Tween-20协同麦草酶水解的研究

采用正交试验设计的方法,对在混合酶(纤维素酶Celluclast1.5 l,β-葡萄糖苷酶Novozym188)与Tween-20协同作用下,经乙醇预处理的麦草酶水解工艺条件进行研究,详细讨论了反应温度、底物浓度、Tween-20用量、纤维素酶用量对还原糖浓度和得率的影响,并对酶水解工艺进行优化.结果表明,最佳工艺条件为反应温度50℃,底物质量浓度100 g.L-1,Tween-20用量0.03 g.g-1,纤维素酶用量15 FPU.g-1.在此条件下,水解72 h时,还原糖质量浓度和得率分别达到46.1 g.L-1和41.5%.     

酶抑制法测定有机磷农药含量

通过测定乙酸-1-萘酯在酯酶(蚕蛹酶、鸡肝酶和面粉酶)催化下水解生成的乙酸被有机磷农药抑制前后pH值的变化,推算出有机磷农药对酯酶的抑制率,从而检测出有机磷农药的含量.以ΔpH值为指标,经由单因素试验得出最佳酶促反应条件:反应时间30 min、反应温度35 ℃、固蓝B盐1 mL、乙酸-1-萘酯3 mL.结果发现蚕蛹酶活性最高,且农药对酶的抑制具有选择性,混合酶液未出现特异性提高.     

复合蛋白酶水解大豆制备大豆肽工艺的研究

以大豆蛋白为底物,加入复合蛋白酶进行水解,对反应温度、底物浓度、反应时间、pH值、酶用量等工艺参数进行了系统地研究,并分析了大豆肽含量及大豆蛋白水解度与各影响因子之间的关系;研究结果表明:最适温度为30℃、最适pH值为5.5、最适底物浓度为4.5 mg/ml、最适加酶量为8%(W/V)、最适反应时间为5 h,在此条件下酶解液中可溶性蛋白含量为3.05 mg/ml、水解度为73.11%。     

超声波对双酶水解玉米蛋白的影响

试验对超声场下双酶水解玉米蛋白的酶解反应条件进行了研究,并与恒温水浴条件下玉米蛋白的水解度进行了对照。单因素试验及正交试验结果表明,中性蛋白酶与木瓜蛋白酶按一定比例复合水解的水解度比单独采用其中的一种有所提高:超声功率为1 000 W,超声时间与间歇时间比为2 s∶30 s,底物浓度3%,总酶浓度(中性蛋白酶与木瓜蛋白酶的酶浓度比为2∶1)5%,pH 7.5的条件下,玉米蛋白的水解度可达58.73%。     

梅花鹿茸蛋白质酶法水解研究

目的研究梅花鹿茸蛋白质酶法水解条件。方法用胰酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶在相同条件下水解梅花鹿茸蛋白质,比较氨基氮生成率,选择适宜酶类。用所选定的酶在不同温度(T)、不同底物浓度(S)、不同酶与底物浓度比(E/S)和不同水解时间(t),水解梅花鹿茸蛋白质,以氨基氮生成率为指标确定最佳水解条件。结果胰蛋白酶为适宜酶,最佳水解条件为:温度45℃、pH8.0、底物浓度7.5%、酶与底物浓度比6000u/g、时间6h。结论胰蛋白酶是水解梅花鹿茸蛋白质较适宜的酶,在上述最佳条件下,水解梅花鹿茸蛋白质,氨基氮生成率达43.52%,氮溶解指数达93%,水解液中蛋白质绝大多数为低肽分子,更有利于机体消化吸收。     

蚕蛹蛋白双酶法水解工艺优化

研究了碱性蛋白酶和中性蛋白酶双酶法水解蚕蛹蛋白的工艺条件.在单因素试验的基础上,以水解度为考察指标,研究温度、脱脂蚕蛹粉浓度、水解时间、加酶量、酶质量比(碱性蛋白酶:中性蛋白酶)对蚕蛹蛋白水解效果的影响,通过正交试验优化水解工艺条件.结果表明,优化的工艺条件为脱脂蚕蛹粉浓度30 g/L,水解时间6h(其中碱性蛋白酶的水解时间为4.5 h,中性蛋白酶的为1.5 h),加酶量3％,温度55℃,酶质量比3:1,碱性蛋白酶处理时pH9.0、中性蛋白酶处理时pH7.5.在此工艺条件下蚕蛹蛋白水解度可达22.99％.     

