小儿肾脏疾病血清游离氨基酸分析

目的：为了探讨小儿肾脏疾病血清游离氨基酸的水平，以指导临床治疗。方法：疾病组３１例，其中肾病综合征２１例，急性肾炎１０例，健康对照组３１例。空腹抽静脉血１ｍＬ，离心取血清１００ｕｌ加无水乙醇３０００ｕｌ，旋涡混合器振荡３０秒，４０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，取上清液２０ｕｌ与８０ｕｌ邻苯二甲醛衍生物试剂反应１ｍｉｎ进行测定。本实验使用法国Ｇｉｓｏｎ公司高效液色相谱仪，反相Ｃ１８柱（２５０×４．６ｍｍ国产），检测器荧光激发波长范围３０５～３９５ｎｍ，发射波长４３０～４７０ｎｍ，流动相为不同浓度的甲醇／醋酸钠缓冲液梯度洗脱，分离１５种氨基酸４８ｍｉｎ．结果：发现肾脏疾病患儿血清中非必需氨基酸中的谷氨酸、组氨酸、酪氨酸及必需氨基酸中缬氨酸、异亮氨酸与健康对照组比较显著下降，谷氨酸（１３３．８±８５．７）ｕｍｏｌ／Ｌ（疾病组），（１８２．６±６１．８）ｕｍｏｌ／Ｌ（对照组）；组氨酸（６９．７±２４．４）ｕｍｏｌ／Ｌ（疾病组），（９１．３±１６．８）ｕｍｏｌ／Ｌ（对照组）；酪氨酸（６８．８±１５．１）ｕｍｏｌ／Ｌ（疾病组），（９４．２±１５．５）ｕｍｏｌ／Ｌ（对照组）；缬氨酸（２２４．１±５６．８）ｕｍｏｌ／Ｌ（疾     

生物化学精品课程的建设

精品课程是具有一流的教师队伍、一流的教学内容、一流的教学方法、一流的教材和一流的教学管理等特点的示范性课程。今年我室的生物化学课程申报了校级精品课程 ,经过评选 ,学院推荐申报省级精品课程。今年 8月获知我院生物化学课程被评为广东省精品课程 ,并被推荐申报国家级精品课程 ,本文就我们在申报精品课程的过程中有关精品课程建设的体会作一回顾。1　学院领导高度重视 ,各部门通力合作在申报的短短的 1个多月里 ,我院主管教学的领导和教务处进行工作部署 ,强调精品课程建设是高校教学质量与教改的重要组成部分 ,是一项系统工程 ,是…     

高效液相色谱法及紫外可见分光光度法测定侧柏叶中黄酮含量的比较

目的：通过对高效液相色谱法(HPLC)及紫外可见分光光度法测定例柏叶黄酮进行比较，寻找一种较准确、简单的测定侧柏叶黄酮的方法。方法：HPLC法：流动相由乙睛：0．01mol/L KH2PO4：乙酸(28：72：1．5，V／V)组成；流速1．0mL.min^-1；检测波长为260nm，以槲皮甙为参照品。紫外／可见分光光度法：以芦丁为参照品，410nm波长测定黄酮含量。结果：两种方法都有较好的精密度．但测定的结果有较大差异．紫外／可见分光光度法测得的结果比HPLC法高。结论：以槲皮甙为定量指标更能准确地反映侧柏叶的内在质量，HPLC法是一种较理想的测定方法。     

高效液相色谱法简易测定血清中氨甲喋呤

作者在高效液相色谱法测定血清氨甲喋啶(MTX)时,进行简化操作步骤,改进计算方法,创建了一种简     

广东汉人血管紧张素Ⅱ 1型受体基因A-C 1166多态性与原发性高血压、冠心病的关系

目的：了解血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)基因3’端非翻译区(3’—UTR)A—C 1166多态性在广东人群中的分布特点及其与该人群患原发性高血压(EH)和冠心病(CAD)的关系。方法：用PCR和限制性内切酶酶切技术分析了186例广东汉族大学生、68例EH患者和72例CAD患者AT。R基因A—C 1166多态性的基因型和等位基因频率。结果：该人群A—C1166基因多态性明显不同于白人，与中国北方汉人相似。健康组中没发现CC型纯合子，疾病组中仅1例EH患者和1例CAD的患者为CC基因型。C1166等位基因频率0．04，A 1166等位基因频率为0．96。疾病组与健康组之间差异无显著性。结论：AT1R基因A—C 1166多态性与广东汉族人患EH和CAD无关。     

厚朴酚对大鼠白细胞5-脂氧合酶活性和细胞内钙离子浓度的影响

目的：探讨厚朴酚对5—脂氧合酶活性的影响．以阐明其抗炎机理。方法：以大鼠胸腔白细胞为材料，分别用高效液相色谱法和荧光分光光谱法测定白三烯B4(LTB4)，5—羟二十碳四烯酸(5—HETE)的生成和细胞内钙离子水平。结果：厚朴酚对白细胞LTB4和5—HETE的生物合成有较强的抑制作用，其IC50值分别为8．5μmol/L和3．1μmol/L；厚朴酚还可以抑制趋化三肽(fMLP)刺激的白细胞内钙升高．但对静息状态的白细胞内钙离子水平没有明显的影响。结论：厚朴酚可以明显影响白细胞的功能，抑制炎性介质LTB4和5—HETE的生成，提示此功能与其抗炎作用机理有关。     

两步进样法克服高盐浓度对小分子物质分析的影响

建立一种有效克服样品中高盐浓度对毛细管区带电泳分析小分子物质影响并提高分析灵敏度的方法。方法：用两步压力增样，先进水后进样再分析，以柱效为标准优化进水及进样量。结果在盐浓度２００－６００ｍｍｏｌ／Ｌ时，优化的进水及进样量均为３７．９ｋＰａ．ｓ。     

原花青素对脂多糖诱导的RAW264．7细胞NF-kB DNA结合活性的抑制作用

目的：观察原花青素对脂多糖(LPS)诱导的RAW264．7细胞核转录因子-kB(nuclear factor KappaB，NF-kB)结合活性的影响。方法：LPS诱导RAW264．7细胞，加入不同质量体积浓度原花青素孵育1h，提取核蛋白，电泳迁移率变动分析检测NF-kB与DNA的结合活性。结果：LPS诱导小鼠巨噬细胞肿瘤细胞株RAW264．7后，其NF-kB的核结合活性明显增高。0．8、4和20mg／L的原花青素可明显降低LPS诱导下RAW264．7细胞的NF-kB活化。结论：原花青素对NF-kB活化的抑制作用可能是其抗炎的作用机理之一。     

原花青素对IL-1β诱导的A549细胞环氧合酶-2启动子活性的影响

以白介素-1β(IL-1β)诱导的人肺癌细胞A549为模型,探讨原花青素(PC)对环氧合酶-2(COX-2)启动子活性的影响.用含有完整和NF-κB结合位点突变的COX-2启动子的的荧光素酶表达载体 pGL 3质粒,转染A549细胞,加原花青素(20mg/L)培养,检测COX-2基因5'调控区相对转录活性;RT-PCR检测细胞COX-2 mRNA的表达.结果发现NF-κB结合位点突变的COX-2基因转录活性极大地降低,原花青素可以显著降低完整的COX-2启动子转录活性,降低A549细胞中COX-2 mRNA的表达.