河南蜂胶对枯草芽孢杆菌的抑制作用研究

为探讨河南蜂胶对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的抑菌活性,采用琼脂平板扩散法,以枯草芽孢杆菌为试验菌种,将试验分为7个不同pH组(蜂胶浓度31％),以及在pH 5.5环境下设置10个不同浓度组,记录蜂胶对枯草芽孢杆菌的抑菌效果.结果表明,河南蜂胶对枯草芽孢杆菌有明显的抑菌活性,随pH增高,河南蜂胶对枯草芽孢杆菌的抑菌活性减弱;随着蜂胶浓度的降低,河南蜂胶对枯草芽孢杆菌的抑菌活性减弱,河南蜂胶可观测到抑菌环的最小浓度为0.12％.     

两种无刺蜂蜂胶乙酸乙酯提取物中总酚含量及其抗氧化性比较

本研究以戈氏无刺蜂蜂胶和黄纹无刺蜂蜂胶为研究对象,采用超声辅助提取法,以乙酸乙脂为提取剂,比较2种蜂胶在不同料液比下的提取率,测定提取率最高条件下2种蜂胶提取物中总酚含量及其抗氧化能力。结果表明,不同料液比的提取效果不同,戈氏无刺蜂蜂胶和黄纹无刺蜂蜂胶乙酸乙酯提取物的pH范围分别为3.17～3.58和2.25～2.75;当料液比为1.0∶5.0(g/ml)时戈氏无刺蜂蜂胶和黄纹无刺蜂蜂胶具有最高的提取率,分别为47.68%±1.26%和43.12%±3.64%;总酚含量以每克样品中没食子酸当量表示,戈氏无刺蜂蜂胶和黄纹无刺蜂蜂胶乙酸乙酯提取物中的总酚含量分别为(47.91±0.36)mg/g, GAE和(58.94±1.04) mg/g, GAE,呈极显著差异(P0.01);DPPH自由基清除率随2种无刺蜂蜂胶乙酸乙酯提取物的质量浓度升高而增加,半清除率质量浓度(IC_(50))分别为(26.30±1.04)μg/ml和(24.60±1.02)μg/ml,黄纹无刺蜂蜂胶乙酸乙酯提取物的抗氧化性高于戈氏无刺蜂蜂胶乙酸乙酯提取物。     

丛生盔形珊瑚共附生放线菌NLG-3的抑菌活性及鉴定

【目的】探究丛生盔形珊瑚共附生放线菌NLG-3对植物病原菌的抑菌活性,对其分类地位进行鉴定,为丛生盔形珊瑚共附生放线菌的开发利用提供依据。【方法】采用平板对峙法测定NLG-3对12种植物病原真菌的抑菌活性;采用滤纸片法测定NLG-3发酵液乙酸乙酯粗提物对5种病原细菌的抑菌活性;通过改变pH、温度及光照条件,测定该菌株发酵液的稳定性;采用几丁质平板培养法测定该菌株产几丁质酶的能力;通过基因扩增检测该菌株是否含有非核糖体多肽合成酶(NRPS)和聚酮合成酶(PKS)基因;结合菌株形态特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析对该菌株进行分类鉴定。【结果】菌株NLG-3具有广谱抑菌活性,对供试病原真菌均有不同程度的抑制作用,其中对香蕉炭疽病菌(Colletotrichum musae)和胶孢炭疽病菌(C.gloeosporioides)的抑菌率均在85%以上。NLG-3发酵液乙酸乙酯粗提物可以明显抑制蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)的生长,1 mg/mL NLG-3发酵液乙酸乙酯粗提物对蜡样芽孢杆菌的抑菌圈直径达(2.20±0.11) cm。NLG-3发酵液在中性(pH=7)条件下抑菌活性突出,经40℃及以上高温处理其活性丧失,光照对其抑菌活性无影响。NLG-3能产生几丁质酶,分解培养基中的几丁质。该菌株具有合成酶基因PKS-Ⅱ和NRPS,经初步鉴定该菌株为白刺链霉菌(Streptomyces albospinus)。【结论】NLG-3抑菌活性较好,具有潜在防治热带植物病害的应用价值。     

