花生幼叶丛生芽高效诱导的制约因素研究

以花生品种豫花14号4 d苗龄的幼叶为外植体,对花生幼叶高频不定芽诱导进行研究。在MS培养基的基础上,添加了芽诱导常用的细胞分裂素6-BA、生长素NAA及两种不太常用的脱落酸(ABA)、噻重氮苯基脲(TDZ),结果表明,单独使用6-BA,NAA或TDZ,不定芽诱导率较低;采用较高浓度的6-BA(8 mg/L)、较低浓度的NAA(1 mg/L),添加低浓度的ABA(1 mg/L),不定芽诱导率可达80%以上。最佳诱导培养基为MS+6-BA 8 mg/L+NAA 1 mg/L+ABA 1 mg/L+AgNO32 mg/L,从整体上观察,最佳继代培养基为MS+6-BA 5 mg/L+NAA 2 mg/L+AgNO32 mg/L。同时研究发现,花生幼叶近叶柄基部切口处不定芽诱导率较高,是较理想的不定芽诱导部位。     

不同银杏外植体器官的分化

以银杏无菌苗带芽的茎段、幼叶,成熟胚的子叶、根段,雌、雄株嫩茎、雄花粉等为外植体,研究了它们在不同培养上的器官分化情况。结果表明,无菌幼苗茎段可以诱导出双芽体,雌、雄株的当年生嫩茎可以诱导出双芽体或3芽体,不定芽的发生为直接再生;子叶在MS NAA1.0mg/L KT2.0mg/L培养基上诱导出2个不定芽,小苗可长至2.0cm。另外有些子叶在切口基部产生白不定根。30d叶龄的无菌幼苗叶片在MS NAA1.0mg/L BA1.0mg/L或MS NAA1.0mg/L KT0.5mg/L上,有直接发生不定根现象,最高生根率达40%;雄花粉也有不定根的发生。     

山核桃幼胚不定芽的诱导

以山核桃Carya cathayensis花后60,75和100 d的幼胚为外植体,金属硫蛋白（MT）复合维生素+ 20 g·L-1葡萄糖+10 mg·L-1腺嘌呤+500 mg·L-1水解酪蛋白作为基本培养条件,研究山核桃幼胚的不同发育时期,不同植物生长调节物质及基本培养基对山核桃不定芽诱导的影响。结果表明,山核桃花后60 d的幼胚培养56 d后未形成不定芽,花后100 d的幼胚比花后75 d的幼胚诱导产生的不定芽多而且长;植物生长调节物质对山核桃不定芽诱导以0.010 0 mg·L-1 4-氨基-3,5,6-三氯吡啶羧-酸（Picloram） + 3.0 mg·L-16-苄氨基腺嘌呤（6-BA）为启动培养基较佳;当6-BA质量浓度一定时,随Picloram质量浓度增加不定芽数量差异不显著;当Picloram质量浓度一定时,随6-BA质量浓度增加,产生不定芽数逐渐上升,但当6-BA达10 mg·L-1时,不定芽出现明显玻璃化现象;2,4-D的添加不利于外植体不定芽产生;MS（Murashige and Skoog）是最佳基本培养基。图1表2参16     

羽衣甘蓝丛生芽诱导和植株再生研究

以羽衣甘蓝的幼叶、茎尖和下胚轴为外植体,进行不定芽诱导试验,研究了不同外植体、激素浓度配比对其离体培养效果的影响。结果表明:不同外植体对不定芽诱导效果影响很大,其中茎尖出芽率最高,下胚轴次之,幼叶最差;以MS+6-BA2.5 mg/L+NAA0.l mg/L,诱导成苗率最高,芽苗健壮;芽在继代培养中,以MS+6-BA2.0 mg/L+IAA0.1 mg/L增殖率最高;在生根阶段,以1/2MS+IBA0.5 mg/L生根效果最好,生根率可达100%。     

山核桃幼胚不定芽的诱导

以山核桃Carya cathayensis花后60,75和100d的幼胚为外植体,金属硫蛋白（MT）复合维生素＋20g·L^-1葡萄糖＋10mg·L^-1腺嘌呤＋500mg·L^-1水解酪蛋白作为基本培养条件,研究山核桃幼胚的不同发育时期,不同植物生长调节物质及基本培养基对山核桃不定芽诱导的影响。结果表明,山核桃花后60d的幼胚培养56d后未形成不定芽,花后100d的幼胚比花后75d的幼胚诱导产生的不定芽多而且长;植物生长调节物质对山核桃不定芽诱导以0.0100mg·L^-14-氨基-3,5,6-三氯吡啶羧-酸（Picloram）＋3.0mg·L^-16-苄氨基腺嘌呤（6-BA）为启动培养基较佳;当6-BA质量浓度一定时,随Picloram质量浓度增加不定芽数量差异不显著;当Picloram质量浓度一定时,随6-BA质量浓度增加,产生不定芽数逐渐上升,但当6-BA达10mg·L^-1时,不定芽出现明显玻璃化现象;2,4-D的添加不利于外植体不定芽产生;MS（Murashige and Skoog）是最佳基本培养基。     

