放疗后复发鼻咽癌微卫星不稳定和杂合性缺失改变的研究

目的比较放疗后复发鼻咽癌（NPC）与初诊NPC中染色体微卫星不稳定（MSI）和杂合性缺失（LOH）发生情况。方法选择1p、3p、3q、4q、9q、11q、13q、14q的12个微卫星多态性位点,显微切割分离22例初诊和18例放疗后复发NPC组织和正常组织,提取DNA,经PCR扩增及聚丙烯酰胺凝胶电泳和硝酸银染色,进行MSI及LOH分析研究。结果（1）8个位点发生了LOH：复发癌与初诊癌相比,LOH发生率在D1S2697位点为28.6%比20.0%,在D13S133位点为30.0%比20.0%,在D9S1682位点为7.7%比9.1%;D5S433和D14S65位点只在复发癌中发生LOH,分别为33.3%和6.7%;D13S263、D4S350、D14S258位点只在初诊癌发生LOH,分别为20.0%、33.3%、16.6%。（2）11个位点发生了MSI：4个位点在复发癌和初诊癌中都发生MSI,4个位点只在复发癌中发生MSI,3个位点只在初诊癌中发生MSI。结论 D1S2697、D13S133、D5S433位点可能含有与放疗后复发NPC相关的肿瘤抑制基因,放疗后复发NPC中MSI发生率呈增高趋势,提示部分放疗后复发NPC与原发癌可能属不同细胞克隆起源。     

一个水稻三倍体×二倍体杂交F2群体的微卫星杂合性丧失

DB102为一田间发现的三倍体水稻，利用它做母本与二倍体水稻中作59杂交，得到一个早世代（F2）稳定群体，通过微卫星分析发现，该群体中有一些微卫星位点发生了杂合性丧失，且至少6条染色体上发生微卫星位点杂合性丧失（loss of heterzygoisity LOH）可能有DNA序列变化。而微卫星位点的杂合性丧失又可能与该杂交组合早世代稳定有关。     

一个水稻三倍体×二倍体杂交F2群体的微卫星杂合性丧失

DB102为一田间发现的三倍体水稻,利用它做母本与二倍体水稻中作59杂交,得到一个早世代(F2)稳定群体,通过微卫星分析发现,该群体中有一些微卫星位点发生了杂合性丧失,且至少6条染色体上发生微卫星位点杂合性丧失(loss of heterzygoisity LOH)可能有DNA序列变化。而微卫星位点的杂合性丧失又可能与该杂交组合早世代稳定有关。     

鸡胚成纤维细胞感染马立克氏病病毒后部分染色体上微卫星不稳定性研究

研究鸡胚成纤维细胞（CEF）感染马立克氏病毒（MDV）后部分染色体（5,6,7,8,9）微卫星的变化。CEF感染马立克氏病超强毒RB1B株后,提取正常鸡胚成纤维细胞和感染病毒的成纤维细胞DNA,应用5,6,7,8,9号染色体上的43个微卫星引物进行PCR扩增,产物采用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染检测。结果表明43个微卫星标记有38个表现出不同程度的微卫星不稳定性,ABR0262发生率最高,为38．10％,ABR0048,ABR0041和MCW0183也较高,为33．33％。21组样品中全部检测到微卫星不稳定性,9号样品微卫星不稳定性发生率最高,为41．86％。11号样品的发生率也较高,为32．56％。表明马立克氏病病毒感染鸡胚成纤维细胞后,可以导致广泛的宿主基因组变化。这些变化是随机的,但是也有一定的规律,而且这些变化可以用微卫星标记来检测。     

慢性持续期支气管哮喘患者痰液中IL-4水平与其临床基线评估相关性分析

目的:探讨慢性持续期支气管哮喘患者痰液中白细胞介素-4(IL-4)水平与其临床基线评估的相关性。方法:分别对慢性持续期支气管哮喘患者轻度16例、中度14例、重度18例进行临床基线评估,主要是肺功能检测及哮喘症状控制评分;并同时采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测其诱导痰液中IL-4水平。结果:慢性持续期支气管哮喘患者痰液中IL-4水平与肺通气功能指标FEV1%呈负相关,与哮喘发作程度临床症状评分相一致。结论:慢性持续期支气管哮喘患者痰液中IL-4水平与其发作程度有关,能作为哮喘评估的一项指标。     