恒定pH对Xenorhabdus nematophila YL001抑菌活性及抑菌物质合成相关基因表达的影响

为明确恒定pH对Xenorhabdus nematophila YL001抑菌物质产生及相关抑菌物质合成的影响,对pH 5.5、pH 7.0及pH 8.5培养条件下X.nematophila YL001的抑菌活性、主要抑菌物质[Xenocoumacin1(XCN1)和Nematophin]的代谢差异及主要抑菌物质的生物合成基因与相关转录调节子基因的表达量进行分析。结果表明,X.nematophila YL001发酵液对枯草芽孢杆菌和番茄灰霉病菌的抑菌作用在pH 7.0时最佳,而其胞外产物乙酸乙酯与甲醇提取物对枯草芽孢杆菌和番茄灰霉病菌的抑菌作用在pH 8.5时最佳;LC-MS分析表明,随pH的升高,活性物质xcn1的相对含量逐渐升高,而Nematophin的相对含量则先升高后下降;qRT-PCR分析表明,不同恒定pH下,X.nematophila YL001主要抑菌物质生物合成基因及相关转录调节子基因的表达量存在显著差异。pH可显著影响X.nematophila YL001菌株的抑菌活性及代谢,且碱性条件更利于活性物质的产生并保持稳定性。     

荸荠英提取物抑菌特性初探

采用平板涂布法、滤纸片法等对荸荠英提取物的抑菌活性进行了初步研究．发现其乙醇提取物具有一定的抗菌活性，在pH7条件下，提取物对细菌具有较好的抑菌效果，其中对金色葡萄球菌的最低抑菌质量浓度为0．63g／L，对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的最低抑菌质量浓度均为1．25g／L，强于山梨酸钾，而对霉菌、酵母的抑菌效果则较差，弱于山梨酸钾．     

7种美容中药水煎液的抑菌作用

为了研究7种美容中药(竹茹、芦根、白芍、白术、茯苓、白芷、薏苡仁)水煎液对腐败菌的抑菌效果,为研制天然化妆品防腐剂提供依据,采用牛津杯法测定抑菌圈直径,采用液体稀释法测定最低抑菌浓度(MIC).结果显示,芦根水煎液对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的抑制作用最大,抑菌圈直径分别为(16.33±0.58)、(15.00±1.00) mm,MIC分别为31.25、62.5 mg/mL;白术水煎液对大肠杆菌的抑制作用最大,抑菌圈直径为(16.00±1.00) mm,MIC为31.25 mg/mL;竹茹水煎液对黑曲霉的抑制作用最大,抑菌圈直径为(13.00±1.00) mm,MIC为62.5 mg/mL.7种中药水煎液对热、紫外线和pH值均具有较好的稳定性,其抑菌活性仅在pH值9处理后呈现不同程度的下降.说明芦根、竹茹、白术、茯苓水煎液对4种菌均有较好的抑菌效果,白芍和白芷次之,薏苡仁水煎液抑菌效果最差.     

花卉提取物对3种细菌的抑菌性测定

利用丙酮超声波提取和减压浓缩技术,获得17种花卉茎、叶的提取物,分析各提取物对3种细菌的抑菌结果。天竺葵(Pelargonium graveolens)对腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus)和藤黄葡萄球菌(Micro-coccus luteus)具有抑制作用;杜鹃(Rhododendronsimsii R.spp.)对腐生葡萄球菌和炭疽杆菌(Bacillus anthracis)具有抑制作用。天竺葵提取物4种供试质量浓度对腐生葡萄球菌的抑菌率均达96%以上,杜鹃提取物对炭疽杆菌的抑菌率在77%~84%之间。但天竺葵、杜鹃提取物分别对炭疽杆菌和藤黄葡萄球菌无抑制效果。2种花卉提取物抑菌率卡方检验结果表明,不同质量浓度的天竺葵提取物对藤黄葡萄球菌抑菌率差异显著;杜鹃提取物不同质量浓度间对腐生葡萄球菌的抑菌率差异显著。     

