内毒素对肝脏Caspase-3蛋白表达的影响及阳离子A的保护效应

为研究内毒素(ET)致大鼠肝细胞凋亡变化、对肝脏Caspase-3蛋白表达的影响及阳离子A(CA)的保护效应.将试验动物随机分为3组:对照组(Ⅰ组)、ET组(Ⅱ组)和CA保护组(Ⅲ组).3组动物经相应处理后分别在3、4、8、12 h采集肝脏检测肝细胞凋亡情况和Caspase-3蛋白的表达情况.结果表明,肝细胞凋亡与Caspase-3蛋白的表达成正相关的关系.ET可上调Caspase-3蛋白在肝脏的表达,诱导肝细胞凋亡,最终导致肝脏受损;而CA则能明显下调Caspase-3在肝脏的表达,抑制肝细胞凋亡,对由ET诱导的肝损伤具有显著的保护效应.     

内毒素诱导的细胞凋亡和阳离子A的保护效应

为揭示内毒素（ET）诱导体内细胞凋亡的现象和阳离子A（CA）的保护效应,从家兔耳缘静脉注射400U／kgET建立内毒素休克模型,并设对照组和cA保护组,在第3、4、8和12h分别收集外周血淋巴细胞（PBL）和肝细胞,电子显微镜观察PBL发生凋亡的形态学特征;运用缺口末端标记技术（TUNEL）观察肝细胞凋亡的形态学变化并计算肝细胞凋亡指数;采用流式细胞术（FCM）检测肝细胞的凋亡率。结果显示,PBL发生凋亡的超微结构特征表现为核染色质浓缩呈“新月体”状、“八字形”状或“花瓣”状等,在休克晚期出现凋亡小体;与对照组相比,TUNEL法检测到的肝细胞凋亡指数先上升到70％,然后下降到59％,后又上升到最高值86％,肝细胞及肝脏组织的损害程度也与此类似;FCM检测到肝细胞的凋亡率随着注射ET后时间的延长而增加（从10％增加到20％）。CA保护组中PBL的细胞病变较轻微、肝细胞的凋亡指数和肝细胞的凋亡率均出现不同程度的降低（P〈0．01,P〈0．05）。试验提示,ET能够诱导PBL和肝细胞的凋亡及功能损害,导致了内毒素性休克;而cA可有效地中和血循环中的ET,减少PBL和肝细胞的凋亡,对内毒素休克有一定的保护作用。     

降钙素基因相关肽预适应心肌保护作用的实验研究

目的：观察降钙素基因相关肽（CGRP）预适应在整体大鼠心肌缺血／再灌注损伤中的作用并探讨CGRP能否诱导延迟性预适应效应。方法：50只SD大鼠随机平均分为5组。所有动物均接受1h缺血／2h再灌注处理。A组于术前24h及术前分别静脉注射CGRP10μg／kg；B组于术前静脉注射CGRP10μg／kg；C组于术前24h静脉注射CGRP10μg／kg；D组于术前24h及术前分别静脉注射相同体积的生理盐水；E组无预处理。用硝基四唑氮篮（TTC）染色判定梗死大小。并以坏死区占危险区的重量百分比表示；取血清测心肌酶学改变，用免疫组化方法检测心肌热休克蛋白70（HSP70）的表达。结果：A组、B组、C组较D组、E组心梗面积明显缩小（P〈0．01），心肌酶CK、LDH明显降低（P〈0．01）。A组心肌HSP70表达升高，C组心肌HSP70表达显著升高。B组、D组和E组心肌HSP70基本无表达。A组与B组、C组，D组与E组在心梗面积、心肌酶学的改变方面无明显差异（P〉0．05）。结论：CGRP预适应在整体大鼠能诱导早期及延迟性效应。缩小心梗面积，减少心肌酶漏出，对大鼠心肌缺血／再灌注损伤起保护作用；CGRP预适应在第一窗口期与第二窗口期的心肌保护作用无明显叠加。     

