阳离子A对内毒素损伤大鼠肝脏中HSP70表达的影响

[目的]运用免疫组织化学技术研究阳离子A（CA）对HSP70在内毒素（ET）损伤大鼠肝脏中表达的影响。[方法]48只SD大鼠随机分为2组：对照组和CA＋ET组,每组各24只。对照组大鼠分别经尾静脉注射ET 5 mg/kg（BW）,CA＋ET组尾静脉注射1 g/kg（BW）CA溶液,之后2 min内尾静脉注射ET 5 mg/kg BW。2组分别在3、4、8、12 h采集肝脏作为检测样本,应用HE染色和免疫组织化学染色技术进行检测。[结果]肝细胞病理变化在ET攻击后3和4 h时明显增多,4 h达到峰值,而在8和12 h时逐渐下降,CA＋ET保护组肝细胞的细胞病变较ET组同时间段有所减轻;2组HSP70的积分光密度在3、8、12 h差异极显著（P〈0.01）,4 h差异显著（P〈0.05）,且对照组HSP70积分光密度随时间的延长而下降,而CA＋ET组HSP70的积分光密度在3、4、8 h这3个时间点呈下降趋势,在12 h小幅度上升。[结论]CA能显著上调HSP70在肝脏的表达,从而对由ET诱导的肝损伤产生保护效应。     

柚皮素单硫酸酯钠盐对血栓形成和血小板聚集的影响

目的 观察柚皮素单硫酸酯钠盐(SNMS)对血栓形成和血小板聚集的影响.方法 将30只SD大鼠随机分为5组:SNMS1组、SNMS2组、血栓通组、肝素组和对照组,每组6只,麻醉大鼠,静脉注射药物后,用血栓生成仪观察大鼠颈动脉血栓形成情况;取兔血与药物孵育5min,凝血酶(500 U/L)作用1 min后,用全血血小板聚集...     

普洱茶对酒精性肝损伤组织病理动态变化的影响

为探讨普洱茶(熟茶)对酒精诱发的酒精性肝损伤大鼠肝组织结构的影响;将120只Wistar大鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组、KXL药物组、普洱茶(熟茶)(低、中、高)剂量组,每组20只。试验大鼠采用液体饲料饲喂,每天定时经口灌胃受试样品,普洱茶组给予不同剂量普洱熟茶,低、中、高剂量组灌胃剂量分别为0.5,1.0,2.0 g/kg,药物组灌胃KXL药品,灌胃剂量为0.15 g/kg,阴性对照组、阳性对照组每天均灌胃2 m L蒸馏水。每隔15 d,每组随机选取3只,做肝组织病理检测,试验观察期为60 d,结束后即牺牲试验大鼠并检测肝组织病理变化及大鼠肝组织谷草转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性。试验结果显示:与阳性对照组相比,普洱茶低、中、高剂量组与药物组均可显著降低肝组织ALT,AST活力(P0.01),通过试验大鼠标本和病理检测发现,普洱茶能改善由酒精引起的肝组织病变。通过试验可知普洱茶(熟茶)能够有效抑制酒精性肝损伤大鼠肝组织病变。     

Ghrelin重组质粒的表达及其对大鼠生长性能和胃重的影响

旨在研究Ghrelin重组表达质粒对大鼠生长性能和胃重的影响。从断奶仔猪胃底黏膜中扩增得到了Ghrelin,将其克隆到pcDNA3表达载体中,获得了重组质粒pcDNA3-Ghrelin。选取12只断乳大鼠随机分成2组,每组6只。试验组每只大鼠腿肌注射100μg重组质粒pcDNA3-Ghrelin,对照组注射空质粒。分别在注射后7 d、14 d和29 d称重、记录采食量。试验结束后处死,分离并称量胃重,测定胃液pH值。结果显示:与对照组相比,注射重组质粒大鼠在注射后7 d和29 d时日增重显著增高;采食量无显著差异;料肉比显著降低;胃重和相对质量无显著差异;胃液pH值显著降低。以上结果表明,Ghrelin通过肌肉组织转染表达后对大鼠的生长发育具有重要的调节作用。     

诊断超声照射对大鼠早孕胚胎组织细胞Caspase-3表达的影响

目的 了解诊断超声照射对大鼠早孕胚胎组织细胞Caspase-3表达的影响.方法 40只孕7dSD大鼠随机分为4组,用3.5 MHz超声持续照射腹部子宫体表投影区,分别照射0、10、20、30 min,超声照射后24 h取胚胎组织,用SP免疫组织化学检测Caspase-3蛋白表达.结果 超声照射20、30 mir组,Caspase-3表达明显高于对照组（P＜0.01）.结论 经腹诊断超声持续照射大鼠早孕胚胎超过20 min可使Caspase-3蛋白表达增高,从而可能导致早孕胚胎组织细胞凋亡.     