变异假酸浆嫩茎组织无性系建立的研究

为保存假酸浆有利变异的种质,满足栽培对种苗的需要,以变异植株嫩茎为材料,进行了嫩茎的愈伤组织诱导和分化培养、分化不定芽生根培养、试管苗生根继代培养、试管苗的移栽和定植的研究,建立起变异植株的无性系。结果表明:MS+6-BA0.2mg·L-1+2,4-D1.2mg·L-1培养基是变异假酸浆嫩茎愈伤组织诱导培养和继代培养的理想培养基;MS+GA30.5mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1培养基是假酸浆嫩茎愈伤组织分化培养的理想培养基;White+IAA0.1mg·L-1+IBA0.4mg·L-1培养基是假酸浆不定芽生根培养的理想培养基;定植的试管苗生长旺盛,保持了假酸浆的所有生物学性状和花期延长的有利观赏变异性状。     

邓恩桉不同成熟度组织中rboh基因表达分析

rboh基因的表达产物NADPH氧化酶参与调节植物体的多种生理活动。将邓恩桉嫩茎接种于添加了0.86μmol/L N-苯基-N-噻唑基脲(PBU)和0.57μmol/L吲哚乙酸(IAA)的SPCa培养基中,诱导得到不定芽;以邓恩桉的不定芽、嫩茎和成熟叶为材料,提取总RNA后逆转录得到c DNA;以RTEF基因为内参基因,通过荧光实时定量PCR检测3种组织中rboh2、rboh3、rboh4的转录水平。结果表明,3个rboh基因在不同成熟度组织中的转录水平由强到弱依次为:成熟叶嫩茎不定芽。说明邓恩桉rboh基因的转录水平受组织分化程度的影响,组织成熟度越高,rboh转录水平越强。     

卵叶钓钟柳的离体再生及特殊中药成分的HPLC检测

以卵叶钓钟柳无菌苗的下胚轴为外植体,通过不定芽诱导、增殖和生根建立离体再生体系,并采用HPLC 检测试管苗中松果菊苷和毛蕊花糖苷含量.结果表明,在MS+1.0mg/LBA 0.5mg/LNAA 培养基中,下胚轴 20d不定芽诱导率为88.33%;在MS 0.5mg/LBA 0.2mg/LNAA培养基中,不定芽1~3代平均繁殖系数达 7.5;在1/2MS培养基中,不定芽20d生根率达100%;48株试管苗移栽到田间,30d成活46株,成活率达 95.83%.试管苗全株含毛蕊花糖苷约40.37μg/gDW,不含松果菊苷.该试验成功建立了卵叶钓钟柳离体再生体 系,为其快速繁殖和遗传转化奠定了基础.     

辽东楤木愈伤组织诱导及增殖技术研究

以辽东楤木茎尖、幼叶、嫩茎、休眠芽为外植体,以MS为基本培养基,附加不同种类和浓度的植物生长调节物质诱导丛生芽及再生植株,筛选出适合于辽东楤木组织培养的系列培养基配方。结果表明。愈伤组织诱导的最佳培养基为：MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．1mg／L（或IAA0．2mg／L）,幼叶为愈伤组织诱导的理想外植体,30d继代一次分化效率较高,达到73％;不定芽分化的最佳培养基为Ms＋6-BA1．0～1,5mg／L＋IAA0．1-43．15mg／L＋NAA0．1-43．15mg／L：不定芽生根的最佳培养基为1／2MS＋NAA0．5mg／L：按1：1混配的蛭石与草炭为试管苗移栽最适基质。     