运输应激猪肝脏中热应激蛋白的定位与表达

利用免疫组织化学定位方法和Western blot技术，对长途运输试验猪肝脏中5种不同分子量的热应激蛋白HSP70、HSP72、HSP86、HSP90和HSP27进行定位和表达。所有长途运输后应激猪和对照猪肝脏组织中均同时检测到了上述5种HSP。肝细胞胞浆和胞核均显示阳性信号，但HSPs在肝细胞中的定位有差异，大多数HSP70、HSP72和HSP27主要分布于肝细胞胞浆内，而HSP90和HSP86阳性颗粒在核内的分布比其在胞浆中的分布更为明显。肝小叶周边区有明显颗粒变性和脂肪变性的肝细胞中HSPs的阳性染色信号较弱。6h的长途运输应激后，与对照组相比，HSPs在肝脏组织中的表达量存在差异，表现为HSP70家族的HSP70和HSP72的表达没有明显的升高（P＞0．05），HSP90家族的HSP90的表达出现极显著的增加（P＜0．01），然而，HSP90家族的HSP86和小分子量家族的HSP27的表达量呈现明显的下降（P＜0．05）。     

环孢菌素A和苯磺酸氨氯地平对慢性缺氧致大鼠右心室肥厚的作用

目的探讨环孢菌素A（Cs A）和苯磺酸氨氯地平片（Norvasc）对大鼠慢性缺氧所致右心室肥厚的作用。方法48只SD大鼠随机分为慢性缺氧组、Cs A处理组、Norvasc处理组及正常对照组。慢性缺氧组、Cs A处理组、Norvasc处理组大鼠均置于缺氧仓内连续缺氧21 d,缺氧第1天始每天分别用生理盐水和Cs A10 mg/（kg·d）腹腔注射、Norvasc 30 mg/2＋（kg·d）灌胃,共21 d。检测右心室（RV）、左心室（LV）、室间隔（S）和体质量（BW）、Ca N和[Ca]i活性、以及Cn A、-MHC表达水平。结果慢性缺氧组RV/（LV＋S）、RV/BW比值、-MHC表达高于Cs A和Norvasc处理组、正常对照组（P〈0.01）;2＋Norvasc处理组[Ca]i、Ca N活性低于慢性缺氧组（P〈0.01）,而Cs A处理组仅有Ca N活性低于慢性缺氧组（P〈0.01）。结论2＋Cs A和Norvasc可能通过抑制[Ca]i、Ca N活性来防止慢性缺氧致大鼠右心室肥厚。     

高氟低碘对老年大鼠肝脏细胞DNA损伤的影响

[目的]研究高氟低碘对大鼠肝脏细胞DNA损伤的影响。[方法]离乳Wistar大鼠21只,随机分为4组：①CK（5只）,饲喂大鼠标准饲料,饮自来水;②高氟组（5只）,饲喂大鼠正常饲料,饮100mg/L氟化钠（NaF）去离子水;③低碘组（5只）,饲喂低碘饲料（定做）,饮去离子水;④高氟低碘组（6只）,饲喂低碘饲料,饮100mg/L氟化钠（NaF）去离子水。在大鼠20月龄时,处死取肝脏组织,检查其DNA的损伤情况。[结果]与①CK相比,②、③和④的老年大鼠肝细胞拖尾率显著增高（P〈0.01）;②、③和④的老年大鼠肝细胞的拖尾长度亦显著增长（P〈0.01）;肝细胞DNA损伤分级结果显示,②（高氟组）老年大鼠肝细胞DNA损伤主要是Ⅱ级、Ⅲ级。③（低碘组）肝细胞DNA几乎全部损伤,主要是Ⅲ级损伤。④（高氟低碘组）的细胞损伤以Ⅲ级损伤为主。[结论]高氟、低碘、高氟低碘都影响了大鼠肝脏细胞DNA的损伤。     