sTREM-1在检测慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者细菌性感染中的作用

目的了解血清可溶性髓系细胞触发受体-1（sTREM-1）检测对早期诊断慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）患者细菌感染的意义。方法将73例AECOPD患者分为有细菌感染组（40例）和无细菌感染组（33例）,同时选择30例健康者作正常对照组,应用ELISA法检测血清sTREM-1、降钙素原（PCT）、C反应蛋白（CRP）水平,并将血清sTREM-1水平检测结果与痰液检测结果进行比较。结果有细菌感染组和无细菌感染组的血清sTREM-1水平均显著高于正常对照组;有细菌感染组的血清sTREM-1水平也显著高于无细菌感染组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。痰液检测细菌感染与血清sTREM-1水平鉴别细菌感染的比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论测定血清sTREM-1水平有助于早期诊断AECOPD患者是否存在细菌感染。     

聚合酶链反应诊断结核病

结核菌行PCR检测并与涂片检查对照研究报道不多，为此我们对346例作了观察，现将结果报道如下。1材料和方法1．1材料（1）标本收集：患者痰标本326例，淋巴结结核13例以及其他结核病7例，主要为本院门诊及传染科住院患者。以上346例病例参照1978年全国结核病防治工作会议诊断标准，根据临床表现，胸部X线检查，以及病原学和病理学等检查确诊后，患者漱口，留晨痰，或严格消毒后取标本。（2）PCR试剂盒：湛江三维公司提供。（3）扩增仪：美国普盛公司生产的GTC－2型基因扩增仪。1．2实验方法（l）PCR方法：痰液用4％NaOH液化，取1·5m…     

长沙地区城镇居民迟发性性腺功能减退症发病调查分析

目的 了解长沙地区城镇居民迟发性性腺功能减退症（late-onset hypogonadism,LOH）发生率及影响因素。方法 选取健康男性志愿者295例,年龄40~70岁之间,调查采用个人信息、整体健康状况、男性更年期自我评定量表进行评估,并测定性激素水平,同时测定同一地区30~39岁健康男性的相关指标作为对照。结果 LOH量表筛查阳性率为37.29%,睾酮切点值（TT、FT、Bio-T）筛查总阳性率分别为19.66%、33.22%、27.12%,LOH临床患病率为10.85%。年龄、体质量指数、高血压、吸烟是影响LOH发病的重要危险因素,而有规律运动是LOH的重要保护性因素。结论 长沙地区城镇居民LOH发生率较高,年龄、整体健康状况及生活方式均是影响LOH的重要因素。     

支气管哮喘治疗过程中痰液细胞变化分析

目的：探讨支气管哮喘（哮喘）治疗过程中痰液细胞的变化及其与疗程之间的关系。方法：收集支气管哮喘患者32例发作之初、病情好转以及病情缓解时期的痰液，比较哮喘病程不同时相之间以及不同时相与13例正常自愿者之间痰液细胞成分的差异。结果：哮喘急性发作初期痰液脱落上皮细胞明显增多，而嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞与正常对照组无明显差别；随着病情好转，脱落上皮细胞数显著下降，而嗜酸性粒细胞数和（或）中性粒细胞数显著升高，淋巴细胞与正常对照组仍无明显差别；当病情缓解时，脱落上皮细胞的数量接近正常对照组，嗜酸性粒细胞和（或）中性粒细胞数也显著下降，而淋巴细胞明显增多。结论：支气管哮喘从起病到治疗后病情缓解这一连续过程中，上皮细胞由多到少，嗜酸性粒细胞、中性粒细胞则由正常到增多，然后恢复正常，淋巴细胞则由正常到不变至增多，这可能与不同病期各种细胞所发挥的作用不同有关。     

马立克氏病毒感染致鸡胚成纤维细胞4号染色体上微卫星不稳定性研究

应用微卫星技术对感染马立克氏病毒5 d后的32个鸡胚成纤维细胞(CEF)4号染色体上的20个微卫星标记进行PCR扩增,扩增产物采用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染检测.试验结果显示:20个微卫星标记有18个表现出不同程度的微卫星不稳定性,其中ABR0622发生率最高,为37.50%;MCW0174、ADL0266和ABR0382的发生率较高,均为31.25%.在32组样品中有30个检测到微卫星不稳定性,其中11号样品发生率最高,为45.00%,其次是3号样品为35.00%.结论:CEF感染马立克氏病毒后出现微卫星不稳定性现象.     

