奥利亚罗非鱼雌激素β受体两种亚型cDNA的克隆、组织分布及雌激素对其表达的影响

采用RT-PCR和RACE技术,克隆了奥利亚罗非鱼β雌激素受体基因(estrogen receptorβ,ERβ)两种亚型的cDNA全序列(ERβ1和ERβ2)。荧光定量PCR分析雌雄奥利亚罗非鱼两种亚型的组织分布,并观察注射外源雌激素对雄性奥利亚罗非鱼下丘脑-垂体-性腺轴雌激素受体ERα和β(β1/β2)基因表达的影响。序列分析表明,ERβ1cDNA全长为4262bp,其中包含239bp5′非编码区,2349bp3′非编码区和1674bp的开放阅读框,共编码557个氨基酸。ERβ2 cDNA全长为2506bp,包含5′非编码区393bp,3′非编码区109bp,阅读框为2004bp,共编码667个氨基酸。氨基酸序列同源性分析显示奥利亚罗非鱼ERβ1与尼罗罗非鱼的相似性高达99.1%,而与鲈形目其它鱼类的相似性为82.6%～94.2%。ERβ2氨基酸序列与尼罗罗非鱼的相似性为98.7%,与大口黑鲈、虹鳟、底鳉及斑马鱼的相似性分别为81.8%、76.3%、64.7%和55.0%。在系统进化树上奥利亚罗非鱼的ERβ1和ERβ2分别与尼罗罗非鱼的相应受体聚类。奥利亚罗非鱼ERβ1/β2基因在所检测的10种组织中均有...     

尼罗罗非鱼、萨罗罗非鱼及其杂交子代胰岛素样生长因子(IGF-Ⅰb)基因3′cDNA末端克隆及序列分析

为探讨尼罗罗非鱼、萨罗罗非鱼及其杂交子代(Oreochromis niloticus ♀× Sarotherodon melanotheron ♂)IGF-Ⅰ基因结构差异,研究IGF-Ⅰ基因与此3种基因型罗非鱼耐盐性能差异之间的关系,通过3′-RACE的方法,从鳃的总RNA分别获得其IGF-Ⅰb基因的部分cDNA序列,长度分别为1076bp、1075bp和1079bp,包含完整的开放阅读框(ORF)546bp、一个终止密码及含polyA信号的3′UTR;ORF编码182个氨基酸,包括信号肽(44aa),成熟肽B区(29aa)、C区(10aa)、A区(21aa)、D区(8aa)及编码70aa的E区,二级结构为混合类型;与其他脊椎动物IGF-Ⅰb序列的序列相似度达75.8%～100%;成熟肽A、B区高度保守,C区第82位后缺失2aa,E区第131位和159位分别缺失3aa和1aa;萨罗罗非鱼在E133位发生Ala/Pro氨基酸残基替换,与耐盐性强的莫桑比克罗非鱼和画眉罗非鱼一致,推测IGF-Ⅰb基因E区选择性剪切与3种罗非鱼耐盐性能差异有关。     

奥利亚罗非鱼血清蛋白和组织同工酶电泳图谱的特异性研究

本文通过对奥利亚(Oreochromis aureus)、莫桑比克(Oreochromis mossambicus)和尼罗(Oreochromis niloticus)三种罗非鱼血清蛋白和心脏、眼睛、脑、骨骼肌和肝脏五种组织的乳酸脱氢酶(LDH),苹果酸脱氢酸(MDH)及酯酶(EST)三种同工酶电泳图谱的对比,比较了三种罗非鱼种和组织的特异性,找出了奥利亚罗非鱼的特异蛋白和特异酶带为种的鉴别及生化、遗传的研究提供了依据。     