金鱼草嫩茎组织培养及无性系建立的研究

以金鱼草变异植株的嫩茎为外植体,采用不同培养基对其愈伤组织的诱导与分化、不定芽生根、试管苗移栽和扦插等进行研究,以建立金鱼草变异植株的无性系.试验结果表明;MS 6-BA 0.8mg/L IBA 0.1mg/L 2,4-D 0.5mg/L 蔗糖30g/L 是诱导金鱼草嫩茎愈伤组织的理想培养基,MS AgNO3 0.6mg/L 6-BA 0.2mg/L NAA 0.1mg /L 蔗糖30 g/L是诱导愈伤组织和不定芽分化的理想培养基,1/3MS IAA 0.6mg/L 蔗糖10g/L 是金鱼草试管苗生根培养和生根继代培养的理想培养基;炉灰渣是试管苗移栽扦插的最适合基质,移栽成活率为96%,扦插成活率为93%.移植于花坛的试管苗具有保持有利变异的特     

影响长寿花离体培养及植株再生的几个因素

对长寿花茎段培养 7～ 8d ,部分茎段腋芽萌动。 30d培养结果表明 ,芽诱导的最佳培养基是 :MS 6 -BA1 0mg/L NAA0 5mg/L ;芽伸长的最佳培养基是 :1/ 4MS ;形成有效节的最佳培养基是 :MS。继代培养中各培养基上无叶茎段均较带叶茎段萌芽率高。在 5、 6、 7号培养基上 ,叶片培养 9d时 ,从叶柄基部开始形成不定芽 ,在其它培养基上 ,14d才开始有不定芽形成。 30d培养结果还表明 ,诱导叶片再生不定芽的最佳培养基是 :1/ 2MS 6 -BA1 0mg/L。诱导根生长的最佳培养基是 :1/ 4MS     

河北杨和新疆杨离体叶片诱导不定芽研究

对河北杨和新疆杨离体叶片诱导不定芽的方法进行了研究。结果表明,适合河北杨和新疆杨离体叶片不定芽诱导的最适培养基为:1/2M S+0.25 m g/L 6-BA+0.01 m g/L TDZ+0.25 m g/L IAA;在此培养基中,叶片分化率河北杨可达70%,新疆杨可达52%;平均分化芽数河北杨为6.84个,新疆杨为5.32个。6-BA单独使用对叶片不定芽诱导没有效果,NAA作用不明显。叶片刻伤方式对两种杨树叶片诱导不定芽影响显著,沿中脉横切效果优于去除叶边缘,诱导的不定芽数前者比后者约多3个。光照显著影响叶片不定芽产生的时间,不定芽在3~5 d暗培养后转至16 h/d光照下培养比全程16 h/d光培养发生早15 d左右;光照对分化率和平均分化芽数无显著影响。     

白玉彩椒子叶离体诱导不定芽的研究

以子叶为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的激素配比进行白玉彩椒子叶离体诱导不定芽试验。结果表明:将白玉彩椒播种繁殖萌发的子叶切成5 mm见方,转入到MS+NAA 0.6 mg/L培养基上,诱导愈伤组织的效果最好,然后将形成的愈伤组织切块转入到不定芽诱导培养基MS+6BA 0.4 mg/L+NAA 0.2mg/L或MS+KT1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L配方中,诱导不定芽的效果较好。     

巴戟天的组织培养及快速繁殖

以巴戟天苗的叶片、茎尖、茎段为外植体,通过诱导出不定芽进行快速繁殖。比较了不同外植体在添加不同浓度BA和NAA培养基上的诱导效果,结果表明:带节的茎段在MS 6-BA1.0mg/L NAA0.5mg/L上的不定芽诱导率为95%,不定芽在不添加任何激素的MS培养基上生根率为85%,移栽成活率为90%。     

二色补血草的组织培养和离体快繁研究

[目的]为二色补血草的快速繁殖技术提供科学指导。[方法]以二色补血草的子叶与胚轴作为外植体,建立快速繁殖体系,研究不同激素浓度对诱导愈伤组织、不定芽以及生根率的影响。[结果]不同激素浓度的培养基均能使外植体不同程度地生成愈伤组织及不定芽;生根培养基中只有A、B、H、I组有不定根产生,其余组均无不定根产生。[结论]以子叶为外植体,愈伤组织和不定芽的最佳诱导培养基分别为：Ms＋O．7mg/L6-BA＋0.1mg/L NAA、MS＋0．5mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA;以胚轴为外植体,愈伤组织和不定芽的最佳诱导培养基为：MS＋0．3mg／L6-BA＋0．5mg／LNAA。诱导不定根的最佳培养基为：MS0。     