抗焦虫药青蒿琥酯纳米乳对大鼠的亚慢性毒性

为了给产品的安全性评价提供依据,研究青蒿琥酯纳米乳对大鼠的亚慢性毒性.将100只大鼠随机分成5组,每组20只,雌雄各半,分别经腹腔注射不同剂量的青蒿琥酯纳米乳,观察动物的生长发育情况,血液生理、生化指标以及主要脏器的组织学变化.结果表明,各给药剂量组对大鼠的一般状态、体重、血液生理指标、肝肾功能和重要脏器系数均未产生明显的毒性反应;病理学检查大鼠心、肝、脾、肺、肾、胸腺、肾上腺等器官也均未发现有明显的毒性损伤变化.     

疏血通注射液对大鼠心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡和P53的影响

目的观察疏血通注射液(SXT)对大鼠心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡的影响。方法将18只大鼠随机分为假手术组、模型组和疏血通组,每组6只。通过结扎大鼠左冠状动脉前降支制成心肌缺血模型,疏血通组再灌注时即刻通过股静脉注射药物SXT(0.7mL/kg)24h。TUNEL免疫荧光染色观察心肌细胞凋亡,Westernblot检测P53表达。结果模型组心肌细胞凋亡显著,而疏血通组心肌细胞凋亡显著减少(P<0.01)。模型组P53表达显著高于假手术组、疏血通组(P<0.01)。结论 SXT可通过下调大鼠心肌缺血再灌注后心肌凋亡蛋白P53表达,从而减少心肌细胞凋亡。     

高热量饲料结合慢性应激致大鼠非酒精性 脂肪肝病变过程的研究

为观察不同作用时间下非酒精性脂肪肝(NAFLD)相关因子的改变,研究高热量饲料结合慢性应激促进NAFLD病变的过程,将64只雄性大鼠分为正常对照组、高热量饲料(HFSD)组、慢性应激(EFNS)组及高热量饲料结合慢性应激(HFSD+EFNS)组。8周后,每组随机取8只动物,作为第1批实验动物;14周后,余下每组8只动物作为第2批实验动物,检测胰岛素抵抗、血液及肝组织脂质、氧化应激状态、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及基因表达,计算肝指数。另外,取肝脏做病理切片,比较各组肝组织病理改变程度。结果显示,8周后大鼠出现胰岛素抵抗、脂质紊乱、氧化应激、炎症状态及肝指数增加。2种刺激只对肝脂质代谢紊乱有交互作用。14周后,大鼠NAFLD进一步恶化,对脂质紊乱、肝脂质代谢、炎症、氧化应激状态均有协同作用,肝组织切片也显示出现脂肪性肝炎。高热量饲料结合慢性应激促进NAFLD有一个发展过程,14周后能够诱导大鼠非酒精性脂肪肝模型的形成。     

新疆昆仑雪菊水提液对大鼠血脂的影响

采用昆仑雪菊水提液灌胃大鼠,以探讨其对大鼠血脂水平的影响.将60只健康成年 SPF 级 SD 大鼠随机分为6组,每组10只.试验前及实验期第28天眼眶采血检测大鼠血清中血脂4项指标：血清胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）与低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）.试验结束时处死大鼠并采集大鼠脏器,制作肝组织切片观察雪菊水提液对各组大鼠的肝组织形态变化的影响.试验前各组大鼠的血脂4项、体重指标均无显著差异,使用昆仑雪菊水提液灌胃高脂造模大鼠后,高、中、低3个剂量组与高脂模型组比,TC 含量分别降低了39．0％（P ＜0．01）,30．5％（P ＜0．01）,32．6％（P ＜0．01）;LDL-C 指标分别降低了40．3％（P ＜0．01）,31．0％（P ＜0．05）,30．8％（P ＜0．05）;经过统计学分析与正常对照组相比：高脂模型组肝组织切片脂肪空泡明显增多（P ＜0．01）,昆仑雪菊干预三个剂量组与高脂模型组肝组织切片比较,脂肪空泡显著减少（P ＜0．05）.分析表明,昆仑雪菊水提液可以降低 SD 高脂大鼠模型血脂4项指标中的 TC、LDC-L 的值,且能显著减少 SD 大鼠肝脏的脂肪细胞的数量,说明其具有降血脂的功效.     

