黄帝陵古侧柏花粉生活力及其保存方法的研究

以黄帝陵千年古侧柏花粉为试验材料,用离体萌发法测定花粉的生活力,研究不同保存方法对花粉萌发率的影响,探讨花粉含水量、投入方式、化冻方式对超低温保存效果的影响。结果表明:古侧柏花粉在9%蔗糖+0.01%硼酸的培养基中离体培养4 d萌发率最高。90 d内,随着保存时间的延长,室温（20℃）保存的花粉迅速失活,低温（0℃、-20℃）保存的花粉萌发率呈逐渐下降趋势,超低温（-196℃）保存的花粉萌发率最高且保持效果最好,为古侧柏花粉长期保存的适宜方法。在超低温保存中,花粉以未经干燥、直接投入液氮、37℃恒温水浴化冻5 min保存效果最好;花粉含水量、投入方式、化冻方式之间交互效应显著。     

密花石斛花粉的保存方法研究

研究了密花石斛花粉不同保存方法下的花粉寿命,并对密花石斛花粉的超低温保存技术程序进行了研究。 结果表明:1)密花石斛花粉采用室温（(27±2)℃）、冷藏（4℃）、冷冻（-20℃）保存,花粉寿命分别为5、23、17 d,超低温保存(-196℃)的花粉120 d后仍可检测到花粉萌发,且萌发率与新鲜花粉相同,超低温保存方法至少可以保存密花石斛花粉4个月;2)密花石斛花粉超低温保存的程序为新鲜花粉（含水量43.26%）直接投入液氮（LN）保存,需用时采用室温、自来水或水浴化冻即可。      

红枫湖樱桃花粉超低温保存探究

探讨了红枫湖樱桃花粉的长期保存条件。结果显示,室温下干燥3 h的花粉-196℃保存萌芽率最高(85.71%),随后急剧下降,12 h时仅54.65%。而-196、-80、-20℃下保存时,4℃下干燥时间延长并未导致萌发率急剧下降,均在85%左右。-80℃及-20℃保存过程中将花粉取出进行干燥会引起萌发率急剧下降,-20℃下每周干燥6 h,4周后萌发率仅52.06%。活力检测采用离体萌发法和授粉法,-80℃及-20℃保存1年后的花粉授粉坐果率与新鲜花粉无显著差异。     

贵州主栽樱桃品种的花粉量及其低温保存效果

【目的】为比较贵州主栽樱桃品种花粉量及其花粉的保存方法,以期为杂交育种和授粉树的选择提供参考。【方法】以贵州主栽的2个中国樱桃及4个甜樱桃品种为材料,用纤维素酶解法测定其花粉量,花粉离体培养法测定比较了不同发育时期、干燥时间、保存温度及预冻解冻方式对花粉萌发率的影响。【结果】中国樱桃单花花粉量显著低于甜樱桃,且中国樱桃大花蕾期的花粉活力最高,随着保存时间的延长,花粉萌发率逐渐降低。采后1周内未经干燥的花粉,在4℃保存效果最佳,萌发率达50.98%,而-196℃保存花粉萌发率最低(27.11%),其原因可能是花粉含水量较高导致水分结晶而引起花粉结构破坏;长期保存以25℃干燥30 min后,保存在-196℃下效果最佳,保存16周后萌发率仍达11.14%;未经干燥的花粉,在-80℃保存后室温解冻30min效果最佳,萌发率达17.01%。【结论】人工授粉时应采集大花蕾期花粉,如需在采后1周内授粉,可将花粉保存于4℃;长期保存则应经25℃干燥30 min后保存于-196℃,室温解冻30 min,可达最佳效果。     

榆叶梅和海棠花粉萌发率的测定及超低温保存方法

研究了榆叶梅和海棠花粉萌发所需的最佳蔗糖浓度和温度;分析了不同贮藏方法和不同解冻温度对花粉萌发率的影响。结果表明：榆叶梅和海棠的花粉适宜发芽温度为20℃,培养基的适宜蔗糖浓度为10％;超低温(-196℃)保存后的萌发率最高;超低温保存中海棠花粉以自来水冲洗解冻效果最好;榆叶梅花粉则以室温下解冻效果最好。     

