基于单抗的免疫分析方法及其在兽药残留检测中的应用

兽药残留检测是监督控制药物滥用的手段之一。免疫学技术基于抗原对抗体的特异性识别,具有灵敏度高、稳定性好、操作简单、快捷等优点被广泛应用于兽药残留检测。该方法的关键是要获得高质量的特异性抗体,因而单抗技术的应用与发展,对免疫分析方法的普及起了巨大推动作用。为此,本文针对单抗的制备以及基于单抗的免疫分析方法在兽药残留检测领域的应用进行简要综述。目前酶联免疫吸附法（ELISA）与胶体金免疫层析法（GICA）是应用最广泛的基于单抗的兽药残留检测方法,主要用于检测抗生素、化学合成抗菌药、激素类和β-受体激动剂类药物、镇静剂类药物,其操作简单,灵敏度高,但均需要对样品进行一定的前处理,实际操作中较易出现假阳性,反应时间长等问题。为提高检验的敏感度、稳定性、特异性、便捷性,正在研究新型的免疫分析技术,如结合采用表面增强拉曼光谱（SERS）技术和金标检测试纸（LFA）实现超灵敏检测,采用微流控免疫分析芯片技术联合ELISA实现高通量检测等。诸多研究将为基于单抗的免疫分析方法在兽药残留检测中的应用提供新思路。     

中草药添加剂对断奶仔猪抗氧化功能指标的影响

[目的]探讨中草药饲料添加剂对断奶仔猪抗氧化功能的影响,为中草药添加剂的利用及推广提供参考依据。[方法]选用48头体重相近的断奶仔猪,随机分为试验I组（对照组）、试验II组、试验III组和试验IV组4个组。在饲喂中草药添加剂后第7、第14和第21天分别采取血液进行抗氧化功能指标的测定。[结果]试验IV组的血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和谷胱甘肽酶（GSH-Px）活性在整个试验期间高于其他试验组,尤其在第7天时的差异显著或极显著（P〈0.05或P〈0.01）,且GSH-Px活性随日龄的增加呈先降后升的变化;丙二醛（MDA）含量,在第7和第14天时,试验Ⅳ组低于其他组,差异极显著（P〈0.01）,在第21天时各组间无显著差异;试验IV组的一氧化氮（NO）含量显著低于其他组（P〈0.05）,并随着日龄增加,各组的NO含量均呈下降趋势。[结论]中草药添加剂能提高断奶仔猪抗氧化功能。     

液相色谱-串联质谱法测定猪尿液中地西泮及其7种代谢物残留

为建立快速测定猪尿中地西泮及其7种代谢物残留的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)确证方法,本研究优化了样品净化的阳离子交换固相萃取柱(PCX柱)及其淋洗洗脱条件。猪尿液酸化后直接经PCX柱净化,依次用水、60%甲醇水溶液淋洗,最后用5%氨化甲醇洗脱;选用BEH C18色谱柱分离,UPLCMS/MS进行检测,以基质匹配标准曲线定量。结果显示:8种药物在0.3~20.0μg/L范围内具有良好的线性关系(R²≥0.995),检出限和定量限分别为0.1μg/L和0.3μg/L;各药物在3个添加浓度下回收率为73.6%~95.3%,日内、日间相对标准偏差分别为2.9%~18.6%(n=6)和2.2%~12.6%(n=3)。结果表明,本方法操作简单、快速,灵敏度高、特异性好。     

固相萃取-超高效液相色谱法同时测定猪肉中22种磺胺类药物残留

为探索一次性检测猪肉中多种磺胺类药物残留的检测方法,建立了同时测定猪肉中22种磺胺类药物残留的固相萃取-超高效液相色谱方法。样品用3%乙酸乙腈提取,MCX固相萃取柱净化,水和甲醇淋洗,5%氨化甲醇洗脱,氮气吹至近干,0.1%甲酸-乙腈(9:1,V/V)溶液复溶,二极管阵列检测器270 nm检测。结果显示:该方法对22种磺胺类药物检测的线性关系良好(R2 0.999),定量限为2.5～10.0μg/kg,检测限为1.0～4.0μg/kg;各药物平均回收率为83.2%～96.6%,批内和批间变异系数分别为1.1%～3.5%和3.6%～13.4%。结果表明,该方法灵敏度高、重复性好、成本低廉,且操作简单、快速,可用于猪肉样品中多种磺胺类药物残留的同时检测。     