联苯双酯抗大鼠四氯化碳肝损伤的实验研究

目的:通过观察联苯双酯(DDB)对四氯化碳(CC l4)所致大鼠急性肝损伤的防治作用,结合文献复习,对DDB的临床应用价值进行再评价。方法:24只大鼠随机分为3组:正常对照组、肝损伤模型组(简称模型组)、DDB治疗组(简称DDB组),每组8只。模型组和DDB组分别用CC l4造成大鼠急性实验性肝损伤,DDB组加用DDB滴丸(5 m g.kg-1)灌胃,每天1次,共14 d,正常对照组和模型组大鼠每天用生理盐水(20 mL.k-g 1)灌胃。实验结束后,检测各组大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(A ST)的含量,并取肝脏做病理组织检查。结果:DDB组血清ALT、A ST水平较模型组明显降低(P<0.01)。DDB组大鼠肝组织切片中肝细胞脂肪变性、炎细胞浸润均较模型组明显减轻,且肝组织中无明显纤维增生。结论:DDB能显著降低CC l4所致急性肝损伤大鼠血清ALT、A ST水平,对CC l4所致大鼠的肝损伤具有显著的防治作用。     

eGFP标记狂犬病病毒G基因与EgM123基因重组融合蛋白的表达与鉴定

【目的】反向遗传学技术构建EgM123基因重组狂犬病SRV₉病毒疫苗株,研究狂犬病病毒G基因、细粒棘球绦虫EgM123基因、eGFP基因重组质粒在真核细胞中的蛋白表达效果与蛋白免疫原性,为通过反向遗传学拯救eGFP标记EgM123基因重组狂犬病病毒,制备狂犬病-包虫病二联基因重组疫苗提供研究基础。【方法】将已构建的携带eGFP增强型绿色荧光蛋白的狂犬病病毒G基因重组细粒棘球绦虫EgM123基因重组质粒(3033 bp)利用脂质体转染方法转染BHK-21细胞,使其在BHK-21细胞中表达出融合蛋白,并通过荧光显微镜观察、SDS-PAGE聚丙烯酰氨凝胶电泳、Western blotting试验鉴定融合蛋白的荧光蛋白表达、融合蛋白分子量,鉴定其免疫原性。【结果】在转然后48 h可见绿色荧光蛋白的表达;通过SDS-PAGE聚丙烯酰氨凝胶电泳结果显示,重组质粒在BHK-21细胞中表达获得分子量约为120KDa的融合蛋白;Western blotting结果显示,将蛋白凝胶转移PVDF膜分别经狂犬病病毒G蛋白单克隆抗体、EgM123多克隆抗体、GFP单克隆抗体分别孵育,均在120KDa处可见抗原抗体结合条带。【结论】eGFP标记的狂犬病病毒G基因重组细粒棘球绦虫EgM123基因重组质粒在真核细胞中成功表达出融合性蛋白,且具有免疫原性,     

乌司他丁对肝癌合并门静脉癌栓术后化疗患者肝功能和免疫功能的影响

目的观察乌司他丁对肝癌合并门静脉癌栓（HCPVTT）术后化疗患者肝功能和免疫功能的影响。方法 HCPVTT术后化疗患者54例随机分为2组：乌司他丁组（n=28）接受乌司他丁30万单位/d,连续7d;对照组（n=26）注入等量生理盐水。用药后第3、5、7天检测肝功能及NK细胞活性、CD4细胞、CD8细胞和CD4/CD8比值。结果用药后第3天和第7天,乌司他丁组的AST、ALT和TB水平显著低于对照组,而NK细胞活性、CD4细胞和CD4/CD8比值高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。术后2a无瘤生存率和累计生存率乌司他丁组明显高于对照组（P〈0.05）。结论乌司他丁可改善HCPVTT术后化疗患者的肝功能和免疫功能,提高患者的生存率。     

部分脾动脉栓塞对肝硬化伴食管静脉曲张的影响

目的探讨不同程度的部分脾动脉栓塞（PSE）对肝硬化伴食管静脉曲张的影响。方法 45例肝硬化伴食管静脉曲张患者随机分为A、B、C3组,分别按栓塞面积40%～60%、60%～80%、80%～100%进行PSE;手术前后B超测量门静脉（PV）及胃冠状静脉（GCV）管径及血流方向,胃镜评估食管胃底静脉曲张程度。结果除A组外,B、C组PSE后PV、GCV直径明显变小,C组最明显（P〈0.01或0.05）。B、C组食管胃底静脉曲张程度比A组明显减轻（P〈0.05）。发热持续时间、胸水、腹水等不良反应以C组最严重（P〈0.01）。结论 PSE对肝硬化伴食管静脉曲张具有明显疗效,栓塞程度以60%～80%为最佳。     

