人低分化鼻咽癌上皮细胞株裸小鼠移植实验初步研究

本文报告将人低分化鼻咽癌上皮细胞株(CNE-2Z)移植于裸鼠体内,七个月连续传九代,初步建立了人低分化鼻咽鳞癌裸鼠模型,及对其特征的观察研究。该模型具有移植成功率高,呈进行性生长,恶性程度高,不自行消退的特点,可供人体外整体研究鼻咽癌生物学特性及实验性治疗之用。     

以GFP为报告基因优化CNE-2Z细胞脂质体转染条件的实验研究

目的：为在脂质体介导基因转染人低分化鼻咽癌上皮细胞株CNE-2Z时获得较高转染效率，同时观寨GFP作为报告基因用于脂质体转染条件优化的可行性。方法：以GFP为报告基因，通过比较碱裂解法与PEG纯化法制备质粒；改变DNA、脂质体量及转染时间，在荧光显微镜下观察并计算转染效率。结果：在35mm培养皿中．2μgDNA与4μL脂质体转染CNE-2Z细胞8h，转染效率最高，且在显微镜下观察不到细胞的形态变化。结论：在35mm培养皿中，2μgDNA与4μL脂质体转染CNE-2Z细胞8h，可获得最佳转染效率，GFP可作为报告基因优化脂质体转染条件。     

蛋白激酶C亚型在鼻咽癌细胞中的分布及在增殖中的作用

本文以人低分化鼻咽癌(NPC)上皮细胞系(CNE-2Z)为对象,用蛋白激酶C(PKC)三种主要亚型的单克隆抗体,采用点印迹(Dot Blotting)法检测细胞颗粒部分与胞浆部分PKC各亚型的含量及分布.采用MTT     

鼻咽癌细胞株CNE1转染EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)后对放射敏感性的影响

目的：研究EB病参LMP1对鼻咽癌高分化细胞株CNE1放射敏感性的影响。方法：用电转染技术将带有EB病毒LMP1基因的真核表达质粒导入鼻咽癌高分化细胞株CNEl，用免疫组化法及Western blot检测LMPl的表达；LMP1对CNEl细胞放射敏感性的影响采用^60钴治疗仪照射后集落形成实验进行观察。结果：CNE1细胞抹转染LMP1基因后LMPl蛋白呈阳性表达，对照放射敏感性比未转染株的细胞存活事低(P＜0．01)。结论：LMPl能增加鼻咽癌细胞的放射敏感性，这种作用可能与LMP1的促细胞转化，抑分化有关。     

低分化鼻咽癌细胞系(CNE—2Z)及其21个单克隆株的癌细胞电泳分析

利用细胞电泳技术对低分化鼻咽癌细胞系(CNE-2Z)及其21个单克隆细胞株进行检测。CNE-2Z系平均细胞电泳率为1.43±0.35,21个单克隆平均细胞电泳率高低不一,从0.87±0.15到1.72±0.15,说明作为群体细胞系的CNE-2Z在细胞电泳方面具有明显异质性.同时,检测结果初步提供了21个单克隆株的纯度和转移能力的线索.     

顺铂对鼻咽癌细胞株端粒酶活性和凋亡的影响

目的：研究抗癌药顺铂对5株鼻咽癌细胞端粒酶活性和凋亡的影响．以探讨端粒酶活性水平与鼻咽癌的关系及顺铂诱导鼻咽癌细胞凋亡的可能机制，为端粒酶可能成为一种很好的鼻咽癌治疗靶点提供实验依据。方法：用TRAP—ELISA的方法定量检测5株鼻咽癌细胞在顺铂处理前后的端粒酶活性水平，观察细胞形态及生长状态．以流式细胞仪分析细胞周期的改变并检测凋亡。结果：5株鼻咽癌细胞端粒酶均呈阳性，其中LTRs—LMP细胞株端粒酶活性水平最高，高分化细胞株CNE—1端粒酶活性水平低于低分化细胞株CNE—2Z、HNE—2。经顺铂处理后5株鼻咽癌细胞端粒酶活性明显受抑制、细胞形态发生明显改变，出现细胞凋亡。结论：端粒酶的活化与鼻咽癌密切相关。临床常用化疗药物顺铂可能是通过在S期抑制端粒酶活性并诱导鼻咽癌细胞凋亡而发挥杭癌作用的。因此我们认为端粒酶可以作为鼻咽癌的一个治疗靶点。     

