PDTC和顺铂对人鼻咽癌细胞株CNE1、CNE-GL、CNE2Z的联合作用

目的观察PDTC和顺铂（DD）对人鼻咽癌细胞株CNE1、CNE1-GL、CNE2Z的联合抑制效应。方法单独及联合应用PDTC和DDP处理后,采用MTT法测定CNE1、CNE1-GL、CNE2Z细胞的生长抑制效应。采用直线回归法求出中效浓度,利用中效原理计算联合用药指数。结果在实验剂量范围内,单独及联合应用PDTC和DDP的生长抑制效应具有剂量依赖性。对CNE1细胞,药物效应（抑制率）大于85%时,具有协同作用（CI〈l）;对CNE1-GL、CNE2Z细胞,两药合用具有拮抗作用。结论单独及联合应用PDTC和DDP对CNE1、CNE1-GL、CNE2Z具有生长抑制作用,两药联用对CNE1细胞具有协同作用。     

血清、脂质体及转染时间对反义PKCα转染CNE-2Z的影响

目的：探讨血清、脂质体及转染时间对反义PKCα转染CNE—2Z的影响。方法：脂质体转染反义PKCα，MTT法测细胞生长。结果：(1)l6．0mg/L的反义PKCα可明显抑制细胞生长(P＜0．01)，但5％(体积分数)的小牛血清培养液对转染所致细胞生长抑制无明显影响(P＞0．05)。(2)1．0mg/L与0．5mg/L的脂质体转染效果差异无显著性(P＞0．05)。(3)转染反义PKCα l9h后，细胞生长指数有非常显著降低(P＜0．01)。结论：用1．0mg/L的脂质体、5％的小牛血清培养液转染16．0mg／L的反义PKCα 19h可有效地抑制CNE—2Z的生长。     

Lipofectin介导bcl-xL反义寡核苷酸对鼻咽癌CNE-2Z细胞的影响

目的：探讨阳离子脂质体Lipofectin对bcl-xL反义寡核苷酸进入CNE－2Z细胞的影响。方法：采用阳离子脂质体Lipofectin介导bcl-xL反义寡核苷酸转染CNE－2Z细胞，应用MTT法观察Lipofectin介导前后对CNE－2Z增殖的影响；RT－PCR检测处理前后bcl-xL mRNA表达水平。结果：Lipofectin介导bcl-xl反义核酸可提高反义核酸对细胞的增殖抑制率；Lipofectin介导bcl-xL反义核酸可增强反义核酸下调bcl-xL mRNA表达水平的能力。结论：Lipofectin可促进反义核酸转染进入细胞。     

鼻咽癌细胞株CNE1转染EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)后对放射敏感性的影响

目的：研究EB病参LMP1对鼻咽癌高分化细胞株CNE1放射敏感性的影响。方法：用电转染技术将带有EB病毒LMP1基因的真核表达质粒导入鼻咽癌高分化细胞株CNEl，用免疫组化法及Western blot检测LMPl的表达；LMP1对CNEl细胞放射敏感性的影响采用^60钴治疗仪照射后集落形成实验进行观察。结果：CNE1细胞抹转染LMP1基因后LMPl蛋白呈阳性表达，对照放射敏感性比未转染株的细胞存活事低(P＜0．01)。结论：LMPl能增加鼻咽癌细胞的放射敏感性，这种作用可能与LMP1的促细胞转化，抑分化有关。     

大豆黄酮对产蛋后期绍兴鸭生产性能及血清中一些激素水平的影响

基础日粮中分别添加3mg.kg^-1(Da1组）和5mg.kg^-1(Da2组）大豆黄酮饲喂产蛋后期绍兴鸭。 结果表明，Da1组的产蛋率提高11．57％（P＜0．01，Da2组产蛋率提高13．33％（P＜0．01），两组平均蛋重都极显增加，日产蛋量分别提高了13．3％（P＜0．01）和16．61％（P＜0．01），料蛋比分别降低了9．40％（P＜0．01）和11．41％（P＜0．01），并且Da2组的平均蛋重和日产蛋量均显于高Da1组。提示大豆黄酮能显提高产蛋后期绍兴鸭产蛋性能，并呈现剂量效应，两试验组绍兴鸭体重降低幅度极显低于对照组，而卵巢重大于对照组，大卵泡数没有差异。Da1组血清生长激素（GH）水平提高了37．5％（P＜0．05），胰岛素样因子－1（IGF－1）水平无显变化，Da2组血清GH水平提高了40．00％（P＜0．05），IGF－1水平提高了10．54％（P＜0．05）。两试验组雌二醇（E2）水平均无显变化，血清GH和GF-1水平的相应变化表明，大豆黄酮可以通过改变生长轴激素对动物生长轴激素对生物生殖功能发挥重要的调节作用。     