不同贮藏温度对小黑麦花粉活力的影响

在室温、4℃、-20℃和液氮(-196℃)下贮藏小黑麦的花粉,研究不同温度对新小黑麦1号、3号、4号和5号花粉活力的影响,结果表明:室温条件下保存3 h,小黑麦花粉活力均在80%左右,3~4 h后花粉活力降低很快,7~8h后花粉活力几乎全无。4℃保存可适当延长花粉活力,保存8 h后,新小黑麦1号、5号花粉的活力降低到60%,而3号和4号降低为80%左右。48 h左右花粉活力降至0%。与4℃相比,-20℃保存下不同品种小黑麦花粉活力降低更快,4 h后花粉活力降低到50%~65%,16 h后花粉活力接近0%。液氮超低温冷冻保存下小黑麦花粉活力相对稳定,保存10天后活力仍然很高,其活力相对保持率在92%左右,理论上可以长时间保存花粉。     

甘蓝自交不亲和系花粉的离体保存

盛花期甘蓝花粉低温和超低温保存前脱水至花粉含水量为9.93%～14.18%时,保存效果最好;不脱水或过度脱水的效果均差.花粉于4℃下保存,活力仅维持1个月左右;而在-20℃,-70℃下保存,保存时间虽可适当延长,但萌发率逐渐降低.-196℃(液氮)下保存6个月后,甘蓝花粉仍有很高的萌发率.预冻处理可提高花粉保存效果,-20℃中预冻的效果最佳,萌发率达38.17%.此外,在室温化冻、水浴化冻和缓慢复苏3种解融方式中,水浴化冻的花粉萌发率最高(36.37%).     

花楸花粉超低温保存及再生

【目的】探讨花楸(Sorbus pohuashanensis)花粉超低温保存及再生的方法,以延长其花粉保存时间,为科研、生产提供理论和实践依据。【方法】分别设置不同培养基配方、不同光照、不同采集时间处理,进行花楸花粉离体萌发试验,测定各试验处理的花粉萌发率;设置不同冷冻方式和化冻方式处理,测定两种方式不同处理的花粉萌发率;制备不同含水率的花粉,分别测定其在超低温保存前、后的萌发率。【结果】(1)培养基为100g·L~(-1)蔗糖+100 mg·L~(-1)硼酸的处理,花粉萌发率最高,达72.42%;(2)黑暗处理花粉萌发率为77.24%,比光照处理高8.96个百分点;(3)一天中,10∶00和14∶00采集的花粉,其活力显著高于其他时间采集的花粉;(4)-20℃预冷冻培养30min后投入液氮保存24h的处理效果最好,花粉萌发率达43.15%;(5)超低温保存后40℃水浴解冻5min处理比其他解冻方式处理的花粉活力高,萌发率为35.70%;(6)花楸花粉超低温保存最适含水率为7.72%,此含水率下花粉超低温保存后萌发率最高,为31.53%。【结论】花楸花粉采用超低温技术保存24h后仍具有活力,黑暗条件、花粉采集时间、花粉萌发培养基、花粉含水率、冷冻与化冻方式均会对花楸花粉超低温保存效果产生显著影响。     

不同低温保存对雪花梨花粉萌发的影响

针对梨树生产与科研中各品种间存在花期不遇和授粉树配置不合理,从而影响梨树授粉的问题,研究了不同低温保存方法对雪花梨花粉萌发率和萌发速度的影响。结果表明：2002～2004年雪花梨花粉萌发率3 a平均为84.1%,与胎黄梨（91.0%）无显著差异,但显著〉鸭梨（66.3%）和金坠梨（44.7%）。雪花梨花粉在室温（20～22℃）条件下保存1个月,萌发率迅速降为5%,保存5个月后萌发率降为0;在冰箱（2～3℃）条件下只能保存5个月,保存1 a后萌发率（11.2%）降低明显;在冰柜（-18℃）条件下保存3 a仍能保持较高的萌发率（56.3%）,冰柜保存是雪花梨花粉较适宜的保存方法。雪花梨花粉在23～25℃发芽培养基中4 h即全部萌发,低温保存1 a后萌发时间较新鲜花粉增加1倍,生产上授粉时应先对贮存花粉进行加湿处理,使花粉充分吸水,以保证花粉迅速发芽,确保授粉效果。     