白藜芦醇对动脉粥样硬化大鼠核转录因子NF-кB的影响

[目的]研究白藜芦醇（Res）对动脉粥样硬化（AS）大鼠血脂水平和NF-κB的影响,探讨抗AS的部分机制。[方法]制成AS大鼠模型后,设4个组：①模型对照组（高脂饲料）;②低剂量给药组[高脂饲料＋Res30mg/（kg·d）];③中剂量给药组[高脂饲料＋Res60mg/（kg·d）];④高剂量给药组[高脂饲料＋Res120mg/（kg·d）],连续灌胃给药5周后,测定各组血脂和血管壁组织NF-кB阳性细胞表达率。[结果]各给药组TG、TC和LDL-C均较对照组有不同程度的降低,HDL-C较对照组有所升高;免疫组化和蛋白印迹分析均显示各给药组NF-кB阳性细胞表达率明显低于对照组。[结论]白藜芦醇可调节AS大鼠血脂,降低AS大鼠主动脉壁NF-κB的表达,从而抑制AS的形成。     

降钙素基因相关肽预适应心肌保护作用的实验研究

目的观察降钙素基因相关肽(CGRP)预适应在整体大鼠心肌缺血/再灌注损伤中的作用并探讨CGRP能否诱导延迟性预适应效应。方法50只SD大鼠随机平均分为5组。所有动物均接受1h缺血/2h再灌注处理,A组于术前24h及术前分别静脉注射CGRP10μg/kg;B组于术前静脉注射CGRP10μg/kg;C组于术前24h静脉注射CGRP10μg/kg;D组于术前24h及术前分别静脉注射相同体积的生理盐水;E组无预处理。用硝基四唑氮篮(TTC)染色判定梗死大小,并以坏死区占危险区的重量百分比表示;取血清测心肌酶学改变,用免疫组化方法检测心肌热休克蛋白70(HSP70)的表达。结果A组、B组、C组较D组、E组心梗面积明显缩小(P<0.01),心肌酶CK、LDH明显降低(P<0.01),A组心肌HSP70表达升高,C组心肌HSP70表达显著升高,B组、D组和E组心肌HSP70基本无表达,A组与B组、C组,D组与E组在心梗面积、心肌酶学的改变方面无明显差异(P>0.05)。结论CGRP预适应在整体大鼠能诱导早期及延迟性效应,缩小心梗面积,减少心肌酶漏出,对大鼠心肌缺血/再灌注损伤起保护作用;CGRP预适应在第一窗口期与第二窗口期的心肌保护作用无明显叠加。     

Penac-T对大鼠生长和免疫器官及肝脏丙二醛含量的影响

[目的]探讨Penac-T对于大鼠生长和免疫器官及肝脏羟自由基生成的影响。[方法]以8~9周龄大鼠为研究对象,分别用1500、300和60 mg/kg Penac-T给大鼠灌胃,以3 ml/kg蒸馏水灌胃为对照,处理15 d后剖检大鼠并测定大鼠的胸腺指数、脾指数和肝脏中丙二醛（MDA）的含量。[结果]试验期间大鼠发育正常,精神状态良好,活动正常,采食及饮水情况良好,无特异性疾病症状。3个试验组大鼠的增重量都比对照组明显提高。胸腺指数中剂量组和低剂量组比对照组升高,脾指数低剂量组比对照组增加。3个剂量的Penac-T对肝组织中MDA的生成都有较大抑制作用。[结论]Penac-T对大鼠的免疫器官有一定的影响。     