利用微卫星标记分析湖羊GDF8区域的遗传多样性

1材料与方法 1．1试验材料与DNA提取2007年,在江苏省苏州市种羊场随机选取成年羊88只,采取耳组织提取DNA,-20℃保存。并记录湖羊的初生重、断奶重和6月龄重。     

PCR-SSCP检测微卫星基因型方法的研究

非变性丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)在检测片段差异较小的微卫星等位基因时误差较大。针对Native-PAGE的不足,以鸡1号染色体上的7个微卫星位点为例,对PCR-SSCP(单链构陷多态)检测此类等位基因的效果进行了分析。结果表明,对MS202和MS502,通过检测单链DNA,PCR-SSCP能准确分离PAGE无法区分的片段差异较小的等位基因;对MS1404,单链和双链DNA分离效果相同;对MS1805、MS1803、wxt_MS_3,双链DNA得到了很好分离,但单链DNA分离效果不佳。结果表明,对某些微卫星位点,PCR-SSCP能弥补Native-PAGE不足。     

6个绵羊品种（系）中3个微卫星基因座的多态性与多羔性状关系的研究

采用PCR扩增及产物的电泳法检测了34只小尾寒羊、35只无角陶赛特、30只萨福克和中国美利奴（新疆型）多胎品系（29只）、肉用品系（30只）、体大品系（29只）6个品种（系）共187只母羊OarAE101、BM143和Oar—HH35三个微卫星标记的多态性,并对不同基因型母羊间的多羔性状进行了差异分析。结果表明,绵羊一些微卫星基因座的多态性与多羔性状间具有相关性;而这种相关性具有明显的品种差异性;可作为多羔性状选育辅助标记的微卫星标记有：OarHH35的117bp／121bp和OarAE101的103bp／111bp基因型（小尾寒羊）;OarHH35的127bp／141bp,BM143的104hp／114hp和OarAE101的103bp／103bp基因型[中国美利奴（多胎）];OarAE101的111bp／111bp基因型和BM143的112bp／122bp基因型[中国美利奴（肉用）];BM143的112bp／122bp基因型（萨福克）。而萨福克OarHH35的125bp／139bp、127bp／141bp基因型均产单羔,在多羔性状的选育中应予以淘汰。在小尾寒羊,与血液Tf基因型和BMPR—IB基因型指标相比,微卫星法并不是一种较好的多羔性状选育方法。     

芙蓉鲫（芙蓉鲤♀×红鲫♂）及其原始亲本间的遗传关系

利用RAPD和微卫星标记技术,对芙蓉鲫及其原始亲本（红鲫、芙蓉鲤、散鳞镜鲤、兴国红鲤）5个群体的遗传关系进行研究。利用20条随机引物进行RAPD分析,其中12条在5个群体中均能扩增出特异条带。统计分析显示：芙蓉鲫与红鲫、芙蓉鲤、散鳞镜鲤、兴国红鲤的遗传相似性分别为0.8757、0.7478、0.7419、0.7449,遗传距离分别为0.1327、0.2906、0.2985、0.2944。在进行微卫星标记分析时,所扩增的29对微卫星引物中共有13对在5个群体中均能扩增出特异条带。统计分析显示,芙蓉鲫与红鲫、芙蓉鲤、散鳞镜鲤、兴国红鲤的遗传相似性分别为0.8717、0.7434、0.6680、0.7552,遗传距离分别为0.1374、0.2965、0.4034、0.2808。两种分析结果均表明,芙蓉鲫的遗传结构更接近于父本红鲫,与外祖父兴国红鲤的遗传相似性比与外祖母散鳞镜鲤的遗传相似性要大,其遗传结构更偏向于具红色体征的原始亲本。     

