤疮丙酸杆菌无抑菌作用;当以丙酮为助溶剂时,桉叶油的最低抑菌浓度为浓度0.625%;当以95%乙醇为助溶剂时,桉叶油的最低抑菌浓度为1.25%。结论 桉叶油对痤疮丙酸杆菌有较好的抑菌作用;助溶剂95%乙醇、丙酮对痤疮丙酸杆菌无抑菌作用;助溶剂对桉叶油的最低抑菌浓度有一定的影响,丙酮为助溶剂时较95%乙醇为助溶剂时最低抑菌浓度低。