响应面法优化鲢鱼蛋白酶解液制备工艺的研究

[目的]研究鲢鱼蛋白酶解液制备工艺的最佳参数,以期获得水解度高、风味良好的美拉德反应基液。[方法]通过Flavourzyme（风味蛋白酶）与其他蛋白酶复配筛选出最佳组合,综合考察影响酶解反应的4个因素：温度、时间、pH值和酶添加量,以水解度（DH）为响应值,采用Box—Benhnken响应面分析法确定最佳反应条件。[结果]以Flavourzyme和Protamex（复合蛋白酶）复配（3：1）的组合水解度最高,酶解最佳反应条件为：温度55℃,时间7．5h,pH值7．7,酶添加量2．4％,水解度可达54．18％。[结论]采用响应面法优化工艺制备得的酶解液色泽较浅,鱼香味浓郁,且无明显苦味,可以作为生产海鲜调味品的基液。     

果胶酶酶解大枣发酵产酯的研究

[目的]探索果胶酶酶解大枣发酵产酯的最佳酶解工艺条件。[方法]以枣和水或豆芽汁为发酵底物,乙醇为中间产物辅料,设计L9（34）枣香料酶解发酵产酯生产最佳工艺条件试验。4因素分别为酶量、料液比、酶解温度、酶解时间,每个因素设3个水平。以产酯量作为评定指标。通过单因素试验确定底物和乙醇添加量。[结果]发酵底物用豆芽汁加枣,乙醇添加量为3％时,果胶酶较佳的酶解条件为果胶酶加入量0．2％,料液比1：5（W／W）,酶解温度45℃,酶解时间2h,乙醇添加量为3％,枣香料产酯率最高,可达5．63mg／ml。[结论]为利用酶和产酯微生物定向开发新的烟用枣香料提供了依据。     

西兰花茎叶蛋白酶解工艺优化

[目的]采用响应面法优化西兰花茎叶蛋白酶解工艺条件。[方法]以西兰花茎叶蛋白为原料,选取pH、温度、加酶量和底物浓度为自变量,水解度为响应值,在单因素试验基础上,运用Box-Behnken中心组合试验设计和响应面(RSM),确定最佳酶解工艺参数。[结果]碱性蛋白酶水解西兰花茎叶蛋白最佳的酶解条件是pH10、温度55℃、加酶量2 800 U/g、底物浓度4%。[结论]碱性蛋白酶对西兰花茎叶蛋白酶解工艺优化合理、可行,该研究为西兰花茎叶蛋白的综合利用提供了参考。     

翡翠贻贝降血压肽酶解制备工艺研究

[目的]研究翡翠贻贝蛋白酶解的工艺条件,为后期开发保健食品和药品提供基础。[方法]以ACE抑制率为指标,在单因素的基础上通过正交试验研究温度、pH、料液比和酶与底物的质量比确定酶解工艺。最后以ACE抑制率和水解率2个指标研究酶解时间。[结果]最佳酶解工艺为:碱性蛋白酶,酶解温度为50℃,酶解pH为9.5,料液比为1∶4(g∶mL),酶与底物质量比为1%,酶解时间为2 h。[结论]碱性蛋白酶可以酶解翡翠贻贝得到翡翠贻贝降血压肽,此酶解方法简单、可行。     

酶解法提取竹笋中不溶性膳食纤维研究

州[目的]研究利用酶解法提取竹笋不溶性膳食纤维。[方法]采用正交试验设计对竹笋不溶性膳食纤维的提取条件进行了研究。[结果]各因素对竹笋不溶性膳食纤维提取影响程度依次为：α-淀粉酶〉酶解时间〉木瓜蛋白酶〉pH值〉料水比〉纤维素酶〉酶解温度;竹笋不溶性膳食纤维提取条件的最佳组合为：料水比l：40,α-淀粉酶1600U／g底物,木瓜蛋白酶3000U／g底物,纤维素酶4000U／g底物,pH值5．0,酶解温度55℃,酶解时间1．5h。[结论]筛选出了影响膳食纤维提取的主要影响因素,得到了竹笋膳食纤维酶解法的最佳条件,为进一步改良和优化膳食纤维的成分和生理功能提供了科学依据。     