兰州鲇MyoD基因的克隆与生物信息学分析

为研究兰州鲇(Silurus lanzhouensis)生长性状相关基因,运用RT-PCR、TA克隆和核酸测序等技术对兰州鲇MyoD基因的CDS区及全基因进行克隆和生物信息学分析。获得兰州鲇MyoD基因的完整CDS区序列810 bp(Gen Bank登录号:KT277551)及MyoD基因全序列1 210 bp(Gen Bank登录号:KT339175),包括部分5'端63 bp和3'端58 bp;ORF区含有3个外显子和2个内含子,外显子长度分别为510 bp、80 bp和220 bp,内含子长度分别为156 bp和123 bp,编码269个氨基酸残基组成的可溶酸性蛋白质;预测亚细胞定位MyoD主要分布于细胞核(56.5%),MyoD二聚体结构是一个螺旋-环-螺旋(b HLH)。基于12种鱼类MyoD基因CDS序列构建系统发育树及编码区同源性比较,分析结果表明,MyoD基因编码区在进化过程中比较保守,且兰州鲇MyoD与斑点叉尾、白鲶鱼、蓝鲶鱼之间存在较高的同源性。     

外源生长激素注射对尼罗罗非鱼GH-IGFs生长轴通路因子及MyoD基因表达的影响

为探究生长激素(GH)对鱼类肌肉生长影响的分子机理,应用外源GH注射尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)幼鱼,采用荧光定量PCR技术检测注射1~7周后GH试验组和对照组鱼的肝脏、肌肉中GH-IGFs生长轴通路因子(GHR1,GHR2,IGF-1,IGF-2)和肌肉中成肌分化因子基因(MyoD1,MyoD2)的mRNA表达变化。结果表明,外源GH注射后,肝脏、肌肉中GHR1 mRNA的表达水平均显著上调,GHR2 mRNA的表达水平均显著下调;肝脏、肌肉中IGF-1 mRNA、IGF-2 mRNA的表达水平均显著上调;肌肉中MyoD1 mRNA、MyoD2 mRNA的表达水平均显著上调(P0.05)。试验证实,肝脏和肌肉均为GH的效应器官,可能的作用途径为GH-GHR1-IGFs-MyoDs。     

罗非鱼养殖技术之三提高奥尼罗非鱼出苗率和雄性率的技术探讨

罗非鱼属约有100多个种和亚种,但主要的养殖对象只有十几种。尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)和奥利亚罗非鱼(O.aureus)自20世纪70年     

正反交奥尼罗非鱼形态性状差异及对体质量的影响

为探究不同杂交方式奥尼罗非鱼形态性状对体质量的影响,对埃及尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)与"夏奥1号"奥利亚罗非鱼(Oreochromisco aureus)正反交子代奥尼罗非鱼群体开展体质量(BW)与全长(TL)、体长(SL)、头长(HL)、体高(BD)、尾柄长(CPL)、尾柄高(CPD)、体厚(BWD)共7个形态性状测定与分析,判断影响奥尼罗非鱼体质量的主要性状,并建立体质量多元回归方程;采用单因素相关性分析、复相关分析、主成分分析等多元分析方法,比较了正反交奥尼罗非鱼的形态差异。结果显示,正交奥尼罗非鱼群体全长、体高和尾柄高3个性状对体质量产生主要影响,回归方程为YBW=-154.286+9.016XTL+10.065XBD+17.884XCPD;反交雌性奥尼罗非鱼群体全长和体高2个性状对体质量产生主要影响,回归方程为YBW=-92.582+7.415XTL+8.727XBD;反交雄性奥尼罗非鱼群体体长和体高2个性状对体质量产生主要影响,回归方程为YBW=-120.299+8.661XSL+16.590XBD。主成分分析构建了2个主成分,第1主成分主要代表TS、BDS、CDS、BWS和HS形态特征,第2主成分主要代表BS和CLS形态特征,对PCA1和PCA2作散点图可将正交雄鱼与反交雌鱼有效区分。研究表明,不同杂交方式、不同性别的奥尼罗非鱼影响体质量的形态特征均存在差别,在亲鱼挑选及子代选育工作中,建议采用多性状综合选育的方式,以提高选育培养结果的准确性和稳定性。     