山羊和水牛感染肝片吸虫后的细胞免疫研究

本研究采用间接法检测了山羊和水牛人工感染肝片吸虫后外周血液中淋巴细胞增殖能力，自然杀伤（NK）活性和分泌白细胞介质－2（IL－2）的水平，结果表明两组山羊（分别一次感染200或500个囊蚴）感染后的淋巴细胞转化率呈显著下降趋势（P＜0．05，或P＜0．01），水牛（每头慢性感染1200个囊蚴）的淋巴细胞转化率呈显著升高趋势（P＜0．05），未感染水牛的NK活性比山羊的高，感染水牛的NK活性无显著的变化，感染山羊的NK活性有两次高峰，未感染水牛的IL－2水平比山羊高，感染水牛和山羊的淋巴细胞分泌IL－2的水平都有所升高（P＜0．05；或P＜0．01），而感染水牛和山羊的淋巴细胞在体外对重组牛IL－2（r-IL-2)的增殖反应降低，这表明还存在某些因素影响着IL－2参与到TH1细胞群保护性免疫中来，总之，水牛比山羊对肝片吸虫的天然免疫力强，肝片吸虫的感染导致出山羊细胞免疫呈抑制状态，而水牛保持了较高水平的细胞免疫能力。     

顺铂对鼻咽癌细胞株端粒酶活性和凋亡的影响

目的：研究抗癌药顺铂对5株鼻咽癌细胞端粒酶活性和凋亡的影响．以探讨端粒酶活性水平与鼻咽癌的关系及顺铂诱导鼻咽癌细胞凋亡的可能机制，为端粒酶可能成为一种很好的鼻咽癌治疗靶点提供实验依据。方法：用TRAP—ELISA的方法定量检测5株鼻咽癌细胞在顺铂处理前后的端粒酶活性水平，观察细胞形态及生长状态．以流式细胞仪分析细胞周期的改变并检测凋亡。结果：5株鼻咽癌细胞端粒酶均呈阳性，其中LTRs—LMP细胞株端粒酶活性水平最高，高分化细胞株CNE—1端粒酶活性水平低于低分化细胞株CNE—2Z、HNE—2。经顺铂处理后5株鼻咽癌细胞端粒酶活性明显受抑制、细胞形态发生明显改变，出现细胞凋亡。结论：端粒酶的活化与鼻咽癌密切相关。临床常用化疗药物顺铂可能是通过在S期抑制端粒酶活性并诱导鼻咽癌细胞凋亡而发挥杭癌作用的。因此我们认为端粒酶可以作为鼻咽癌的一个治疗靶点。     

小鼠卵母细胞的电激活及胚胎电融合

为提高核移植的效率，采用SHIMADZU生产的SSH－2电融合仪进行小鼠卵母细胞电激活及2－细胞胚胎电融合，结果表明：（1）不同脉冲的卵激活率有极显著差异（P＜0．01），在2次脉冲和30μs的脉冲宽度的条件下，脉冲强度以0．1kV/cm最好，激活率达76．9％；（2）不同脉冲强度、脉冲次数和脉冲宽度的胚胎融合率亦有极显著差异（P＜0．01），最佳融合参数为0.1kv/cm,30μs的脉冲宽度及2脉冲，胚胎融合率达84．6％。     

罗曼蛋鸡在冷、温季对饲粮养分转化率的比较研究

测定500只罗曼蛋鸡（23－31周龄）分别在冷季（1997－01－01－1997－03－03,鸡舍温度－4．5－10．2℃,平均4．3℃）和温季（1997－04－01－1997－06－01,鸡舍温度12．8－27．1℃,平均20．7℃）对饲粮养分转化为蛋相应成分的效率,结果表明,鸡在温季对饲粮绝大多数种类养分的转化率都显著（P＜0．001或P＜0．01或P＜0．05）地高于鸡在冷季对饲粮养分的转化率。     