鹿角盘蛋白质酶法水解作用研究

研究鹿角盘中蛋白质酶法水解条件。用胰酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶在相同条件下水解鹿角盘蛋白质,比较氨基氮生成率,选择适宜酶类。用所选定的酶在不同温度(T)、不同底物浓度比(E/S)和不同水解时间(t)水解鹿角盘蛋白质,以氨基氮生成率为指标确定最佳水解条件。胰蛋白酶为适宜酶,最佳水解条件为:温度45℃,pH 8.0,底物浓度7.5%,酶与底物浓度比6 000μ/g,时间6h。胰蛋白酶是水解鹿角盘蛋白质较适宜的酶,在上述最佳条件下,水解鹿角盘蛋白质,氨基氮生成率达42%,氮溶解指数达93%,水解液中蛋白质绝大多数为低肽分子,更有利于机体消化吸收。     

碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白及其抗氧化活性的研究

将Plackett-Burman因素水平设计应用于碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白,以研究大豆分离蛋白酶水解物的抗氧化活性.通过测定水解产物的亚铁还原能力来确定其抗氧化活性的强弱,以此确定最佳水解工艺条件 为:反应温度72℃,底物浓度9％,酶用量(E/S) 1％,pH 7.0,水解时间5h.采用最适水解工艺条件得到水解...     

复合酶分步水解鸭血工艺的研究

鸭血是家禽屠宰业的主要副产物之一,富含蛋白质和血红素铁等多种营养成分,开展鸭血的综合利用研究具有重要意义。本实验确定了先木瓜蛋白酶水解再风味酶水解的复合酶分步水解工艺。其最佳工艺参数为:先用木瓜蛋白酶在温度60℃、加酶量6000 U/g底物、底物浓度6%(w/v)、pH 6.0的条件下水解1 h,再用风味酶在加酶量6000 U/g底物、温度40℃、pH 6.0的条件下水解2 h,风味酶分两次加入,前1 h加入一半的酶,后1 h加入另一半的酶,在此条件下水解液中氨基酸百分含量可达16.23%。     

利用乌桕梓酸化油生产生物柴油的条件优化

为探寻环保低耗的柴油生产工艺,以乌桕梓酸化油为原料,利用固定化细菌A007脂肪酶催化甘油三脂的水解反应和固定化南极假丝酵母脂肪酶催化游离脂肪酸的酯化反应将其转化为生物柴油.结果表明,水解反应的最适条件为温度30℃、底物浓度60%(wt)、酶用量100 U/g,在此条件下反应12 h后甘油三脂水解率可达94%;酯化反应的最适底物摩尔比(甲醇/FFA)为5∶1,在30℃、酶用量为100 U/g的反应条件下,通过"酯化-脱水-再酯化"可使FFA的总酯化率达到98%以上.该工艺可操作性强,具有较好的应用价值.     

Trichoderma reesei外切葡萄糖苷酶CBH Ⅰ对木糖的糖苷合成性质的研究

[目的]探讨Trichoderma reesei外切葡萄糖苷酶CBHⅠ对木糖是否有糖苷合成活性。[方法]以木糖为底物,检测了155min反应体系中还原糖含量的变化,并以GC/MS对反应产物进行定性分析。结果]在封闭的反应体系中,还原糖含量出现规律的周期性上升下[降的特征,在2条回归曲线y=3E-05x+0.7151和y=-0.0002x+0.6276之间呈波状振荡,还原糖含量振荡周期为(33.75±4.79)min,从而推断出CBHⅠ可以以木糖为底物合成非还原性产物。对非还原性产物衍生后进行GC/MS分析,产物中有以木糖为单位的非还原性二糖存在。[结论]CBHⅠ对木糖有糖苷合成活性,这扩大了其在糖苷合成中底物的应用范围。     

直立型川麦冬多糖含量变化规律的初步研究

[目的]初步探讨直立型川麦冬多糖含量的变化规律。[方法]在川麦冬主产区,采用原位动态法采集供试品,硫酸-苯酚比色法测定麦冬多糖含量,相关回归法分析麦冬多糖与生育时间的变化规律。[结果]直立型川麦冬中的多糖含量y(mg/g)与生育年限x(d)的变化规律是:y=147.212 2 lnx-34.388 2(n=7,0≤x≤730,0≤y≤427.06,r0.01=0.95074,r=0.9560)。[结论]在一定生育时间范围内(0≤x≤730 d),直立型川麦冬中的多糖含量y1(mg/g)与生育时间x(d)呈显著的正相关。     