Foxp3表达对黑色素瘤B16细胞增殖的影响

目的通过检测Foxp3在黑色素瘤B16细胞中的表达及其对肿瘤细胞增殖的影响,探讨Foxp3在黑色素瘤细胞中表达的可能作用.方法采用RT-PCR和免疫组化法检测B16细胞中Foxp3在mRNA和蛋白水平的表达;采用VigoFect转染试剂将pcDNA3.1-Foxp3真核表达载体瞬时转染B16细胞,RT-PCR和流式细胞术方法分别检测转染前后Foxp3基因和蛋白的表达;MTT方法检测Foxp3高表达后对肿瘤细胞增殖的影响.结果 B16细胞在mRNA和蛋白水平均表达Foxp3;瞬时转染后Foxp3转染组中Foxp3的表达显著高于空载体组和B16组（P〈0.01）;Foxp3转染组细胞A490 nm值在48 h和72 h与空载体组和B16组相比显著降低,差异具有统计学意义（P〈0.05）.结论黑色素瘤B16细胞Foxp3的表达可抑制肿瘤细胞的增殖.     

水牛RNA聚合酶Ⅲ启动子的克隆与鉴定

[目的]获得有效的水牛RNA聚合酶Ⅲ启动子序列,为开展水牛源细胞的基因特异沉默研究奠定基础.[方法]通过启动子上、下游保守序列对水牛源启动子7SK、U6进行克隆和启动子关键顺式作用元件识别,利用一段针对EGFP的shRNA片段（shEGFP）对水牛7SK、U6启动子进行功能性分析,然后分别在水牛源及鼠源细胞中与pEGFP-N1共转染,转染48h后用荧光显微镜检测EGFP的表达情况,并用流式细胞仪和荧光实时定量PCR检测EGFP沉默表达情况.[结果]克隆获得水牛7SK、U6启动子序列分别为430和357 bp,其OCT-1（或CACCC盒）及TATA盒高度保守.连接shEGFP后与pEGFP-N1共转染细胞,通过荧光显微镜可观察到细胞发生了明显的荧光表达沉默现象;通过流式细胞分析,发现水牛7SK和U6启动子引导的shEGFP在水牛源细胞中沉默效率高达93.82％和87.45％;荧光实时定量PCR检测结果显示,在转染bu7SK-shEGFP和buU6-shEGFP的水牛源BFF细胞中,EGFP表达水平均显著低于其他物种启动子的细胞转染组（P＜0.05）,而在鼠源PT67细胞中,水牛启动子的启动效率与其他物种启动子差异不显著（P＞0.05）.[结论]水牛7SK和U6启动子可高效启动shRNA表达,且具有一定的物种特异性.     

松针提取物对黄羽肉鸡蛋品质的影响

为研究松针提取物对黄羽肉鸡蛋品质的影响,试验随机选取体况相近、健康的40周龄黄羽肉鸡1800只为试验动物,进行为期7周的饲养试验,其中预试期为1周。试验鸡群随机分为3组,每组两个重复。对照A组饲喂基础饲粮,试验B组和试验C组分别在基础饲粮中添加松针提取物300和500 mg·kg-1,连续饲喂6周。结果表明,在试验结束后,试验B组和试验C组的蛋黄比率、哈氏单位、蛋比重显著高于对照A组(P0.05),且能够在一定程度上改善蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋形指数、血肉斑率、蛋黄颜色,但差异不显著(P0.05)。说明饲粮中添加松针提取物能够提高黄羽肉鸡的蛋品质。     

硒对氧化应激小白鼠肝脏酶活的影响

为研究硒对氧化应激小白鼠肝脏酶活的影响,选取45日龄36只健康昆明品系雄性小白鼠,按体重相近的原则随机分为3组:1组为对照组(硒的水平0.3mg·kg-1 W,腹腔注射10mg·kg-1 W的生理盐水);2组为低硒应激组(硒的水平0.3mg·kg-1 W,腹腔注射D-半乳糖150mg·kg-1 W);3组高硒应激组(硒的水平0.6mg·kg-1 W,腹腔注射D-半乳糖150mg·kg-1 W)。试验结束后,屠宰所有试验小白鼠,摘除眼球采血,分离出肝脏,测定MDA、T-AOC、GSH-PX、LDH、ALT、ASTD的活性。结果表明:与对照组相比,低硒应激组GSH-PX活性、T-AOC水平极显著降低,MDA浓度极显著升高;高硒应激组GSH-PX、T-AOC含量差异不显著。低硒应激组与高硒组之间ALT和ALP活性差异显著。与对照组相比,低硒组ALT活性显著,ALP活性极显著增高,高硒应激组LDH、ALT和ALP活性差异不显著,低硒应激组和高硒应激组之间差异显著。0.6mg·kg-1 W硒对D-半乳糖诱导的肝脏损伤有明显的保护作用,这种保护作用可能与硒提高抗氧化酶活性、增强机体的抗氧化防御能力有关。     