中草药添加剂对鸡蛋胆固醇含量的影响

采用红曲、金银花、杜仲、水飞蓟、山楂等中草药组成复方制剂添加于蛋鸡日粮中观察对鸡蛋胆固醇含量的影响。将试验蛋鸡随机分为3组，每组4个重复，试验期5周，试验I组添加500mg/kg，试验Ⅱ组添加250mg/kg中草药制剂，对照组不添加。结果表明：①日粮中添加中草药制剂蛋黄胆固醇浓度（mg/g蛋黄）I、Ⅱ组比对照组分别降低25．4％（P＜0．01）和17．4％（P＜0．05）；②I、Ⅱ组极显著降低了蛋鸡血浆总胆固醇（P＜0．01）、LDL－C（P＜0．01）和VLDL（P＜0．01）水平，提高了HDL－C（P＜0．01）水平；③中草药制剂明显改善了鸡蛋脂肪组成：亚油酸含量（％）I、Ⅱ组比对照组分别提高24．2％（P＜0．01）和17．1％（P＜0．05），亚麻酸含量（％）I、Ⅱ组比对照组分别提高44％（P＜0．01）和36％（P＜0．01）；④3组之间料蛋比无明显差异，但试验组显著降低了产蛋率（P＜0．05），I组有进一步降低产蛋率趋势。试验研究证明，中草药制剂具有显著降低鸡蛋胆固醇含量，改善脂肪成分的作用。建议日粮中用量为250－500mg/kg。     

尿激酶型纤溶酶原激活剂系统在鼻咽癌细胞系及其两个克隆株中的表达和意义

目的：研究尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)系统3种主要成分(uPA、uPAR、PAI—1)在一鼻咽癌细胞系(CEN—2Z)及其它的两个克隆株(CNE—2Z—H5、CNE—2Z—H5—9)中的作用。方法：应用逆转录聚合酶反应(RT—PCR)方法检测uPA系统各因子在基因转录水平的表达。结果：uPA，uPARmRNA在CNE—2Z—H5—9中表达最高，在CNE—2Z中表达最低；PAI—1mRNA在CNE—2Z—H5—9中无表达，在CNE—2Z，CNE—2Z—H5有表达，但差异无显若性。结论：uPA、uPAR可能促进鼻咽癌细胞侵袭、转移，PAI—1可能起抑制作用。     

EBV感染对人鼻咽癌细胞株形态参数和DNA含量的影响

目的：观察ＥＢＶ体外感染对不同分化不同分化状态鼻咽癌细胞株形态参数和ＤＮＡ含量的影响。方法：应用ＰＣＲ法检测ＥＢＶ基因、免疫组化和图像分析仪分别检测了ＥＢＶ和ＥＢＶ＋ＴＰＡ对ＣＮＥ－１和ＣＮＥ－２Ｚ细胞Ｃｋｐａｎ表达及形态参数和ＤＮＡ含量的影响。结果：（１）ＥＢＶ在体外可感染ＣＮＥ－１细胞；（２）ＥＢＶ感染ＣＮＥ－１细胞使其Ｃｋｐａｎ表达降低，胞面积籴小和核浆比升高及ＤＮＡ含量明显减少（Ｐ〈０．０     

人低分化鼻咽癌(CNE-2Z)细胞膜电位及其形成的离子机制

用玻璃微电极细胞内记录方法,对体外培养的人低分化鼻咽癌(CNE-2Z)细胞膜电位及其形成机制的研究结果表明:CNE-2Z细胞膜电位与正常鼻咽上皮细胞相比,负值明显增大(P<0.01),变异系数也大,且分布弥散。CNE-2Z细胞膜电位负值与培养液K~+浓度对数值接近呈反比关系。而培养液Na~+、Ca~(2+)、Cl~-浓度提高时,膜电位无显著改变。提示K~+外流是形成CNE-2Z细胞膜电位的主要离子基础。     