体外消化法评定植物性饲料磷透析率的适宜酶促反应条件

为建立一个植物性饲料磷透析率的体外测定方法,首先通过一个L32(49)正交试验分析8个因素(4水平)对酶促反应的影响,然后以第一影响因素为对象进行8水平的单因素试验.结果表明:8个因素对植物性饲料磷透析率的影响大小及对应适宜的酶促反应条件依次为:胰蛋白酶处理时间为6 h,透析液体积为100 mL,胃蛋白酶处理时pH值为2.5,胃蛋白酶浓度2 000 U/mL,处理时间为100 min,酶促反应温度为35 ℃,胰蛋白酶处理时浓度为 1 625 U/mL,pH值为6.5.在此反应条件下测定的豆粕、大麦、高梁、花生粕、菜粕的磷体外透析率分别为:(36.91±0.58)%、(27.28±0.94)%、(26.95±0.58)%、(30.51±0.83)%、(20.82±1.09)%.     

地皮菜中多糖的抑菌特性研究

用超声波细胞破碎机对野生地皮菜破碎后,利用石油醚脱脂及乙醇提取其中的多糖并纯化,利用滤纸片法测定其含量,并检测提取多糖对一些致病菌的抑菌特性。结果表明,地皮菜中多糖含量可达8.5%,对大肠杆菌、炭疽杆菌及金黄色葡萄球菌有不同程度的抑制作用,且抑菌作用随着多糖浓度的增大而增强。     

1株碱蓬内生芽孢杆菌的分离及抑菌活性测定

为进一步探究内生细菌的生防机制,采用NA固体倾注法培养从碱蓬健康组织中分离的菌株,并对分离菌株的个体形态、菌落特征和生长特性进行初步研究,同时采用平板对峙法对其抑菌活性进行了测定.结果表明:从碱蓬健康组织中分离出1株内生芽孢杆菌(EB0901);该菌的生长最适温度为35℃,初始pH6～8时出现生长高峰,以pH为7时生长最好;在NaCl浓度为0.5%时生长最佳,但在10%以上时仍可生长;对供试的9种植物病原真菌菌丝生长均有一定的抑制作用,对玉米大斑病菌、辣椒菌核病菌、平脐孺孢病菌、辣椒炭疽病菌的抑菌能力较强,抑菌率在60%以上,显著高于其他5种植物病原真菌(P＜0.05),其中,对玉米大斑病菌的抑菌活性最强,抑菌率高达64.11%.碱蓬内生芽孢杆菌是一种具有明显抑菌活性的内生细菌,值得进一步开发利用.     

蜂胶提取液对鸡蛋保鲜的效果

采用水、95%乙醇及其分别与超声波的综合作用从原蜂胶中提取蜂胶液,将得到的蜂胶提取液稀释成8、4、2、1mL/L,并分别对蜡样芽胞杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌进行抑菌圈直径和最小抑制浓度(MIC)的测定,选取提取效果最好方法中的两个浓度进行鸡蛋保鲜效果试验。结果表明,超声波作用于95%的乙醇蜂胶液的方法提取效果最好;不同提取方法得到的蜂胶提取液的抑菌作用存在差异,以超声波和乙醇提取的蜂胶液对受试菌作用最强;蜂胶提取液对大肠杆菌的抑制作用最强,其次是沙门氏菌和蜡样芽胞杆菌;在鲜蛋保鲜试验中发现,两种浓度、两种方法均有不同程度的保鲜效果。     