罗非鱼性别相关微卫星标记的初步筛选

为分析罗非鱼群体的遗传多样性以及筛选与罗非鱼性别相关的微卫星标记。应用24对微卫星引物,使用常规PCR及聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法在两个尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)群体和两个奥利亚罗非鱼(O.aureus)群体中初步筛选到UNH931、GM128、GM201、GM258、GM597以及UNH898共6个与性别相关的微卫星标记。然后使用降落PCR以及毛细管电泳的方法在两个尼罗罗非鱼群体、两个奥利亚罗非鱼群体以及ZY 1、WY 1、YY 1和YY 2型罗非鱼群体中进一步扩增这6个微卫星标记,统计各群体的遗传多样性参数:6个微卫星标记在上述群体共297个样本中检测到95个等位基因,其大小在97~302 bp之间,各位点在各群体等位基因数在1~13个之间,各群体平均观测等位基因数为2.167~9.333,平均有效等位基因数为1.624~4.966,平均观测杂合度为0.324~0.983,平均期望杂合度为0.329~0.782,平均多态信息含量为0.275~0.753;两个尼罗罗非鱼群体、WY 1和YY 2群体达到高度多态(PIC>0.5),两个奥利亚罗非鱼群体、ZY 1和YY 1群体为中度多态(0.25相似文献   

吉富罗非鱼 MSTN 基因结构及其多态性与生长性状的相关性

通过PCR和基因组步移法,从吉富罗非鱼DNA中扩增出肌细胞生长抑制素(MSTN)基因及其5′调控区。该序列全长2413bp,含有3个外显子,2个内含子。5′调控区462bp,外显子Ⅰ379bp,外显子Ⅱ371bp,部分外显子Ⅲ145bp,内含子Ⅰ305bp,内含子Ⅱ751bp,编码区共编码298个氨基酸。5′调控区含有与肌肉特异性基因转录密切相关的转录调控元件E-box以及其他一些转录调控元件,如TATAbox,OCT1,AP1,AP4。通过随机测序法寻找SNPs(Signal nucleotide poly morphisms),获得了3个SNPs,但在群体筛选中,只有内含子Ⅱ内的1个SNPs表现多态性。同时测量了96尾(45♂,51♀)吉富罗非鱼的体质量、体长、体高、体厚,并将这些数据与MSTN基因的SNPs多态性进行相关性分析,研究发现MSTN基因内含子Ⅱ的728nt处G/T多态与吉富罗非鱼体型(体厚/体长、体高/体长)存在显著相关(P0.05)。这些研究结果表明,MSTN基因的SNPs可作为吉富罗非鱼育种的候选分子标记。     

奥利亚罗非鱼线粒体基因组全序列测定与系统进化分析

采用LA-PCR(long amplification polymerase chain reaction)扩增方法获得奥利亚罗非鱼(Oreochromis aureus)线粒体基因组全序列.分析表明,序列全长16 632 bp,包括13个蛋白质编码基因、22个tRNA基因、2个rRNA基因和1个长度为931 bp的主非编码区.A、T、G、C碱基的组成分别为27.89％、25.50％、15.62％、30.99％.基因排列与罗非鱼属的其他物种一致.13个蛋白质基因除COX1用TGT做起始密码子外,其他均以ATG为起始,终止密码子除COX2、Cyt b、ND4为不完整的T,其余基因均以典型的TAA做终止密码子.22个tRNA的二级结构都具有典型三叶草结构.系统发育分析显示,罗非鱼属与丽鱼科(Cichlidae)其他物种分开,聚为单系群,其中奥利亚罗非鱼与尼罗罗非鱼亲缘关系较近,莫桑比克非鱼和罗非鱼KM-2006亲缘关系较近.本研究旨在为进一步利用线粒体基因组分析罗非鱼群体遗传多样性、亲缘关系以及丽鱼科系统进化提供基础依据.     

MyoD,myogenin and proliferating cell nuclear antigen expression in growing Nile tilapia (Oreochromis niloticus L.)