冷刺激不同时间仔猪3种组织HSP70表达的Western blot检测分析

采用50日龄的雄性"军牧一号"仔猪进行冷刺激试验,分别在冷刺激0、0.5、3、6、12、24h与应激恢复0.5、3、6、12、24、48h共12个时间点采取仔猪肝脏、脾脏和股二头肌样品。利用Western blot检测冷刺激(-7±2℃)不同时间仔猪肝脏、脾脏与股二头肌HSP70的表达量,探讨冷刺激对机体3种主要器官内HSP70表达量的影响。结果显示仔猪肝脏、脾脏和股二头肌中HSP70的表达量都以不同程度的升高,而后呈现先下降再升高的变化趋势。结果提示肝脏、脾脏和股二头肌3种组织尤以肝脏HSP70表达量变化明显,提示冷应激反应中代谢最旺盛的器官肝脏中物质代谢可能与HSP70的表达量有关。     

壳寡糖对试验性糖尿病大鼠餐后血糖及肝肌糖原含量的影响

[目的]研究不同剂量的壳寡糖对链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠餐后2h血糖及肝、肌糖原水平的影响。[方法]按65mg／kg体重一次性腹腔内注射（ip）STZ制备糖尿病大鼠模型,随机分成糖尿病治疗组和糖尿病对照组。治疗组分别按每日250、500、1500mg／kg灌胃壳寡糖水溶液,正常对照组、阴性对照组按体重灌胃等体积蒸馏水（10ml／k）,阳性对照组按每日200mg／k灌胃二甲双胍水溶液,连续60d,每10d测1次餐后2h血糖值。60d后对肝脏等脏器称重,计算器官系数。蒽酮试剂法测定肝、肌糖原含量。肝脏、骨骼肌PAS染色,做病理组织学检查。[结果]不同剂量的壳寡糖均能不同程度改善糖尿病大鼠的体重减轻、多饮、多食等症状,降低餐后2h血糖值。中、高剂量组的降糖效果优于低剂量组。PAS染色显示,壳寡糖各组肝索排列整齐,脂变程度低,骨骼肌和肝组织糖原比模型组明显增多。[结论]壳寡糖可以减少肝、肌糖原分解,减轻肝脏、肌肉组织的胰岛素抵抗,使血糖浓度下降。     

人参三七提取物抗疲劳作用的研究

[目的]研究人参三七提取物缓解体力疲劳的作用,为进一步开发利用人参三七提供试验依据。[方法]将小鼠分为4批,每批48只,随机分为4组,分别为对照组和50、100、300 mg/kg 3个给药组,各组小鼠经口灌胃给药30 d后,分别测定其负重游泳时间及血清尿素氮、血乳酸、肝糖原含量。[结果]100和300 mg/kg剂量组人参三七提取物小鼠负重游泳时间显著长于对照组（P〈0.01）,血清中尿素氮含量显著低于对照组（P〈0.01;P〈0.05）,小鼠肝糖原水平明显高于对照组（P〈0.01;P〈0.05）;小鼠游泳后血乳酸含量显著低于对照组（P〈0.01;P〈0.05）。[结论]人参三七提取物具有缓解体力疲劳的作用。     

除草剂烟嘧磺隆对大鼠的肝脏毒性初步研究

[目的]探讨除草剂烟嘧磺隆对大鼠的肝脏毒性。[方法]选用SD大鼠120只,随机分成4组,每组设2个平行组(各15只),分别按600、120、50、0 mg/kg,设置高、中、低剂量3个处理组和1个对照组,药物配成乳浊液灌胃。染毒期间每周测定各组小鼠的体重变化情况。染毒结束后,计算脏器系数,测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及碱性磷酸酶(ALP)活力,并检测血清和肝组织MDA含量及肝组织病理变化。[结果]各试验组与对照组相比,小鼠体重、脏器系数、各项肝功指标均无显著差异,高剂量组肝脏有轻微病变。[结论]烟嘧磺隆对大鼠肝脏毒性呈剂量依赖性。对其他脏器的毒性及其慢性毒性作用有待作进一步研究。     