白假丝酵母脂肪酶CaLIP5在毕赤酵母X33中的优化重组表达

[目的]研究新的脂肪酶及优化脂肪酶发酵培养条件。[方法]在毕赤酵母X33系统中重组表达白假丝酵母脂肪酶CaLIP5。利用响应面分析法,构建了CaLIP5的酶活回归方程。[结果]由响应面分析可知,在温度25．71oC,pH8．33,酵母提取物浓度1．28％和葡萄糖浓度4．06％时,预测最大酶活为8．33U／ml。试验验证酶活为9．24U／ml。实际试验值与模型预测值基本一致。优化后的酶活提高了22．22％。[结论]在优化的培养条件下,可以获得毕赤酵母X33重组表达CaLIP5的最大酶活。     

螺旋藻蛋白酶解剂的筛选与优化

[目的]筛选并优化螺旋藻蛋白酶解剂.[方法]采用酶解法初步研究了中性蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、碱性蛋白酶4种蛋白酶对螺旋藻蛋白质的水解效果,同时研究了底物浓度和酶的添加量对水解率的影响.[结果]结果表明,蛋白酶按酶解螺旋藻蛋白质的水解率,可由高到低依次排列为:碱性蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶.通过对酶解条件进行优化,发现碱性蛋白酶的作用效果受pH影响最大,最高水解率为60.5％(底物浓度20 g/L、E/S=4％、pH =8.9、55℃、酶解5 h).同时得出,碱性蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶的最佳底物浓度均为20 9/L,最佳酶添加量均为4％,而风味蛋白酶的最佳底物浓度为20 g/L,最佳酶添加量为2％.[结论]研究可为后续功能性多肽的提取利用提供参考依据.     

响应面法优化鳙鱼鱼肉蛋白的酶解工艺

[目的]为鳙鱼及其他淡水鱼鱼肉蛋白资源的高价值利用提供指导。[方法]首先比较6种不同蛋白酶水解鳙鱼鱼肉蛋白的能力,找出酶解能力最高的蛋白酶。通过响应面分析法优化酶解鳙鱼蛋白的工艺条件,探讨酶解过程中酶底物浓度比（[E]/[S]）、pH值和温度对酶解物水解度的影响。并分析酶解物的氨基酸组成。[结果]碱性蛋白酶水解鳙鱼鱼肉蛋白的能力最强,蛋白回收率最高。其酶解鳙鱼鱼肉蛋白的最佳工艺条件为：[E]/[S]1.7%、pH值9.7,温度57℃。鳙鱼鱼肉蛋白在该条件下水解度理论值为25.24%。氨基酸组成分析结果表明,该工艺下所得酶解物的氨基酸组成与鳙鱼鱼肉蛋白的氨基酸组成差别不大,酶解物很好地保持了鱼肉蛋白的特定氨基酸模式。[结论]优化了镛鱼鱼肉蛋白的酶解工艺。     

象拔蚌酶解制备抗氧化肽的工艺研究

[目的]探讨酶解象拔蚌蛤肉制备抗氧化肽的最佳工艺条件。[方法]采用复合蛋白酶对象拔蚌蛤肉进行酶解获得抗氧化肽,以羟自由基清除率及蛋白水解度为指标,通过单因素试验与响应面分析法对酶解工艺条件进行优化。[结果]象拔蚌蛤肉的最佳酶解工艺条件为料水比1∶11.11,加酶量3 000 U/g,酶解时间1.2 h,酶解温度55℃,pH 7.52;在该条件下,酶解液获得较高的蛋白水解度,同时对羟基自由基和DPPH自由基显示出很好的清除效果,其EC50值分别为11.26和37.75 mg/ml。[结论]该研究为象拔蚌保健食品的开发提供了依据。     

酶解制备水溶性大豆多糖的研究

[目的]采用植物复合水解酶水解不溶性豆渣粉制备水溶性大豆多糖（SSPS）,研究最佳制备工艺。[方法]用3,5-二硝基水杨酸比色法测定总糖和还原糖,通过单因素试验研究料液比、pH、温度、酶添加量和水解时间对ssPs得率的影响,在单因素试验的基础上设计正交试验选出优化的因素组合。[结果]各因素对SSPS得率的影响大小依次为水解温度〉水解时间〉酶添加量〉pH,在料液比l：20（g：m1）、酶添加量1．2％、pH4．5、温度50℃、提取时间25h的最佳条件下,SSPS得率为8．89％。[结论]酶解制备SSPS工艺设备简单,条件温和,但是耗时较长。     