In the present study, immunohistochemical and morphometric analysis was used to characterize variations in muscle growth performance during muscle fibre recruitment and hypertrophy. As in fisheries, fish were classified into four age stages: alevin 35 days (0.65±0.08 g); juvenile 60 days (13.67±1.35 g); adult 90 days (73.18±4.70 g) and adult 190 days (349.76±34.62 g). The number of nuclei expressing MyoD and myogenin was similar in alevin, juvenile and adult 90 days; however, in adult 190 days, the number of nuclei expressing myogenin was higher than the number expressing MyoD. The number of proliferating cell nuclear antigen‐stained nuclei in each stage was higher than MyoD and myogenin staining with peaks in alevin and adult 90 days. These data suggest that growth per se stimulated cellular proliferation and nuclei accretion of Nile tilapia muscle fibres in alevin, juvenile and adult 90 days. Muscle fibre differentiation was more pronounced in adult 190 days.     

Effect of hybridization on reproductive performance of Oreochromis karongae,Oreochromis shiranus and Oreochromis mossambicus

The study assessed the effect of hybridization on reproductive performance of Oreochromis karongae, Oreochromis shiranus and Oreochromis mossambicus for a period of 120 days. Number of eggs per batch, number of females spawned, relative fecundity, egg size, hatching period, hatchability and hatchling survival were assessed. The results revealed higher number of eggs per batch and relative fecundity in the crosses where O. shiranus and O. mossambicus were females than female O. karongae. The results also revealed that egg size, hatching period, hatchability and hatchling survival were species specific. Significant differences were noted for number of eggs and larvae produced by the three species (p < .05). Interspecific and pure crosses for the same female species did not differ significantly for the number of eggs per batch, relative fecundity, egg size, hatching period, hatchability and hatchling survival. However, number of female spawned was found to be higher in the interspecific crosses of female O. karongae than in pure cross of O. karongae. Findings from this study suggest that hybridization can be used to improve reproductive performance of O. karongae as the females spawned increased, and it is a value addition in aquaculture management of indigenous species.     

莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼耐盐性的初步研究

用人工配制的6个盐度咸水(0、15、25、30、35、40),对莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼耐盐性进行了初步研究。结果表明:在几种耐盐指标中,莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼的96小时半致死盐度分别为22．29和21．56;在除盐度为40外的其它各盐度梯度中,莫桑比克罗非鱼的50％成活时间和平均成活时间均高于荷那龙罗非鱼,但差异不显著 (p>0．01)。在对2种罗非鱼的盐度驯化过程中,各个驯化盐度梯度下,莫桑比克罗非鱼的死亡率均小于荷那龙罗非鱼的死亡率。     

罗非鱼养殖技术之三奥尼罗非鱼与淡水白鲳池塘混养技术

奥尼罗非鱼是雄性奥利亚罗非鱼和雌性尼罗罗非鱼杂交仔一代,具有适应性广、雄性率高、食性杂、饲料利用率高、抗病力强、群体生长快、产量高等优点,是一个优质高产的好品种,适合在各种水面进行养殖.淡水白鲳学名为短盖巨脂鲤,属脂鲤目、脂鲤科、巨脂鲤属,是热带和亚热带食用与观赏兼备的大型经济鱼类,具有体型大、生长快、食性广、病害少、耐低溶解氧、易起捕、好垂钓等优点,己成为池塘养殖的当家品种.     

Effects of Thermal and Thermo-Haline Shocks on Survival and Osmotic Concentration of the Tilapias Oreochromis mossambicus and Oreochromis aureus × Oreochromis niloticus Hybrids

Abstract.— The effects of thermal and thermo/haline shocks on the tilapias Oreochromis mossambicus and O. aureus × O. niloricus hybrids were investigated. Fingerlings were transferred abruptly from 25 C fresh water to fresh water or salt water (26 ppt) maintaining temperatures of 15, 20, 30 and 35 C. In fresh water, fish survival was not affected by temperature shock, but they suffered from a chill coma and developed fungal infection at 15 C. In salt water, thermo-haline shock did not affect the survival of O. mossambicus , while the survival rates of tilapia hybrids were 6.7, 100, 100, 70 and 59.7% at 15, 20, 25, 30 and 35 C, respectively. Plasma osmotic concentrations of O. mossambicus transferred to 15 and 35 C salt water were quickly and sharply increased, but gradually decreased to lower levels. Osmotic concentrations of tilapia hybrids were also increased, but never returned to their initial (lower) levels over one week. This study revealed that these fishes are more tolerant to high rather than low temperature shocks and O. mossambicus are more resistant to thermo-haline shocks rather than tilapia hybrids. It also indicated that thermo-haline shocks should be minimized during fish transportation and acclimation.     