不同绵羊群体BMP4基因多态性与产羔数关系分析

以BMP4基因为候选基因,采用PCR-SSCP方法,分析了小尾寒羊和无角陶赛特及其杂交F1代、F2代的BMP4基因的不同基因型频率,并对该位点不同基因型与产羔数之间的关系进行了分析。结果显示:小尾寒羊BB、B+、++基因型频率分别是1.0%、29.7%、69.2%;无角陶赛特BB、B+、++型频率分别为0、80.8%、19.2%;陶寒F1代BB、B+、++基因型频率分别为5.3%、39.4%、55.3%;陶寒F2代BB、B+、++型基因型频率分别为0、5.0%、95.0%。小尾寒羊的基因型++、B+、BB平均产羔数分别为(1.00±0.00)、(1.67±0.11)、(2.40±0.13),经χ2检验,差异极显著(P<0.01);陶寒F1代的基因型++、B+、BB平均产羔数分别为(2.00±0.00)、(2.45±0.53)、(2.00±0.00),经χ2检验,++、BB组与B+组的平均产羔数间的差异极显著(P<0.01);B基因不能提高无角陶塞特母羊产羔数。     

西藏蜂胶抑菌活性及对金钗石斛茄病镰刀菌抑菌机理探究

为探究西藏蜂胶的抑菌活性及对金钗石斛茄病镰刀菌作用机理，以2种细菌3种真菌为供试菌，采用牛津杯法、菌饼法、最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）对西藏蜂胶的抑菌活性进行评价。通过研究西藏蜂胶处理后金钗石斛茄病镰刀菌菌丝形态、生长速率、细胞膜通透性及呼吸强度探究其抑菌机理。结果表明：（1）西藏蜂胶具有广谱抑菌性，其抑菌能力显著强于市售蜂胶。（2）以80%乙醇提取剂在pH为6的条件下提取的西藏蜂胶对5种供试菌抑菌效果最佳。（3）西藏蜂胶浓度为10 mg·mL^-1时对金钗石斛茄病镰刀菌抑制率达89%，抑菌中浓度（EC₅₀）为2.552 mg·mL^-1；菌丝体细胞形态由饱满破裂到干瘪，细胞膜通透性增强，内容物泄漏；呼吸强度增大，能量代谢受阻，抑制菌丝体生长。综上所述，西藏蜂胶为天然广谱抑菌剂，利用其防治茄病镰刀菌所引起的植物性病害具有良好的开发前景及研究潜力。     

丝光绿蝇幼虫血淋巴中抗菌物质的抑菌活性

观察丝光绿蝇(Lucilia sericata)三龄幼虫经针刺体壁诱导48 h后的血淋巴在不同pH琼脂平板上对溶壁微球菌(Micrococcus lysodeiktic us)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑菌效果,以及经不同pH缓冲液处理后对溶壁微球菌的抑菌效果.结果表明,丝光绿蝇幼虫经针刺诱导后48 h的血淋巴在pH 6.0、6.5的琼脂平板上对金黄色葡萄球菌的抑菌环较大较清晰,随pH增加抑菌环直径减小.在piH 6.0时,对溶壁微球菌的抑菌环直径最大,随pH增加抑菌环直径减小.用pH 6.0的缓冲液稀释处理血淋巴时,对溶壁微球菌的抑菌环最大,用pH 9.0缓冲液稀释后对溶壁微球菌的抑菌环最小.说明丝光绿蝇幼虫经针刺体壁诱导产生的抗菌物质在酸性条件下比在碱性条件下具有更强的抑菌活性.     