蛋白激酶C抑制剂对CNE—2Z细胞周期的影响

目的：蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂诱导ＣＮＥ－２Ｚ细胞凋亡时细胞周期的观察。方法：ＰＫＣ催化区抑制剂Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｉｎｅ（ＳＴ）和调节区抑制剂Ｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ（ＳＳ），终浓度分别为１×１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ和４×１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ，诱导ＣＮＥ－２Ｚ细胞２４ｈ，用流式细胞仪（ＲＣＭ）分析。结果：诱导组细胞周期与对照组比较，ＳＴ使细胞Ｇ１和Ｓ期明显减少及Ｇ２期明显增加，（Ｐ〈０．０１），ＳＳ使     

益气解毒方对鼻咽癌CNE2细胞增殖的影响

目的 研究益气解毒方抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖的效应。方法 采用实时无标记细胞功能分析技术（real-time unlabeled cell function analysis technique, RTCA）动态监测不同浓度（0.125、0.250、0.500、1.000 mg/mL的益气解毒方水提物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的影响;采用CCK-8法检测不同浓度益气解毒方水提物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖能力的影响;通过高通量细胞成像多功能检测系统Cytation5监测不同浓度益气解毒方水提物对鼻咽癌CNE2细胞增殖形态的影响;采用Western Blot技术检测不同浓度益气解毒方水提物对鼻咽癌CNE2细胞增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA表达的影响。结果 RTCA 和 CCK-8 法实验结果显示,与空白对照组比较,益气解毒方水提物可以明显抑制鼻咽癌CNE2细胞的增殖,而且随着益气解毒方水提物的作用时间越长,其抑制效应越显著（P<0.05）;Cytation5结果显示,与空白对照组比较,不同浓度益气解毒方水提物处理CNE2细胞后,细胞形态发生了明显变化,且浓度越高,作用时间越长,细胞膜皱缩,细胞核质浓缩、破碎更明显;Western Blot结果显示,与空白对照组比较,益气解毒方水提物能明显抑制CNE2细胞中增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA的表达（P<0.05）。结论 益气解毒方水提物能明显抑制鼻咽癌细胞增殖,该效应与其抑制增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA的表达有关。     

双氧水对鼻咽癌细胞生长特性的影响及其机制的初步研究

目的:观察H2O2对人低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)生长、增殖能力的影响,并探讨其可能机制。方法:用M TT及平板克隆形成实验、W estern B lot等检测H2O2诱导CNE-2Z后增殖能力、EGR-1、p53、p16、Cyclin D1的表达。结果:不同浓度H2O2可不同程度地抑制CNE-2Z细胞的生长增殖能力,同一时间点各实验组细胞抑制率相比差异有统计学意义,抑制率与H2O2浓度间表现出明显的剂量-效应关系。平板克隆形成实验的抑制率较M TT更明显。CNE-2Z无EGR-1、p16蛋白表达,可见p53、Cyclin D1蛋白表达;诱导培养后EGR-1、p53、Cyclin D1蛋白表达明显增加。结论:一定浓度的H2O2能抑制CNE-2Z细胞生长,其作用可能与EGR-1及p53蛋白表达增强有关;Egr-1基因在CNE-2Z中具有可诱导性,在肿瘤治疗中有一定的应用前景。     

川芎嗪逆转人鼻咽癌顺铂耐药细胞系多药耐药性的实验研究

目的探讨川芎嗪（TMP）对人鼻咽癌顺铂（DDP）耐药细胞系（CNE2/DDP）多药耐药性的逆转作用。方法 TMP处理CNE2/DDP细胞后,分别用MTT法、流式细胞术、RT-PCR检测其对DDP耐药性的逆转作用、细胞凋亡和bcl-2mRNA表达的影响。结果 50、100mg/LTMP处理后,CNE2/DDP细胞对DDP耐药性的相对逆转率分别为57.50%、85.72%,差异有统计学意义（P〈0.01）。与对照组比较,50mg/LTMP处理可使CNE2/DDP细胞凋亡率明显增高（P〈0.01）,而bcl-2mRNA表达明显降低（P〈0.05）。结论 TMP可部分逆转CNE2/DDP细胞对DDP的耐药性。TMP可增强DDP对CNE2/DDP细胞的促凋亡作用,下调bcl-2mRNA表达。