高效液相色谱法测定埃普利诺菌素注射液的含量

本文描述了用高效液相色谱法(HPLC)测定埃普利诺菌素注射液含量的方法研究。色谱条件:流动相为甲醇∶水(90∶10),流速1.0mL/min,进样量50μL,柱温为室温,检测波长245nm。样品回收率为(98.72±0.28)%。在5～200μg/mL浓度范围内,检测样品的中间精密度:批内变异系数为0.54%～0.80%,批间变异系数为0.28%～1.06%。本方法可用于埃普利诺菌素注射液的含量检测。     

超高效液相色谱―串联质谱法检测猪肝中乙酰异戊酰泰乐菌素残留

本研究建立了猪肝中乙酰异戊酰泰乐菌素残留的超高效液相色谱―串联质谱检测方法(UPLC-MS/MS)。样品经EDTA-McIlvaine's缓冲液提取,HLB固相萃取柱净化后,采用C₁₈色谱柱分离,以乙腈―0.1％甲酸(7∶3,V/V)为流动相洗脱,电喷雾正离子模式电离,选择离子监测模式检测。结果表明,药物浓度与峰面积在5~2000 ng/mL范围内呈现良好的线性关系,相关系数大于0.99,对空白猪肝组织进行5~500 μg/kg的药物添加回收试验,经统计分析获得平均回收率约为84.9%~88.1%,批内变异系数为8.2％~15.1%,批间变异系数为14.7％~16.5%。本方法对乙酰异戊酰泰乐菌素的检测限为0.76 μg/kg,定量限为2.51 μg/kg,方法灵敏、准确,适用于猪肝脏中乙酰异戊酰泰乐菌素残留的检测。     

HPLC法同时测定磺胺二甲嘧啶含量和泰乐菌素组分

采用高效液相色谱法同时测定磺胺二甲嘧啶和泰乐菌素组分含量,采用C18(4.6×250 mm,5μm)色谱柱;以2 mol/L高氯酸钠溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱;流速为1.0 m L/min;检测波长为280 nm。结果表明磺胺二甲嘧啶在10~200μg/m L范围内具有良好的线性,相关系数为0.9997,检出限为0.05μg/m L,定量限为0.15μg/m L,低、中、高3个浓度加标的平均回收率为99.7%~100.1%,RSD为0.3%~0.5%,泰乐菌素D峰与A峰的分离度≥3.2;泰乐菌素C峰与磺胺二甲嘧啶分离度≥30,该方法操作简便、准确、专属性强。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡组织中泰乐菌素的残留量

建立了鸡组织中泰乐菌素残留的超高效液相色谱-串联质谱法检测方法,样品用甲醇(含2%氨水)提取,经C18固相萃取柱净化,洗脱液氮气吹干,残渣用甲醇:乙腈(20∶80,V/V)复溶,超高效液相色谱-串联质谱法检测,基质添加标准溶液外标法定量。结果表明泰乐菌素在5~1000μg/kg的浓度范围内呈现良好的线性关系。在鸡组织中中泰乐菌素的检测限为4μg/kg,定量限为10μg/kg。在10~200μg/kg添加浓度范围内,泰乐菌素在鸡组织中的回收率均在85.9%~110.4%之间,批内批间变异系数在1.2%~4.0%之间。该方法各项技术指标均能满足残留检测要求,且方法的重现性良好,满足国内外兽药残留相关法规规定。     

泰万菌素对鸡胚中鸡滑液支原体的抑制研究

为了解泰万菌素对鸡滑液支原体(MS)垂直传播的抑制作用,我们测定泰万菌素对MS-HB1株的最低抑菌浓度(MIC)。结果显示,泰万菌素对MS-HB1株的MIC为0.008μg/m L。然后将MS接种5日龄SPF鸡胚,3日后分别接种10MIC和50MIC泰万菌素,作用3日和5日后分别检测鸡胚中的MS。结果泰万菌素作用3日对鸡胚中MS的抑制率分别为30%和41.7%,与对照组相比差异不显著(P0.05);作用5日对鸡胚中MS的抑制率分别为54.5%和70%,与对照组相比差异显著(P0.05)。结果表明,泰万菌素对鸡胚中的MS有抑制作用,且作用时间对抑制效果影响较大。     