酶解米糠清蛋白功能性质的研究

以米糠为原料,按照0sborne法分级提取米糠清蛋白,选取碱性蛋白酶对米糠清蛋白进行酶解作用。通过响应面优化得出最佳酶解条件为:加酶量5 500 U·g-1蛋白,酶解pH9.54,酶解温度56.5℃和酶解时间2.13 h,此时米糠清蛋白溶出率高达85.34%。同时对酶解前后米糠清蛋白的功能性质进行比较,酶解后米糠清蛋白的溶解性高达91.89%、乳化性高达84.23%、起泡性高达79.51%、持水性2.71 g·g-1及吸油性7.14 g·g-1,相对于未酶解前各功能性质指标均有不同程度提高。     

Hydrolyzing Condition and Immunocompetence of Sheep Bone Protein Enzymatic Lysates

Utilizing collagen of sheep bone as material to get immunocompetent peptide, enzymatic hydrolysis conditions were optimized using quadratic regression general rotation design. The effect of temperature （T）, time （t）, enzyme/substrate （E/S） ratio, and substrate concentration （S） on the amount of tricarboxylix acid cycle （TCA） soluble peptides were investigated. The content of soluble peptide in the acquisition was measured by Folin-hydrozybebzebe method, and the correlation between soluble peptide content and immunocompetence was analyzed by SAS software. The best enzymatic hydrolysis condition was gotten from Design Expert 7.1.2 software. The optimal condition under which immunocompetent peptides could be prepared was 1 576 U g^-1 （E/S）, 64.05℃ （T）, 0.271 kg L^-1 （S）, and 7.22 h （t）. The correlation coefficient between TCA soluble peptides and the immuneocompetence was 0.045 〈r0.05 = 0.355, which indicated that they had no significant correlation. The result showed that the soluble peptide contained immunocompetent peptides which content was independent of immunocompetence in the hydrolasates.     

GC检测鱼体中残留溴氰菊酯农药方法研究

利用数学拟和方法,研究了用气相色谱测定鱼体中的残留溴氰菊酯农药的影响条件并创建了相应的动力学模型。结果表明,石油醚对溴氰菊酯有较好的提取效果,最佳pH值为7.8,最佳温度为25.7℃,提取率可达82.5%。数学模型为：y=61＋18.6e-（x/6.7）;y=-118.2＋199.7e-（x-7.8）/200;y=-6230.6＋6313.1e-（x-25.7）/217800。最佳净化和浓缩方法分别是：弗罗里硅土层析柱进行净化;旋转蒸发仪进行浓缩,最低检出浓度为0.0079mg/kg。同时构建了对溴氰菊酯的提取率同振荡提取时间之间的动力模型和方程：C/C0×100%=87.9-120.5/t。     

双酶直接酶解米糠制备短肽的工艺优化

 【目的】建立在中低温度下直接酶解米糠制备短肽的优化工艺。【方法】采用二次回归正交旋转组合设计优化直接酶解米糠制备短肽的工艺条件,其中总糖含量测定采用蒽酮比色法,水解度（degree of hydrolysis,DH）采用pH-stat法,蛋白质回收率采用凯氏定氮法。【结果】确定直接酶解米糠制备短肽最佳工艺条件为：米糠先经糖酶（viscozyme）反应2 h去除糖类杂质,然后用碱性蛋白酶（alcalase）和胰蛋白酶双酶水解,最适pH 8.2,温度45℃,alcalase与胰蛋白酶酶活比59﹕41,总酶活5 750 U/g底物,水解时间3 h。在此条件下,DH为23.04%,蛋白质回收率为84.33%,酸溶性多肽（TCA-SN）为68.40%,短肽分子量主要集中在1 000 D以下。【结论】在中低温和偏中性（pH 8.2）条件下,采用碱性蛋白酶和胰蛋白酶双酶直接酶解米糠制备短肽,与先提取蛋白后酶解制备短肽的方法相比,具有操作步骤简单、蛋白质利用率高等特点,是一种制备米糠肽的新途径。     