人鼻咽上皮及鼻咽癌组织角蛋白的免疫组化研究

用抗角蛋白抗体免疫组化ABC法,对28例人鼻咽上皮(包括鳞状上皮及柱状上皮)和75例分化程度不同的鼻咽癌细胞进行了角蛋白检测。结果全部为阳性表达,其中鼻咽上皮表层细胞染色强度明显,基底层细胞染色较弱,两者之间有明显差别(P<0.01);鼻咽癌细胞以高分化鳞癌表达最强,未分化癌表达最弱,高、低,未分化鼻咽癌细胞之间的角蛋白表达有显著性差异(P<0.005),表明角蛋白表达与分化有关。     

β-酪蛋白基因在不同乳腺上皮细胞中表达的初步分析

应用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术对山羊乳腺上皮细胞（GMEC）中β-酪蛋白mRNA进行检测以评价GMEC乳蛋白合成的功能.同时,比较商品化小鼠乳腺癌细胞C127、人乳腺癌细胞系T47D中β-酪蛋白基因的转录表达.结果表明,原代培养山羊乳腺上皮细胞GMEC-1能够检测到β-酪蛋白基因的表达,在激素诱导下,GMEC-3细胞中能检测到β-酪蛋白基因mRNA,但C127和T47D细胞系中均无法检测到.     

人低分化鼻咽癌上皮细胞系对某些海洋生物的反应

作者用~3H-TdR掺入、染料排斥及干细胞集落形成三种方法,检测了人低分化鼻咽癌上皮细胞系(CNE-2Z)的生长能力对33种湛江沿海海洋生物的反应。发现一种检测比值低于40％的有6～15种,三种比值均降低的四种。这些海洋生物(特别是后者)可能有某种抑制瘤细胞生长的作用。     

人低分化鼻咽癌上皮细胞系生长能力检测

生长异常是肿瘤的本质特征,为了解鼻咽癌的生长变化,我们对人低分化鼻咽癌上皮细胞系(CNE-2Z)在体外的短期生长能力进行了检测。     

Lipofectin介导bcl-xL反义寡核苷酸对鼻咽癌CNE-2Z细胞的影响

目的：探讨阳离子脂质体Lipofectin对bcl-xL反义寡核苷酸进入CNE－2Z细胞的影响。方法：采用阳离子脂质体Lipofectin介导bcl-xL反义寡核苷酸转染CNE－2Z细胞，应用MTT法观察Lipofectin介导前后对CNE－2Z增殖的影响；RT－PCR检测处理前后bcl-xL mRNA表达水平。结果：Lipofectin介导bcl-xl反义核酸可提高反义核酸对细胞的增殖抑制率；Lipofectin介导bcl-xL反义核酸可增强反义核酸下调bcl-xL mRNA表达水平的能力。结论：Lipofectin可促进反义核酸转染进入细胞。     

尿激酶型纤溶酶原激活剂系统在鼻咽癌细胞系及其两个克隆株中的表达和意义

目的：研究尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)系统3种主要成分(uPA、uPAR、PAI—1)在一鼻咽癌细胞系(CEN—2Z)及其它的两个克隆株(CNE—2Z—H5、CNE—2Z—H5—9)中的作用。方法：应用逆转录聚合酶反应(RT—PCR)方法检测uPA系统各因子在基因转录水平的表达。结果：uPA，uPARmRNA在CNE—2Z—H5—9中表达最高，在CNE—2Z中表达最低；PAI—1mRNA在CNE—2Z—H5—9中无表达，在CNE—2Z，CNE—2Z—H5有表达，但差异无显若性。结论：uPA、uPAR可能促进鼻咽癌细胞侵袭、转移，PAI—1可能起抑制作用。     

EBV感染对人鼻咽癌细胞株形态参数和DNA含量的影响

目的：观察ＥＢＶ体外感染对不同分化不同分化状态鼻咽癌细胞株形态参数和ＤＮＡ含量的影响。方法：应用ＰＣＲ法检测ＥＢＶ基因、免疫组化和图像分析仪分别检测了ＥＢＶ和ＥＢＶ＋ＴＰＡ对ＣＮＥ－１和ＣＮＥ－２Ｚ细胞Ｃｋｐａｎ表达及形态参数和ＤＮＡ含量的影响。结果：（１）ＥＢＶ在体外可感染ＣＮＥ－１细胞；（２）ＥＢＶ感染ＣＮＥ－１细胞使其Ｃｋｐａｎ表达降低，胞面积籴小和核浆比升高及ＤＮＡ含量明显减少（Ｐ〈０．０     