TDZ和CPPU对鼎湖山紫背天葵不定芽诱导的影响

[目的]研究TDZ和CPPU对紫背天葵不定芽诱导的作用。[方法]以鼎湖山野生紫背天葵（BegoniafimbristipulaHance）的无菌苗叶片和愈伤组织为材料,研究TDZ和CPPU对其不定芽诱导的影响。[结果]TDZ和CPPU均可诱导紫背天葵叶片和愈伤组织形成不定芽,其中MS＋0．5mg／LTDZ诱导不定芽的效果最佳,在1／2MS＋0．2mg／LIBA的培养基上不定芽可100％生根并长成完整植株。小苗移栽成活率达到90％以上。[结论]TDZ和CPPU能够有效地诱导紫背天葵不定芽的形成。     

蝴蝶兰组培快繁技术研究

通过组织培养的方法诱导蝴蝶兰花梗上的腋芽萌发,可以得到无菌的蝴蝶兰不定芽。以不定芽上的幼叶为外植体,建立蝴蝶兰的无菌培养体系。结果表明:诱导腋芽萌发的培养基为MS+5 mg/L 6-BA;利用幼叶进行原球茎诱导的最佳培养基为MS+5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.1 g/L活性炭(AC)+150 mL/L椰汁(CM);原球茎增殖的培养基为3 g/L花宝一号(HyponexNo.1)+5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA+150 mL/L CM;生根培养基为3 g/L Hyponex No.1+0.1 mg/L6-BA+1 mg/L NAA+0.5 g/L AC+100 mL/L土豆汁。     

车前不定芽直接诱导及再生体系的建立

[目的]建立车前高效离体植株再生体系,为车前快速扩繁奠定基础。[方法]以车前无菌苗的下胚轴和子叶为外植体,以MS为基本培养基,研究了6-BA、NAA不同配比的培养基对车前下胚轴和子叶不定芽诱导的影响。[结果]MS培养基添加6-BA2 mg/L,5～7d的下胚轴不经过愈伤组织诱导阶段便可直接形成不定芽,不定芽诱导率为80%,每个外植体可产生7～8个不定芽。培养基中添加NAA促进不定根的分化,但影响不定芽的诱导。6-BA与NAA配合使用时,外植体易分化愈伤组织。在添加NAA的MS培养基上,再生苗诱导生根频率为100%。将再生植株移栽于盆土中,可获得100%存活率,且生长良好。[结论]6-BA促进车前下胚轴直接分化不定芽,而NAA则影响不定芽的诱导,在不定芽诱导培养基中应避免添加NAA。     

药用植物仙茅的组织培养及快繁体系的建立

[目的]针对仙茅市场需求量不断增长,野生资源受到严重破坏的情况,系统地研究了药用植物仙茅的组织培养及快繁体系的建立。[方法]以仙茅根茎上的幼叶为外植体,在MS培养基上添加不同的激素配比进行组织培养。[结果]外植体在MS＋6-BA0．50mg／L＋NAA0．05ms／L或MS＋6-BA1．00ms／L＋NAA0．05mg／L培养基中培养20d诱导产生愈伤组织;将诱导产生的愈伤组织转入不合激素的MS培养基中培养30d诱导产生芽,同时在芽的基部产生根;幼苗的移栽成活率高达95％以上。[结论]采用组织培养方式可进行仙茅的快速繁殖,为确保药用植物资源仙茅的保护和可持续利用提供有效途径,     

盐生植物盐角草同化枝不定芽的诱导与增殖

【目的】建立并确定盐生植物盐角草(Salicornia europaea L)同化枝不定芽诱导与增殖的试验体系和培养基。【方法】以MS为基本培养基,通过附加不同浓度激素(TDZ、NAA、6-BA)及盐(NaCl)进行盐角草不定芽的诱导,筛选诱导盐角草不定芽的最适激素配比及盐浓度;后期通过对细胞分裂素TDZ浓度(0、1.6、1.8、2.0和2.5 mg/L)的摸索,确定盐穗木不定芽增殖的最适浓度。【结果】盐角草同化枝在含有200 mM NaCl的MS₃(2.0 mg/L TDZ、0.1 mg/L NAA)培养基中不定芽诱导率达32.4%,显著高于(P<0.05)其余组,为最适诱芽培养基。再生的不定芽在含有2.0 mg/LTDZ的培养基中经过30~40 d的培养,不定芽增殖率可达619.5%。盐角草不定芽诱导及增殖最适培养基均为:MS+2.0 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA+200 mM NaCl。【结论】一定浓度的TDZ、NAA及NaCl组合,可通过直接器官发生途径有效诱导盐角草同化枝不定芽的产生和增殖。