木瓜蛋白酶水解罗非鱼蛋白质的工艺研究

[目的]探讨采用木瓜蛋白酶水解罗非鱼蛋白质制备多肽水解液的方法。[方法]通过单因素试验研究了不同因素对木瓜蛋白酶水解罗非鱼蛋白质的影响,并以水解度为指标通过正交试验确定了木瓜蛋白酶水解罗非鱼的最佳水解工艺。[结果]单因素试验表明,在酶解时间约5h、底物浓度为4%、加酶量约5500U/g、pH值为7.0～7.5范围内,温度为50℃时,木瓜蛋白酶水解罗非鱼效果较好。正交试验表明,3因素的影响顺序为:加酶量>底物浓度>水解时间;最佳水解工艺为:水解液pH值7.5,加酶量为5500U/g,底物浓度为4%,温度50℃,水解6h,在此条件下水解度可达到37.89%。[结论]采用木瓜蛋白酶进行水解可获得较高水解度的酶解液,且鱼香浓郁,颜色正常,可用于制作调味品、口服液等。     

菜籽粕蛋白肽制备工艺条件优化

试验改进了菜籽粕蛋白的酶解工艺,并对改进后的工艺条件进行了优化。采用2709碱性蛋白酶水解菜籽粕蛋白,分别考察了pH值、酶用量、酶解时间、温度、底物浓度对蛋白回收率的影响规律,在此基础上,利用响应面分析法对菜籽粕蛋白的酶解条件进行了优化。结果表明,2709碱性蛋白酶水解菜籽粕蛋白的较优条件为pH11.5、温度50℃、底物浓度4%、水解时间173min、酶用量5778U·g-1,此时蛋白回收率可达87.18%。     

复合酶法制备马铃薯微孔淀粉的工艺研究

[目的]研究糖化酶与α-淀粉酶制备马铃薯微孔淀粉的工艺。[方法]以马铃薯淀粉为原料,淀粉水解率和油脂吸附率为评价指标,考察反应温度、酶配比[糖化酶∶α-淀粉酶(W/W)]、加酶量、底物量浓度[淀粉∶溶液(W/V)]、缓冲液pH和反应时间6个因素对马铃薯淀粉微孔化的影响。[结果]马铃薯微孔淀粉的最佳制备工艺条件为反应温度45℃,酶配比6∶1,加酶量1.0%,底物量浓度0.14g/ml,缓冲液pH 4,反应时间8 h;在该条件下制得的微孔淀粉的油脂吸附率为70.2%,淀粉水解率为34.16%。[结论]该研究为微孔淀粉的开发和利用提供了依据。     

响应面法优化脱酚棉籽蛋白双酶水解的工艺条件

研究Alcalase水解蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶分步水解脱酚棉籽蛋白的最佳条件。以水解度为评价指标,采用Plackett-Burman(PB)设计和Box-Behnken响应面分析法对影响双酶分步水解棉籽蛋白的9个工艺条件进行筛选优化。双酶分步水解脱酚棉籽蛋白的最优操作条件为：先用Alcalase水解蛋白酶在底物浓度(w/v) 9.66%,温度60.5℃、pH 8.0、酶用量25000 U/g的条件下水解150 min,灭酶后再用Flavourzyme风味蛋白酶在温度50℃、pH 6.0、酶用量26576 U/g的条件下水解120 min。在此条件下水解液的水解度可达到42.73%。试验结果可为棉籽蛋白多肽的开发利用提供依据。     

菜籽油常压水解制备脂肪酸的研究

[目的]以菜籽油作为原料,在常压下水解制备脂肪酸。[方法]研究在常压下温度（95±5）℃水解菜籽油制备脂肪酸,讨论油水比、催化剂（浓硫酸）、乳化剂（十二烷基苯磺酸钠）用量和时间对菜籽油水解反应的影响。[结果]得出最佳反应条件为：乳化剂用量4％（W/W）,催化剂量15％（W／W）,油水比1：2,水解时间17h。在该条件下,水解产物的酸值达180．3mg／g。[结论]利用菜籽油在常压下进行水解反应,能制备出工业上常用的脂肪酸,而且转化率可达93．8％。     