水稻抗白叶枯病基因在物理图谱上的锚定

到目前为止,经国际注册确认和期刊报道的水稻白叶枯病抗性基因共35个。已被定位的抗性基因有26个,即第1染色体上有2个,Xa29(t)和xa34(t);第3染色体上有Xa11;第4染色体上有6个,Xa1、Xa2、Xa12、Xa14、Xa25(t)、Xa31(t);第5染色体上有xa5;第6染色体上有3个,Xa7、Xa27(t)、xa33(t);第7染色体上有xa8;第8染色体上有xa13;第11染色体上有9个,Xa3/Xa26、Xa4、Xa10、Xa21、Xa22(t)、Xa23、Xa30(t)、Xa32(t)、Xa36(t);第12染色体上有2个,xa25、xa32(t)。Xa1、xa5、xa13、Xa21、Xa23、xa25、Xa26、Xa27已成功克隆。文中利用GRAMENE网站公布的抗白叶枯病基因的分子标记,在日本晴的测序图谱Gramene Annotated Nipponbare Sequence 2009上进行物理图谱锚定,将已定位的26个抗白叶枯病基因锚定在其物理图谱的26个位点上,为抗白叶枯病基因的基因克隆、分子标记辅助选择奠定了基础。     

凡纳滨对虾3个亲本及其子代群体的SSR分析（摘要）（英文）

利用微卫星标记技术,采用8对微卫星引物对凡纳滨对虾3个亲本群体（OI Q、SIS Q、Kona Bay Q）及其子一代（OI Z、SIS Z、Kona BayZ）共计120个个体进行遗传分析。计算6个群体在8个微卫星位点上的平均等位基因数（Na）、平均有效等位基因数（Ne）、平均观测杂合度（Ho）、平均期望杂合度（He）、平均多态信息含量（PIC）和平均Hardy-Weinberg平衡指数（D）,以上各参数均采用群体遗传学分析软件POP-GENE3.2处理,同时根据Nei的方法计算群体间的遗传距离和遗传相似系数。运用MEGA3.0软件,采取UPGMA方法根据6个群体的遗传距离进行聚类。结果表明：8对微卫星引物在6个群体中共检测到28个等位基因,每个位点的等位基因数为2 ～6个,平均等位基因数为3.5;各位点的期望杂合度均比观测杂合度高;多态信息含量（PIC）值为0.479 4 ～0.769 9,说明这8个位点在凡纳滨对虾中具有较高的信息含量。在亲本和子代群体遗传结构分析中,子代的有效等位基因数、杂合度和多态信息含量等指标均略低于亲本群体,但子代的遗传多样性并未受到太大影响,仍保持较好的遗传力。     

湛江地区无偿献血人群HTLV-I感染状况的调查研究

目的 了解湛江地区无偿献血员中HTLV—I感染情况。方法采用ELISA法检测7630名湛江地区无偿献血者血清中HTLV抗体，其中1896名为外地人群，5734名为本地人群。阳性者进行双孔复检，仍阳性者采用PCR法进行确证及系统发生树分析。结果ELISA法检测1896名外地人群HTLV-I抗体阴性；5734名本地无偿献血者中发现1例HTLV-I感染，PCR确证仍为阳性，阳性率为0．17‰。获得1株同属世界群世界人种亚型的HTLV-I毒株的部分核酸序列。结论建议在本地区无偿献血员中开展HTLV-I常规筛查。     

褐色橘蚜在健康与CTV植株上的EPG比较

利用刺探电位图谱（EPG）技术对褐色橘蚜Toxopter acitricida （Kirkaldy）在健康与感染CTV的植株上的取食行为进行了比较研究.结果显示,褐色橘蚜在二者上均产生8种取食波形,分别为非刺探波（np波）、路径波（A波、B波、C波）、Pd波、韧皮部分泌唾液波（E1波）、韧皮部被动吸食波（E2波）以及木质部主动吸食波（G波）.刺探过程中,二者非刺探总时间（np波）存在差异;褐色橘蚜在健康植株上的刺探次数最多且C波的总持续时间最长,与感病植株差异显著.感病植株上,E1波的次数和持续时间均显著多于健康植株.褐色橘蚜在感病植株上E2波的总持续时间为（241.33±24.12 min）,显著长于在健康植株上（160.30 ±24.63 min）的持续时间.由此可初步推断,感染CTV的植株在一定程度上会增加褐色橘蚜获毒与传毒的几率.