肉毒杆菌及肉毒毒素研究进展

肉毒杆菌是一种致命病菌,能引起肉毒中毒症。肉毒杆菌作为影响食品安全的一个重要风险因素,尤其是在新西兰恒天然公司部分产品受到肉毒杆菌污染事件发生后,肉毒杆菌及肉毒毒素受到了普遍关注。现就肉毒杆菌及肉毒毒素的生物学特性、中毒机制、诊断及治疗研究进展进行综述。     

超高效液相色谱-质谱法测定猪尿中15种β-受体阻断剂残留

为建立一种快速测定猪尿中15种β-受体阻断剂残留的超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)确证方法,本试验优化了分子印迹固相萃取(MISPE)净化条件及色谱、质谱条件。猪尿样品经离心后加入MISPE柱上样,依次经水、乙腈淋洗,10%乙酸甲醇洗脱,N2吹干,0.1%甲酸水-乙腈(v:v=9:1)复溶;采用ESI正离子模式在多反应监测模式下进行离子扫描,外标法定量。结果显示,猪尿中15种药物在0.1~10μg/L范围内具有良好的线性关系(R2≥0.996),检出限和定量限分别为0.03和0.10μg/L;各药物回收率在76.7%~109.2%之间,批内、批间变异系数分别在2.2%~18.7%、2.1%~19.7%之间。结果表明,本方法操作简单快速、灵敏度高、特异性好。     

不同种类秸秆在生产母猪日粮中添加的效果试验

选择100头体重、胎次接近，体况良好的长白（♂）×八眉猪（♀）杂交一代生产母猪，随机分为10组。试验采用蚕豆秸秆、菜籽秸秆和马铃薯秸秆3种秸秆饲料饲喂生产母猪．妊娠期平均每头每日供给基础精饲料1．9kg，然后分别添加不同比例（0．4kg、0．6kg和0．8kg）的3种秸秆。结果：与对照组相比，添加蚕豆秸秆、菜籽秸秆后，母猪繁殖性能不受影响；而添加0．6kg和0．8kg马铃薯秸秆后，母猪采食量下降，采食时间延长，膘情严重下降，并有啃咬围栏等异常现象，推测可能是马铃薯秸秆有辣味、苦味．猪适口性差的原因本次试验终止了添加马铃薯秸秆0．6kg和0．8kg两组试验。     

刍议浓缩饲料在青海省农区畜牧业发展中的支撑作用

自1990年国内14位专家建议大力发展我国的“秸秆畜牧业”以来，全国广泛开展了秸秆养牛、养羊项目，取得了较好的经济效益，促进了农牧民收入的增加，受到了国家、农业部的极大重视，而其中最成功的饲草料技术就是粗饲料处理技术及配套技术，这项浩大工程取得明显经济效益。十五年过去了，从全国范围内，专家们重新审视了“秸秆畜牧业”，提出了新的观点。     

双低菜籽粕在断奶仔猪日粮中的适宜添加量研究

[目的]探讨断奶仔猪日粮中双低菜籽粕的适宜添加量。[方法]选取长白（♂）与八眉猪（♀）杂交一代母猪与长白（♂）杂交所产三元杂交仔猪48头,随机分为4组,12头/组,预饲期5 d,然后进行28 d饲喂试验。第1、第2和第3组饲粮中双低菜籽粕的添加量分别为5%,7%和9%,第4组为对照组,不添加双低菜籽粕,平衡日粮中的消化能。[结果]Ⅱ组断奶仔猪平均日增重最高;第7天与Ⅲ组,第14天和第21天与Ⅲ、Ⅳ组,第28天与其他3组均差异显著（P〈0.05）。[结论]双低菜籽粕含量为7%时增重效果最好。     

β-受体激动剂类药物人工抗原合成方法研究进展

开展动物性食品中β-受体激动剂监测,对保障食品安全具有重要意义。免疫分析技术操作快速、灵敏度高、检测成本低,被广泛用于大批量畜禽产品的快速筛查。抗体特性是免疫检测的核心,而人工抗原合成的质量直接影响特异性抗体性能。本文主要综述了碳二亚胺法、活泼酯法、混合酸酐法、重氮化法、戊二醛法等β-受体激动剂类药物人工抗原合成方法,以及紫外光谱法、核磁共振法等人工抗原鉴定方法,以期为免疫分析等相关工作研究提供参考。