液相微萃取-高效液相色谱法检测水中阿维菌素类药物

为了检测水中阿维菌素、多拉菌素、伊维菌素和甲氨基阿维菌素残留,试验采用液相微萃取提取、净化,高效液相色谱检测,样品过膜,经液相微萃取提取、净化后吹干,衍生化,高效液相色谱分析。结果表明:在0.05~2.0μg/L范围内呈线性,相关系数(r~2)≥0.999;方法的检测限为0.05μg/L,在0.05~2.0μg/L范围内回收率在87.53%~114.97%之间,日内变异系数在1.81%~4.57%(n=5)之间,日间变异系数在2.46%~6.10%(n=3)之间。     

伏马菌素FB2间接竞争ELISA检测方法的建立

用卵清白蛋白与伏马菌素B2的偶联物(OVA-FB2)做包被抗原,标准伏马菌素B2(FB2)做竞争抗原,初步建立了检测玉米粉中伏马菌素B2的间接竞争ELISA方法.优化后的ELISA检测方法,线性范围为7.81～250μg/L,最低检测限为6.09 μg/L.曲线回归方程为y=-47.038x+120.25,R2=0.983 5,批内平均变异系数为3.92%,批间平均变异系数为5.53%.对玉米粉加标样品测定结果表明,利用甲醇-EDTA法提取样品的平均加标回收率达到了96.11%.     

伊维菌素纳米乳中伊维菌素含量HPLC检测方法的建立

建立了伊维菌素纳米乳中伊维菌素含量的高效液相色谱检测方法(HPLC)。采用C18色谱柱(4.6 × 250 mm，5 μm)，以甲醇-乙腈-水(40∶55∶5)为流动相，流速1.0 mL/min，检测波长254 nm，进样量10 μL，柱温25 ℃。伊维菌素浓度在4.6～92.0 μg/mL时，其峰面积与浓度线性关系良好(r²=0.9996)，回收率高，平均回收率为98.25%~98.76%。精密度良好，RSD均小于2%，色谱峰图无杂质干扰，稳定性高，本操作方法简便，分析快速，结果准确，适用于伊维菌素纳米乳剂的含量测定。     

液相色谱-串联质谱法检测食用动物血液中伊维菌素残留

本试验旨在建立一种检验食用动物血液中伊维菌素兽药残留的液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法。样品经乙腈提取,采用液质联用仪电喷雾离子源(ESI+),多反应监测(MRM)检测,内标峰面积法定量。进行回收率、精密度和检出限等技术要素评价。本方法在15 min内完成目标化合物分析;伊维菌素在10.0~50.0μg/L浓度范围内均呈良好线性关系,相关系数r=0.9999,添加3个浓度水平(10、20、40μg/kg)伊维菌素标准溶液,猪血、羊血、牛血、兔血、鸡血、鸭血的平均回收率为75.6%~95.5%,RSD为1.44%~8.57%,本方法检出限(LOQ)为10μg/kg。该方法灵敏度高,稳定性好,可适用于食用动物血液样品中伊维菌素含量检测。     

气相色谱-质谱法测定鸡蛋中三聚氰胺残留

采用气相色谱-质谱法(GC-MS)测定了鸡蛋中三聚氰胺残留。样品匀浆后,用三氯乙酸去蛋白提取,MCX柱净化,BSTFA和TMCS衍生化后,气相色谱-质谱检测。质谱定性离子为m/z342、327、171和99,定量离子为m/z327。方法定量限为0.5μg/g,添加浓度为0.5、2μg/g和10μg/g时的回收率在89.2%~96.2%之间,变异系数在2.9%~5.6%之间。     