电子顺磁共振波谱仪分析干红葡萄酒DPPH清除能力及其与总酚含量的关系

【目的】分析不同酿酒葡萄品种所酿制的干红葡萄酒抗氧化性的差异及其与总酚含量之间的关系。【方法】利用电子顺磁共振波谱仪（Electron Paramagnetic Resonance, 简称EPR）和福林-肖卡法（Folin-Ciocalteu,简称FC）分别对河北沙城产区5个单品种干红葡萄酒检测DPPH清除率和总酚含量,筛选适当的EPR试验条件。【结果】干红葡萄酒具有很强的抗氧化能力,在样品稀释200倍、反应时间5 min的条件下,各样品清除DPPH自由基的能力以赤霞珠葡萄酒为最强72.31%,宝石解百纳72.23%,梅鹿辄68.31%,西拉和增芳德分别为59.03%和56.34%。梅鹿辄、宝石解百纳和赤霞珠葡萄酒的总酚含量,分别为3 044.43、3 026.92和2 886.81 mg•L-1。西拉和增芳德葡萄酒的总酚含量相对较低,分别为2 085.51 mg•L-1和1 647.64 mg•L-1。【结论】电子顺磁共振法可以简便、快速检测干红葡萄酒的抗氧化性,不同单品种干红葡萄酒DPPH清除能力表现明显不同,自由基清除率与总酚含量之间存在线性正相关,回归方程y=0.01116x+37.327665,相关系数rGAE/DPPHequiv=0.91753。     

黄鳝血清总脂含量与体长关系的研究

[目的]为了探讨黄鳝血清总脂含量与体长的相关性。[方法]以处于繁殖季节的体长为19.3～68.0 cm的53尾黄鳝为研究对象,采用香草醛法测定不同体长黄鳝的血清总脂含量,并分析体长与黄鳝血清总脂含量的关系。[结果]黄鳝血清的总脂含量为3.94～11.61 mg/ml。黄鳝体长(x)与血清总脂含量(y)间的回归方程为y=5.526 1 x+392.7(r=0.373 8),说明两者间存在显著正相关。[结论]在繁殖期间黄鳝血清总脂含量随体长变化不大,这使黄鳝在繁殖期间血清总脂含量处于较稳定的生理状态。     

高效液相色谱-荧光检测法测定尿中1-羟基芘

[目的]通过C18固相萃取小柱洗脱液浓缩与不浓缩试验对比,改进尿样中1-羟基芘的高效液相色谱-荧光检测器测定方法。[方法]取2组相同尿样,经酶避光水解后,通过C18固相萃取小柱进行富集,甲醇洗脱。一组对洗脱液进行氮吹浓缩后定容至1.5 ml,另一组直接洗脱定容至1.5 ml,然后,使用高效液相色谱-荧光检测器检测。以V乙腈∶V水=75∶25为流动相,等度洗脱,流速为1 ml/min,荧光检测器λex=275 nm,λem=430 nm。[结果]浓缩后测定的1-羟基芘的值为不浓缩测定值的72.9%～80.6%。利用不浓缩的酶水解高效液相色谱-荧光检测器法测定尿样中的1-羟基芘,检出限为0.02 ng/ml,在给定浓度范围内,1-羟基芘的峰面积与浓度有良好的线性关系,线性回归方程为y=2.404 1x-0.083(r=0.999 9),加标回收率为94.8%～108.7%,平均相对标准偏差为2.7%。[结论]不浓缩的酶水解高效液相色谱-荧光检测器法可用于测定尿样中的1-羟基芘,且该方法具有操作简单,灵敏度、精密度高,重现性、回收率好的特点。     

顶空固相微萃取-气质联用测定水中嗅味化合物

[目的]建立顶空固相微萃取-气质联用测定水中痕量嗅味化合物的方法。[方法]水样中加入氯化钠,顶空固相微萃取出水中2-甲基异冰片、土臭素两种嗅味化合物,气质联用测定其含量。[结果]建立的2-甲基异冰片、土臭素标准曲线的回归方程分别为y=5 923.0x-199.5、y=21 346x+5 851.8,相对标准偏差分别为8.9%、8.7%,相关系数均大于0.99;加标回收率在90%~110%,表明方法准确、可靠。2012年7月初、8月初测定杭州饮用水原水中2-甲基异冰片浓度较高,达60 ng/L以上,土臭素浓度都较低。[结论]固相微萃取具有简单、快速、萃取效率高、灵敏度高等特点。该方法线性良好,最大偏差10%,符合水中痕量2-甲基异冰片、土臭素的测定要求。