冬虫夏草水提取物与速溶芦笋粉抗焦虑活性研究

[目的]研究冬虫夏草水提取物与速溶芦笋粉的抗焦虑作用.[方法]取健康雄性SD大鼠70只,按体重随机分为7组,模型对照组,冬虫夏草低剂量组（8.4 mg/kg WECS-1）,冬虫夏草高剂量组（16.8 mg/kg WECS-h）,冬虫夏草水提取物低剂量＋速溶芦笋粉（8.4mg/kg WECS-1 ＋400 mg/kg IAP）,冬虫夏草高剂量＋速溶芦笋粉（16.8 mg/kg WECS-h ＋400 mg/kg IAP）,速溶芦笋粉（400 mg/kgIAP）,空白对照组.采用慢性情绪应激模型,从行为学观察和内分泌水平角度研究速溶芦笋粉的抗焦虑作用.[结果]行为学观察表明,与模型对照组比较,在此焦虑模型上WECS-h ＋IAP剂量组的攻击行为显著降低（P＜0.05）,WECS-1＋ IAP剂量组的探究行为和修饰行为显著降低（P＜0.05）,其他各个处理组与模型对照组比较统计结果均没有显著的差异（P＞0.05）.内分泌水平检测结果表明,与模型对照组比较,在此焦虑模型上冬虫夏草水提取物与速溶芦笋粉（WECS-h ＋IAP）剂量组能显著降低血清种皮质醇（CORT）、肾上腺素（E）和去甲肾上腺素（NA）浓度（P＜0.05）,并能显著升高血清中5-羟色氨酸（5-HT）和多巴胺（DA）水平（P＜0.05）.[结论]冬虫夏草水提取物与速溶芦笋粉联用具有增强抗焦虑作用.     

百草枯中毒对大鼠的肺损伤作用研究

[目的]观察一次性灌胃染毒百草枯对大鼠肺组织的损伤情况。[方法]将20只大鼠随机分为对照组和百草枯组,百草枯组一次性染毒百草枯50 mg/kg体重,对照组用生理盐水代替,观察大鼠一般情况变化,染毒前后对大鼠进行跑步机训练,比较2组大鼠灌胃前以及灌胃后第5、10、15天跑步机上掉落次数。于染毒后第15天麻醉处死大鼠,收集肺组织,碱水解法测定肺组织羟脯氨酸含量,HE染色观察大鼠肺组织病理学变化。[结果]百草枯组大鼠灌胃后一般状况差,百草枯组平均进食量较对照组显著降低。灌胃前大鼠跑步时掉落次数2组间并无显著差异,但灌胃后百草枯组掉落次数较对照组增加。百草枯组大鼠肺组织羟脯氨酸含量极显著较对照组高,病理切片显示染毒组肺组织肺泡腔塌陷,肺泡间隔明显增宽,间质呈纤维性增厚。[结论]百草枯一次性染毒导致大鼠肺组织纤维化。     

低聚木糖对断奶仔猪生产性能·腹泻率·抗氧化性能的影响

[目的]研究不同剂量的低聚木糖对断奶仔猪生长性能、腹泻率以及血清和肝脏抗氧化性能的影响。[方法]选用72头35日龄、初重(10.14±0.15)kg的杜长大三元杂交仔猪分成4组各组日粮分别为基础日粮(对照组)、基础日粮+100 mg/kg低聚木糖(试验Ⅰ组)、200 mg/kg(试验Ⅱ组)和400 mg/kg(试验Ⅲ组),研究不同剂量低聚木糖对断奶仔猪生长性能、腹泻率以及血清和肝脏抗氧化性能的影响。[结果]与对照组相比,日粮中添加200和400 mg/kg低聚木糖能显著降低断奶仔猪的料重比(P0.05)。添加低聚木糖能够显著降低仔猪的腹泻率(P0.05)。添加低聚木糖还能够显著提高仔猪血清总抗氧化能力(T-AOC)、肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活力(P0.05),显著降低血清和肝脏中丙二醛(MDA)含量(P0.05),以200 mg/kg低聚木糖的效果最佳。[结论]该研究可为低木糖在畜禽生产中的应用提供试验依据。     