液相色谱-串联质谱法检测牛奶中4种阿维菌素类药物残留量的研究

建立了一种可同时检测牛奶中4种阿维菌素类药物(阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素和埃谱利诺菌素)残留的液相色谱-串联质谱方法(LC-MS/MS)。牛奶样品经乙腈提取,高速离心去除蛋白质等杂质,C18柱净化。以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液为流动相进行洗脱,流速0.4 m L/min,采用基质匹配标准溶液外标法定量。结果表明:阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素和埃谱利诺菌素在0.5~100 ng/m L浓度范围内均呈现良好的线性关系,相关系数(R2)均大于0.996;4种阿维菌素类药物的定量限均为0.5μg/kg。阿维菌素在0.5~5μg/kg添加浓度范围内,伊维菌素在0.5~20μg/kg添加浓度范围内,多拉菌素在0.5~30μg/kg添加浓度范围内,埃谱利诺菌素在0.5~40μg/kg添加浓度范围内,回收率为66.4%~120%;批内与批间相对标准偏差均小于20%。该方法具有简便快速、灵敏度高、定性准确,重复性好等特点,可以满足牛奶中4种阿维菌素类药物残留检测的要求。     

酒石酸泰万菌素对特定畜禽疫病防治功效研究进展

酒石酸泰万菌素(简称泰万菌素)系大环内酯类动物专用抗生素。本文综述了泰万菌素防治敏感细菌感染、支原体病、猪痢疾以及猪繁殖与呼吸综合征等畜禽疫病的功效研究成果,证实泰万菌素对于防治上述畜禽疫病功效显著。近年来研究发现,泰万菌素活性不同于其他类抗生素,可作为抗病毒药物使用,特别适用于对猪繁殖与呼吸综合征的治疗。泰万菌素可抑制病毒复制,缩短病毒血症周期,降低死亡率,减轻临床症状;同时还可通过降低母猪流产率,提高产健康仔猪数以及改善母猪、仔猪病毒血症等,达到控制病毒垂直传播的目的。在当前日益关注兽药残留、动物源细菌耐药性的社会背景下,泰万菌素制剂能很好满足畜禽养殖场用药需求。     

分散固相萃取法结合液相色谱串联质谱法检测鸡可食性组织中泰万菌素及3-乙酰泰乐菌素残留量

建立了检测鸡肉、鸡皮脂、鸡肝和鸡蛋中泰万菌素以及其主要代谢产物3-乙酰泰乐菌素残留量的液相色谱串联质谱检测方法。前处理使用分散固相萃取法,选择使用50%(v/v)乙腈提取,无水MgSO4进行脱水和盐析,正己烷脱脂,酸性氧化铝粉末进行样品净化。将离心后的上清液以如下方法进行上机检测：使用反相色谱柱进行分离,流动相为0.1 %甲酸和乙腈,采用梯度程序进行洗脱,三重四级杆质谱进行定性定量分析。实验结果表明,方法的最低检出限为2.5 μg/kg,最低定量限为5 μg/kg,在5～200 μg/kg范围内线性关系良好(r >0.995),添加回收率在60 %～110 ％,RSD＜20 ％,表明该方法具有较好的准确度与精密度。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测抗菌药物中非法添加利巴韦林的研究

建立了多种抗菌药物中非法添加利巴韦林检测的UPLC-MS/MS方法。样品经乙腈提取稀释后,采用ACQUITY UPLCBEH amide色谱柱为分离柱,质谱正离子扫描分析测定。结果显示,利巴韦林在1~50 ng/m L范围内线性关系良好(R2=0.9992),样品检出限为0.5 mg/g,定量限为2 mg/g;在40、50、60 mg/g添加水平的回收率为90%~110%,批内批间变异系数均小于10%。本方法灵敏、快速、重现性好,适用于多种抗菌药物中非法添加利巴韦林的检测。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测扶正解毒散剂中非法添加物喹乙醇、乙酰甲喹

建立了扶正解毒散中非法添加喹乙醇、乙酰甲喹检测的UPLC-MS/MS方法。样品经60%乙腈提取稀释后,采用ACQUITYUPLCRBEHC18色谱柱为分离柱,质谱正离子扫描分析测定。结果显示,喹乙醇、乙酰甲喹在5~200ng/mL的范围内线性关系良好(R2=0.9984,R2=0.9995);样品检出限为25μg/mL,定量限为50μg/mL。在80、100、120μg/mL添加水平的回收率为90%~103%,批内批间变异系数均小于10%。本方法灵敏、快速、重现性好,适用于扶正解毒散中非法添加喹乙醇、乙酰甲喹的检测。     

液相色谱-质谱联用分析饲料中新型的β2-肾上腺素能激动剂——齐帕特罗

建立了饲料中齐帕特罗的液相色谱-质谱联用(LC-MS)检测方法.液相色谱条件为Waters AntantisTM C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,3μm);柱温30℃;流动相为乙腈-0.2%甲酸(892,V/V);流速0.2 mL/min;进样量20μL.质谱条件为电喷雾离子源(ESI+),选择离子监测质荷比(m/z)为262、244、202、185带正电荷的准分子离子和碎片离子.齐帕特罗的线性范围为0.01～4μg/mL,最低定量检测限0.01μg/g,回收率为(90±10)%.     