尼罗与奥利亚罗非鱼对池塘蓝藻水华及水质影响的研究

利用尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼进行了池塘抑藻试验,采用血球计数板测定水体中的微囊藻密度,并对水体理化性质进行了检测分析。试验结果表明,罗非鱼能有效消减水体中蓝藻生物量,降低水体藻毒素浓度,并对水体TN、TP产生一定影响。其中奥利亚罗非鱼试验组蓝藻初始密度为1．53-108cells／L,下降至0．86-108eells／L,降低43．79％;尼罗罗非鱼组蓝藻初始密度为1．54-108cells／L,下降至O．51×108cells,L,降低66．88％。水体总磷含量无显著变化,总氮含量有所下降,水体微囊藻毒素MC—LR含量随着蓝藻密度的下降而降低,并讨论了尼罗与奥利亚罗非鱼摄食抑制蓝藻的摄食抑制及其对水质的影响。     

罗非鱼养殖技术之一大水面网箱养殖奥尼罗非鱼技术

大水面是渔业生产重要的水资源,发展大水面渔业具有广阔的前景。为此,作者于2005年在24万亩的东江湖水面中开展了网箱养殖奥尼罗非鱼试验,获得成功并取得了很好的效果和效益。一、大水面养殖条件 1．地理位置东江湖位于郴州市所辖的资兴市境内,耒水上游,于 1986年关闸蓄水,集雨面积4719km2,正常水位24万亩,库容81亿方,为湖泊与山谷型兼容的大型水库。 2．地形地貌东江湖周围的资兴市境内以山地为主,东南高,西北低,土壤以红、黄土壤为主,丘陵、岗地、平地交错。其中,平     

不同品系尼罗罗非鱼致死低温的研究

在室内自然降温条件下，研究了三个品系尼罗罗非鱼（吉富品系，“７８”品系，“８８”品系）对低温的耐受力，计算得出每个品系的半致死低温，并对降温过程中尼罗罗非鱼行为活动的变化进行了观察。试验结果表明，在上海地区，当温度降低到１１℃时，罗非鱼开始死亡，到７．４℃时，全部死亡。吉富罗非鱼死亡温度范围是１１℃￣８．４℃，“７８”品系是９．８￣７．４℃，“８８”品系是１１℃￣７．４℃。对三个品系半致死低温的研     

荷那龙罗非鱼、橙色莫桑比克罗非鱼及其杂交F1呼吸耗氧率的初步研究

用呼吸室法对荷那龙罗非鱼、橙色莫桑比克罗非鱼及其杂交F1的呼吸耗氧率、窒息点进行了试验。试验结果表明:①水温为16~32℃时,平均体重为10.40~116.28 g的荷那龙罗非鱼的耗氧率在0.07~0.61 mg/g.h,平均体重为18.98~102.53 g的橙色莫桑比克罗非鱼的耗氧率范围是0.06~0.43 mg/g.h,平均体重2.24~133.82 g的杂交F1莫荷鱼的耗氧率范围是0.06~0.65 mg/g.h;3种试验鱼的耗氧率随着温度的升高而增加;耗氧率与鱼体规格呈负相关。②3种实验鱼的耗氧率均为白天高于夜间。③水温24℃时,3种试验鱼的溶氧临界窒息点分别是:荷那龙罗非鱼0.33~0.55 mg/L,橙色莫桑比克罗非鱼0.24~0.31mg/L,莫荷鱼为0.38~0.43 mg/L。