恩拉霉素对大鼠的慢性毒性试验

[目的]评估恩拉霉素对大鼠的慢性毒性作用,为其科学合理使用提供依据.[方法]选用240只SPF级Wistar大鼠为试验动物进行恩拉霉素的慢性毒性试验,根据其半数致死剂量(LD50)分别设高剂量组(1000 mg/kg)、中剂量组(200 mg/kg)、低剂量组(10 mg/kg)及空白对照组,按高、中、低剂量分别将恩拉霉素添加至大鼠饲料中加工成定制饲料,每天饲喂1次,连续饲喂6个月,通过临床观察、血液学分析、血清生化检测、脏器系数和病理学检查等评估恩拉霉素对大鼠的慢性毒性作用.[结果]在整个试验周期(6个月)内,各恩拉霉素剂量组的大鼠饮食饮水、大小便均正常,精神状况良好,被毛光泽,未出现死亡.与对照组相比,各恩拉霉素剂量组大鼠体重均无显著变化(P>0.05,下同);随着药物剂量的增加及给药时间的延长,恩拉霉素仅对大鼠中性粒细胞数有一定影响,对碱性磷酸酶、谷草转氨酶及白蛋白等血清生化指标有轻微影响.在脏器系数方面,连续给药6个月后,仅高剂量组大鼠肝脏和脾脏的脏器系数较对照组显著降低(P<0.05),其他的脏器系数均无显著变化.随着药物剂量的增加及给药时间的延长,恩拉霉素对大鼠的肝脏、肺脏、肾脏和心脏等器官组织会产生轻微影响,主要表现为:高剂量组大鼠肝脏组织中央静脉周围的细胞呈轻微肿胀;肺脏组织有一定程度的淤血,肺间质轻微增宽;肾脏组织轻微充血,且肾小管上皮细胞轻微肿胀;心肌纤维轻度萎缩,心肌间质增宽.[结论]恩拉霉素的毒性极低,随着药物剂量的增加及给药时间的延长,其对大鼠的慢性毒性作用非常轻微,即恩拉霉素的临床用药安全性极高.     

地参多糖对D-半乳糖所致衰老小鼠的抗氧化作用研究

[目的]研究地参多糖(LLP)对D-半乳糖所致衰老小鼠的抗氧化作用。[方法]取昆明种小白鼠50只,随机分为5组。除正常对照组外,其余各组每天于颈背皮下注射D-半乳糖80 mg/kg,连续42 d,造成亚急性衰老模型。在注射D-半乳糖的同时,试验组每天分别灌胃给予地参多糖(LLP)300、200和100 mg/kg,正常对照组及模型对照组给予等量生理盐水。末次给药12 h后,分离血清及肝组织,分别测定各组小鼠衰老相关生化指标。[结果]LLP能拮抗D-半乳糖所致的小鼠衰老,使小鼠血清及肝组织SOD和GSH-Px活性明显回升,MDA的水平下降。[结论]LLP具有一定的抗氧化和抗衰老作用。     

龙眼多糖对大鼠游泳运动能力的影响

[目的]观察龙眼多糖对大鼠游泳运动能力的影响。[方法]80只雄性Wistar大鼠随机分为4组:对照组和龙眼多糖低、中、高剂量组(50、100、200mg/kg),连续给药7d后,每组取10只进行负重游泳试验,观察龙眼多糖对大鼠力竭游泳时间的影响;剩余大鼠负重游泳90min后观察血清尿素氮(BUN)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸、组织肝糖原和肌糖原的变化。[结果]大鼠给药7d后,与对照组相比,龙眼多糖能显著延长大鼠负重游泳时间,提高血清中超氧化物歧化酶水平,降低MDA的含量,降低运动后血清BUN和乳酸水平,同时显著增加大鼠肝糖原和肌糖原含量。[结论]龙眼多糖可能通过改善组织糖原储备及抗氧化作用提高大鼠游泳运动能力。