根霉Yc1发酵豆渣产纤溶酶的研究

[目的]研究根霉Yc1以豆渣为原料经液态发酵产生纤溶酶的发酵条件。[方法]采用单因素试验与正交设计方法对根霉Yc1培养基及发酵工艺条件进行优化。[结果]根霉Yc1发酵产酶的适宜培养基组成为：麸皮5．00％,豆渣粉3．00％,ZnCl2 0．03％,MgSO。0．15％,Na：HPO4 0．05％;适宜的发酵工艺条件为：发酵温度32℃,初始pH值7．0,250ml三角瓶装液量60ml,摇瓶转速180r／min。在优化条件下培养60h,纤溶酶的发酵效价可达176．2U／ml,比优化前提高92．3U／ml。[结论]以豆渣为主要原料所产的纤溶酶可能成为一种安全、低毒的溶栓剂,其生产成本低,可为大豆综合利用提供新的思路。     

改善大米蛋白溶解性的研究

[目的]研究Alcalase蛋白酶对大米蛋白的水解作用以改善大米蛋白的溶解性.[方法]通过单因素试验,研究pH、温度、酶浓度、底物浓度等因素对Alcalase蛋白酶酶解大米蛋白的影响,通过正交试验确定Alcalase蛋白酶水解大米蛋白的最佳水解条件.[结果]Alcalase蛋白酶水解大米蛋白的最佳水解条件是pH 8.0、温度55℃、酶浓度1 200 U/g、底物浓度4％、水解时间2h,此条件下大米蛋白的溶解度为71.25％.[结论]酶解后大米蛋白的溶解度显著提高.     

Study on the Technologic Optimization for Hydrolysis of Silver carp By-products

The hydrolysis process for Silver carp by-products was studied. Protein hydrolysate was prepared with proteolytic enzyme, Alcalase. Hydrolysis conditions were optimized by the regression model of three factors five levels quadratic rotation perpendicular regressive design. The optimum hydrolysis conditions of hydrolyzing the protein of Silver carp by-products were determined to be concentration of enzyme (E/S) 3.33%, pH 8.54, hydrolyzing temperature 58℃, reaction time 90 min, concentration of substrate 8%. Nitrogen recovery was more than 75%.     

正交设计优选薏苡茎多糖的酶提取工艺

[目的]确定薏苡茎多糖的最佳酶提取工艺。[方法]利用纤维素酶从薏苡茎中提取多糖,采用正交试验方法进行条件优选,并用分光光度法对提取物进行多糖的含量测定。[结果]检测波长为490 nm;葡萄糖含量在0.010～0.100 mg/ml范围内与吸光度呈良好的线性关系(R=0.999 8);最佳酶提取工艺为:pH值为5,酶用量为6.0 ml,反应温度为40℃,酶解时间为150 min;在此条件下,薏苡茎多糖的平均提取率为19.62%,RSD为0.21%。[结论]优选出的酶提取工艺合理,经济,可行。     

复合酶水解鸡肉工艺条件的优化

[目的]为进一步改善鸡胸肉的加工工艺奠定基础。[方法]以蛋白水解度、水解液的鸡香和苦味为指标,比较P+N复合酶、胰蛋白酶、Alcalase、木瓜蛋白酶和精制中性蛋白酶在各自适宜条件下对鸡肉的水解效果。研究液固比、初始pH值、反应温度和反应时间对P+N复合酶水解度的影响,探索P+N复合酶水解鸡肉的最佳工艺条件。[结果]P+N复合酶为水解鸡肉的最佳酶,其水解效果明显优于单酶。各因素对水解度影响程度依次为反应温度>反应时间>液固比>初始pH值,而反应温度对水解反应的影响显著。P+N复合酶水解鸡肉的最佳工艺条件为:加酶量0.2%、反应温度50℃、液固比31:、初始pH值7.0、反应时间8 h。[结论]在该条件下,鸡肉水解蛋白液的水解度达51%～54%,且鸡香浓郁、无苦味。