纤维化肝窦内皮细胞中基因表达的研究

按照肝脏受 TAA损伤的程度把试验动物 Wistar大白鼠分为两组 ( TAA- 1和 TAA- 2 )。Northern杂交分析表明 ,在 TAA- 1的窦内皮细胞中 ,bcl- x和 bax基因的表达水平轻微降低 ;随着肝损伤的增加 ,表达水平再度下降。核 Run- off转录分析表明 ,两组的窦内皮细胞、总的 RNA合成率下降约 30 %( P<0 .0 0 1 ) ;TAA- 1、bad、bax和 cyclin E的 m RNA合成有所降低 ,而 cyclin A的 m RNA合成则明显增加 ;TAA- 2、bad、bax和 bcl- 2的 m RNA合成增加了 2～ 3倍 ,bcl- x的 m RNA合成增加了 7倍多     

蝙蝠葛碱和胡椒碱对两株鼻咽癌细胞增殖的影响

目的：观察蝙蝠葛碱和胡椒碱对两株鼻咽癌细胞增殖的影响。方法：用MTT法测定两种药物分别处理CNE－1、CNE－2Z两株细胞的IC5值随作用时间的延长而减少（P＜0．01），两种药物处理CNE－1细胞24、48h的IC50值均明显低于CNE－2Z细胞（P＜0．01），蝙蝠葛碱处理两株细胞72h的IC50值差异显著（P＜0．05）。结论：蝙蝠葛碱和胡椒碱对CNE－1、CNE－2Z细胞株的生长增殖呈时间依赖性抑制，对CNE－1细胞株的增殖抑制作用明显强于CNE－2Z细胞株。     

巴西菇多糖对肝癌细胞株凋亡的影响及其机制

目的：研究巴西菇多糖诱导人肝癌细胞株(SMMC—7721)凋亡的作用及机制。方法：采用电镜、DNA电泳、免疫组化法，对SMMC—772l株细胞凋亡以及凋亡抑制基因bcl—2的表达进行检测。结果：SMMC—772l株细胞经巴西菇多糖处理后出现核固缩、膜起泡、凋亡小体形成．琼脂糖凝胶电泳呈现出典型凋亡DNA梯状带．细胞内bcl—2表达较对照组低。结论：巴西菇多糖能诱导SMMC—772l株细胞发生典型凋亡．其抑制细胞内bcl—2的表达，是诱发肿瘤细胞凋亡的机制之一。     

鼻咽癌高淋巴道转移裸鼠移植瘤的细胞遗传学研究

研究鼻咽癌克隆株ＣＮＥ－２Ｚ－Ｈ５高淋巴道转移裸鼠移植瘤离体培养细胞的细胞遗传学改变并探讨这种改变与肿瘤生物学特性之间的关系。方法染色体Ｇ显带后按人类细胞遗传学国际命名体制进行核型分析。     

Regulation of expression of the interleukin-2 receptor on hematopoietic cells by interleukin-3

Remarkable similarities in the intracellular and genetic events occur when lymphoid and hematopoietic cells are exposed to their specific growth factors. The interleukin-2 (IL-2) receptor, whose cell-surface expression is an absolute requirement for the growth and differentiation of lymphoid cells, was detected on various nonlymphoid hematopoietic cell types in this study. Cell lines consisting either of granulocyte-macrophage precursors or mast cells, which are dependent on interleukin-3 (IL-3) for their growth, expressed high levels of the IL-2 receptor on their surface. Analysis of the binding characteristics of these receptors with 125I-labeled recombinant IL-2 revealed that only receptors with low affinity for IL-2 were present on these cells. Addition of purified recombinant IL-3 to these cell lines led to an increase in IL-2 receptor gene expression within 1 hour in isolated nuclei. This IL-3--induced increase in the number of IL-2 receptors on the cell surface is maximal within 24 hours. Addition of 10,000 units of IL-2 to these cells had no apparent effect on their growth or differentiation. The presence of the receptor with only low affinity for IL-2 on hematopoietic cells and the regulation by IL-3 suggest that this receptor is involved in some important metabolic event in hematopoiesis.