丁香属12种植物花粉保存方法研究

丁香属植物是重要的园林观赏植物。 试验测定了丁香属12种植物鲜花粉在室温(25℃)、冰箱(4℃)、液氮罐(－196℃)中保存不同时间的花粉活力。研究结果表明,在25℃保存条件下,11种花粉可保存至7 d,其中有5种保存30 d后仍有活力;在4℃条件下,12种丁香花粉均可保存至30 d,其中红丁香和紫丁香保存180 d后仍有生活力,但萌发率显著低于新鲜花粉萌发率,分别为219%和15%;在－196℃条件下,有11种花粉能够保存至180 d,且基本与新鲜花粉萌发率无显著差异。因此,超低温保存是较长期保存丁香属植物花粉活力的有效途径。     

日本牡丹品种花粉超低温保存

为解决杂交育种工作中的时空不遇,延长花粉寿命,本文对23个日本牡丹品种花粉进行了超低温保存研究。对新鲜花粉及超低温保存花粉离体萌发率测定结果表明:不同日本牡丹品种新鲜花粉生活力存在差异,23个品种中,‘大藤锦’花粉萌发率最高,达到60.89%,而‘岛大臣’最低,仅3.49%;室温条件下,日本牡丹品种花粉寿命仅15d左右,而超低温保存可以使日本牡丹品种花粉寿命至少延长至2年。经超低温保存2年,花粉仍然具有较高的萌发率,有的甚至超过保存前水平,因此超低温保存技术可用于日本牡丹品种花粉的长期保存。     

贮藏温度对百合试管鳞茎糖类含量及其萌发的影响

 以百合试管鳞茎为材料,对其在-1℃和4℃贮藏期间碳水化合物变化与田间萌芽情况进行研究。结果表明：在低温贮藏过程中,碳水化合物变化趋势是淀粉含量下降,可溶性糖和还原糖的含量增加。4℃贮藏40d萌芽率可达到100%,50d后萌芽整齐度提高。试管鳞茎在4℃条件下贮藏50d时可溶性糖含量最高,且与萌芽率和萌芽整齐度表现一致,是解除休眠的最佳条件。     

不同贮藏温度对低需冷量梨品种横山梨和桂花梨花粉萌发率的影响

本文研究了低需冷量梨品种横山梨、桂花梨的花粉在常温、4℃和-20℃温度条件下贮藏的过程中其花粉萌发率的变化。结果表明,随着贮藏时间的延长,花粉萌发率逐渐下降,但下降的速度因贮藏温度不同而异,如横山梨的花粉在常温下贮藏1个月会完全丧失萌发力,在4℃下贮藏5个月的萌发率为零,而在-20℃条件下贮藏8个月以上其萌发率才下降为零,此外,在常温和4℃下桂花梨的花粉萌发率比横山梨下降得更慢,说明桂花梨的花粉更耐贮藏。     

梅花基因组DNA提取的方法学研究

设计 4种方法 :“简易CTAB法”、“预先去杂 CTAB法”、“简易SDS法”和“预先去杂 SDS法” ,提取梅花‘南京红须’、‘南京红’和‘粉皮宫粉’叶片的基因组DNA。分光光度法、琼脂糖凝胶电泳和限制酶酶切反应鉴定表明 :“预先去杂 SDS法”尽管提取DNA得率最低 ,却是唯一能够从梅花叶片提取到高质量基因组DNA的方法 ;嫩叶的提取效果好于成熟叶。A2 6 0 A2 80 比值偏高和降解是所获低质量DNA表现的两个主要现象。RNaseA的再次消化无法降低A2 6 0 A2 80 。     

白、青杨派间杂交幼胚培养及杂种子代的分子鉴定

利用切枝水培和组织培养技术,对白杨派的毛新杨和青杨派的不同种源小叶杨进行了派间杂交和杂交子代的幼胚培养研究。结果显示:以不同种源的小叶杨为父本和授粉后幼胚培养的时间对幼胚萌发率影响较大。其中毛新杨×小叶杨（内蒙古通辽）的幼胚培养效果最好,最适培养基为1/2MS+6BA 1.0 mg/L＋NAA 1.0 mg/L;且随着授粉后天数的增加,幼胚培养的萌发率也相应增加。在此基础上,选用SSR标记技术对杂交子代及其亲本进行了鉴定分析。共采用120对杨树特异的SSR引物对杂交亲本毛新杨和小叶杨进行了多态性筛选,得到了25对在双亲间显示多态性的引物。对其中的两对进行了杂交子代的SSR扩增分析,结果表明,杂交子代均显示出双亲间的杂种类型谱带,可以在分子水平上证明白、 青杨派间的杂交可配性。      