魔芋软腐病拮抗放线菌的筛选及其抑菌活性研究

[目的]从土壤中分离筛选魔芋软腐病拮抗放线菌,测定其发酵抑菌活性,并对其活性成分进行初步分离。[方法]采用平板对峙培养法筛选出魔芋软腐病拮抗放线菌。对活性较强的拮抗菌株SJK18作不同碳源、氮源、温度及pH值等培养条件的单因素试验,并分别测定其发酵液的抑菌活性。分别用乙醇和乙酸乙酯萃取拮抗菌的发酵液,并测定抑菌活性。[结果]共分离得到112株放线菌,其中11株具有抑菌能力。在以玉米粉为碳源、KNO3为氮源、温度为30℃及pH值为6.0的单因素试验条件下,SJK18发酵液的抑菌活性最强,且活性的pH值适应范围在5.5～10.0。乙醇提取物的抑菌圈直径为17.0mm。乙酸乙酯萃取浓缩液无抑菌活性,而其萃余液抑菌圈直径为20.0mm。[结论]筛选获得1株对魔芋软腐病原菌有较强拮抗作用的放线菌。     

云南多花蒿挥发油化学成分及抑菌活性研究

[目的]研究云南多花蒿鲜嫩枝叶挥发油的化学成分及抑菌活性。[方法]用水蒸气蒸馏法萃取多花蒿鲜嫩枝叶中的挥发油成分,以气相色谱-质谱(GC-MS)法分离鉴定其化学成分,并以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和大肠杆菌(Escherichia coli)为供试菌,研究其化学成分的抑菌活性。[结果]测得挥发油收率为0.16%;采用GC-MS分离出42个主要成分,并鉴定了22个组分,占挥发性化学成分总含量的66.1%(面积归一化法)。挥发油主要成分有:桉叶二烯(9.5%)、(E)-2-己烯-1-醇(7.8%)、4,11,11-三甲基-8-亚甲基双环[7.2.0]十一碳-4-烯(5.7%)、石竹烯(3.8%)、α-石竹烯(3.0%)、石竹烯氧化物(2.1%)和(+)-α-松油醇(2.1%)等。挥发油对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果明显,对枯草芽孢杆菌有一定的抑菌效果。[结论]云南多花蒿鲜嫩枝叶挥发油含量较高,化学成分结构丰富,香气宜人,且具有明显的抑菌活性,极具研究与开发价值。     

pH值对沼气产气量的影响

[目的]探讨发酵条件对产沼气的影响。[方法]以新鲜猪粪为原料,采用批量进料的方法,研究了7个处理(pH值分别为5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5)对厌氧发酵产气量、产气特性的影响。[结果]不同pH处理发酵都能启动。以pH值6.5启动最快,其次是7.0,其余pH处理启动较慢。各处理的pH值上升到6.5的时间为11 d(pH值7.0)1、2 d(pH值6.5)3、0 d(pH值7.5)3、2 d(pH值6.0)。pH值7.0和pH值6.5的60 d总产气量最高,pH值6.0次之,pH值5.5最低。pH值7.0处理的CH4含量最高,达78.0%,与其他处理差异极显著;pH值6.5处理的CH4含量最大为62.0%;其余各处理CH4含量50.0%左右,差异不显著。[结论]发酵体系的pH值为6.5~7.0,可促进厌氧发酵的启动,提高产沼气的质量。     

复方环丙沙星注射液防治鸡霍乱的试验

对自制的复方环丙沙星注射液进行了药敏试验及防治鸡霍乱疗效试验 .体外抑菌试验结果表明 ,复方环丙沙星注射液对大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、金色葡萄球菌均有很强的抑制作用 ,其抑菌直径分别为 (33.5 0±2 .14) ,(32 .2 0± 1.0 8) ,(30 .40± 2 .35 ) ,(2 8.80± 2 .13) mm,其抑菌效果与环丙沙星的抑菌效果比较 ,差异不显著 .防治鸡霍乱试验结果表明 ,复方环丙沙星注射液对鸡巴氏杆菌引起的鸡霍乱疗效优于环丙沙星注射液     

纳米TiO2复合蜂胶与蜂胶抑菌效果比较

经甘油表面修饰纳米TiO2与蜂胶醇提取液混合制成纳米TiO2复合蜂胶,以金黄色葡萄球菌为例探讨了蜂胶醇提取液与纳米TiO2复合蜂胶的抑菌效果。结果表明:表面修饰纳米TiO2复合蜂胶的抗菌性能优于蜂胶醇提取液。