4种教槽料对断奶仔猪生长性能、腹泻率和皮毛指数的影响

试验选取160头体重相近的健康断奶仔猪,随机分4个处理,每个处理4个重复,每个重复10头。分别饲喂A料、B料、C料和D料,研究4种教槽料对断奶仔猪生长性能、腹泻率和皮毛指数的影响。其中A料和D料为粉料且含有血浆蛋白粉;B料和C料配方相同,均无血浆蛋白粉,只存在B料为粉料、C料为颗粒料的区别。结果表明：断奶后10d内A料组仔猪采食量和日增重均显著高于B料和C料组（P〈0.05）,与D料组差异不显著（P〉0.05）;B料和C料组采食量、日增重均差异显著（P〈0.05）。A料组仔猪料肉比与B料和c料组差异均显著（P〈0.05）,与D料相比,其料肉比降低4.76％。对于腹泻率和腹泻指数,A料和D料间差异不显著（P〉0.05）,但在B料和C料组间差异显著（P〈0.05）。除C料组皮毛指数与各组存在显著差异外（P〈0.05）,各组间均差异不显著（P〉0.05）。以上结果表明,粉料A和D生产效果相当,但均显著好于B料、C料。     

紫丁香叶对史氏鲟生长及血浆生化指标的影响

以史氏鲟Acipenser schrenckii为试验对象,在基础日粮中添加不同水平的紫丁香叶粉,研究紫丁香叶对史氏鲟生长性能和免疫指标的影响。试验共分9组（对照组、A～H组）,A～H组试验饲料中紫丁香叶粉的质量分数分别为1％、2％、3％、4％、5％、6％、8％、10％,对照组饲料中不添加。饲养试验共进行56d。结果表明：与对照组相比,A组、B组史氏鲟的增重率、特定生长率和饵料系数无显著差异（P〉0．05）;与对照组相比,除C组和F组外,其它各试验组鱼血浆中总蛋白和球蛋白含量均显著（P〈0．05）或极显著下降（P〈0．01）;H组鱼血浆中自蛋白显著下降（P〈0．05）,谷丙转氨酶（ALT）显著升高（P〈0．05）,谷草转氨酶（AST）差异不显著（P〉0．05）;各试验组鱼血浆中C3、C4含量均比对照组有所降低,除C组和F组外,其余各组鱼血浆中C3、C4的含量均显著下降（P〈0．05）。这说明,饲料中不同水平的紫丁香叶粉对史氏鲟生长和免疫具有不同程度的抑制作用。     

睾丸和卵巢打点注射pIRES2-EGFP质粒生产转基因兔的研究(英文)

为探讨直接用注射器对睾丸和卵巢打点注射pIRES2-EGFP质粒转染兔的精子细胞和卵母细胞,建立操作方便、效率高、成本低、可批量生产转基因兔的可行性。选择5只成年新西兰雄兔、29只经产新西兰雌兔,每侧睾丸和卵巢内分别打点注射0.5~0.8 mg/mL质粒0.25 mL。①第3周随机取一只雄兔睾丸做冰冻切片,于荧光显微镜下观察转染情况。②(Ⅰ:1#♂×7♀、Ⅱ:2#♂×7♀、Ⅲ:3#♂×7♀、Ⅳ:4#♂×7♀)其它雄兔于第6周和第7周与3日前做过卵巢注射并超排处理的雌兔配种,最后采集新生仔兔耳组织,提取基因组DNA,经PCR和Southern杂交检测阳性率。结果显示雄兔睾丸冰冻切片于荧光显微镜下可见绿色荧光,统计所得后代转基因阳性率,并进行差异分析,其中Ⅰ组后代阳性率最高,PCR和Southern杂交检测阳性率为93.55%和83.87%,Ⅳ后代阳性率最低,依次为80.65%和70.97%,但是各组之间差异不显著。上述实验结果表明,对睾丸和卵巢同时注射外源基因可获得较高阳性率的转基因后代,生产转基因的方法操作简便、高效,为日后大规模制备一些大型家畜的转基因后代奠定了基础。