适度高温下高氮和低光对演替树种光合和能量转换的复合影响

利用CO2交换系统和叶绿素荧光法,研究适度高温（38℃）、高氮（HN）和低光（LL）对早、中和后期演替树种木荷、红椎和黄果厚壳桂幼树光合过程影响的初始靶的,及其对群落演替的潜在影响。结果表明:适度高温提升木荷和红椎高氮高光（HNHL）植株的光合速率（Pn）,但高光强（500 μmol/(m2·s)）限制木荷、红椎及黄果厚壳桂低氮高光（LNHL）和高氮低光（HNLL）植株Pn对适度高温的响应。当光强500 μmol/(m2·s),适度高温提高木荷LNHL植株的光下PSⅡ最大量子效率(Fv′/Fm′)、开启PSⅡ中心(Fq′/Fm′)和开启PSⅡ反应中心的比例(qL),以及非循环光启电子传递效率(ETR)和吸收光能利用于PSⅡ光反应(ΦPSII),但黄果厚壳桂不呈现类似响应。黄果厚壳桂HNLL植株多以非光辐射耗散吸收能和表现低的光化反应效率。气候变暖,华南珠江三角洲过量氮沉降和频繁的灰霾天气可能延缓当地森林植物群落的正向演替。      

不同无核葡萄品种花粉贮藏及其生活力的测定

以‘京丰无核’‘爱神玫瑰’‘杨格尔’‘奥迪亚无核’和‘奇妙无核’5个葡萄品种的花粉为试验材料,撒播在10%蔗糖+10 mg·L~(-1)硼酸+6 g·L~(-1)琼脂的培养基上进行离体培养,研究不同处理方法(液氮未处理、液氮处理)、不同温度(25、0、-20、-40、-80℃)、不同贮藏时间(1、3、5 d)对5种葡萄花粉生活力的影响。结果表明:‘爱神玫瑰’的单花药花粉量最多,达到(5 446±80)粒;‘京丰无核’的新鲜花粉生活力最高,为(68.19±2.98)%,‘奇妙无核’的新鲜花粉没有萌发。液氮未处理和处理后观察发现,液氮处理后花粉生活力远远低于液氮未处理的,液氮未处理的同一品种不同处理花粉生活力对比发现,最适宜长期贮藏的温度是-80℃,其次是-40℃,25、4、-20℃条件下贮藏花粉生活力降低较快。不同品种花粉贮藏后,‘京丰无核’花粉萌发率最高,为(55.87±1.14)%,较差的是‘杨格尔’,其花粉萌发率比‘京丰无核’花粉萌发率低17.84%,‘奇妙无核’没有萌发,杂交授粉时,适宜的父本为‘京丰无核’‘爱神玫瑰’与‘奥迪亚无核’。     

新疆特有野生花卉-鸢尾蒜属分布现状及种子特性

【目的】研究鸢尾蒜属植物种子萌发特性,结合鸢尾蒜(Ixiolirion tataricum(Pallas)Herbert)和准噶尔鸢尾蒜(I.songaricum P. Yan)的地理分布进行分析,为合理保育、开发和利用该属植物提供技术参考。【方法】查阅数字标本馆标本,相关植物志分析,对比该属植物物种发表过程、地理分布,室内萌发试验观察鸢尾蒜种子特性及萌发特征。【结果】新鲜成熟的鸢尾蒜种子具有形态生理休眠,其种子萌发对光和温度及其交互作用敏感,并且种子萌发率在全黑暗条件显著高于光照条件,低温条件(15℃/5℃)高于其他变温条件,恒温14℃全黑暗条件下种子萌发率最高。【结论】新鲜成熟的鸢尾蒜种子在早春萌发,可通过低温层积来打破种子形态生理休眠。     

云南黄连花粉活力和柱头可授性研究

 通过扫描电子显微镜观察花粉粒的形态特征,采用I2-KI染色法测定云南黄连花粉活力,并通过联苯胺+过氧化氢反应液和3%的过氧化氢测定其柱头可授性。结果表明：云南黄连的花粉粒为近圆球形,具有萌发孔,表面具有刺状雕纹;花粉活力一天中最强的时间段是13∶30—15∶30,最强的时期是散粉时期;I型（雌蕊长于雄蕊）的云南黄连柱头可授性高于II型（雄蕊长于雌蕊）的。在散粉初期,云南黄连普遍具有较高的柱头可授性。