超高效液相色谱-质谱法测定猪尿中15种β-受体阻断剂残留

为建立一种快速测定猪尿中15种β-受体阻断剂残留的超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)确证方法,本试验优化了分子印迹固相萃取(MISPE)净化条件及色谱、质谱条件。猪尿样品经离心后加入MISPE柱上样,依次经水、乙腈淋洗,10%乙酸甲醇洗脱,N2吹干,0.1%甲酸水-乙腈(v:v=9:1)复溶;采用ESI正离子模式在多反应监测模式下进行离子扫描,外标法定量。结果显示,猪尿中15种药物在0.1~10μg/L范围内具有良好的线性关系(R2≥0.996),检出限和定量限分别为0.03和0.10μg/L;各药物回收率在76.7%~109.2%之间,批内、批间变异系数分别在2.2%~18.7%、2.1%~19.7%之间。结果表明,本方法操作简单快速、灵敏度高、特异性好。     

牛可食性组织中加米霉素残留量的液相色谱-串联质谱检测方法的研究

本试验建立了牛可食性组织中加米霉素残留量检测的制样和高效液相色谱-串联质谱检测方法,适用于牛组织中加米霉素残留量的测定。牛组织(牛的肌肉、肝脏、肾脏和脂肪)经绞碎、均质后,样品经0. 1 mol/L磷酸二氢钾缓冲液提取,Oasis HLB固相萃取柱净化,高效液相色谱-串联质谱法检测,内标法定量。该方法特异性好,空白样品无干扰。该方法的检测限为1μg/kg,定量限为2μg/kg,基质匹配标准曲线范围为5μg/L～500μg/L,相关系数 0. 99;牛肌肉和肾脏组织在2、50、100、200μg/kg四个添加浓度的平均回收率为93. 56%～103. 31%,批内变异系数≤8. 67%,批间变异系数≤6. 70%;牛肝脏组织在2、100、200、400μg/kg四个添加浓度的平均回收率为94. 37%～102. 52%,批内变异系数≤5. 70%,批间变异系数≤4. 61%;牛脂肪组织在2、10、20、40μg/kg四个添加浓度的平均回收率为100. 95%～105. 58%,批内变异系数≤5. 89%,批间变异系数≤4. 52%。     

大环内酯类药物泰万菌素的研究进展

泰万菌素已广泛用于防治猪气喘病、猪痢疾、猪增生性肠炎和鸡支原体感染.本文结合泰万菌素在国内外的应用情况,阐述了泰万菌素的作用机制、抗菌活性、药动学、毒理学、临床应用以及残留等内容,为临床上合理使用该药物提供参考。     

固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中沃尼妙林和泰妙菌素

本试验旨在建立一种高效快速测定饲料中沃尼妙林和泰妙菌素的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱方法。用甲醇提取饲料中的沃尼妙林和泰妙菌素,经过Oasis MCX固相萃取柱净化后,由C18色谱柱分离,流动相为水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸),梯度洗脱,以电喷雾离子源(ESI)正离子扫描方式,在多反应监测(MRM)模式下进行测定,外标法定量。结果表明:本试验建立的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法对饲料中沃尼妙林和泰妙菌素的检测限分别为25.0和5.0 ng/g。沃尼妙林和泰妙菌素浓度在0.01~5.00μg/m L范围内线性关系良好,相关系数(R2)均大于0.99。在3个添加水平(2.5、25.0、125.0 mg/kg)下,沃尼妙林的回收率为85.17%~94.55%,相对标准偏差(RSD)为2.56%~7.65%,泰妙菌素的回收率为84.69%~99.36%,RSD为1.57%~4.95%。结果表明,本试验建立的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法操作简单、准确度高,可应用于饲料中沃尼妙林和泰妙菌素的快速定量测定。