虎舌红叶片不定梢诱导研究

[目的]建立虎舌红的高频再生体系,为利用转基因技术改良其品质奠定基础。[方法]以虎舌红试管苗顶端叶片为试材进行组织培养和不定梢诱导试验。[结果]外植体在9种培养基上均能诱导出愈伤组织,4号培养基的不定芽再生率最高,为45．80％,植株生长健壮;其次是7号培养基,其不定芽再生率为39．76％。从整体上看,不定芽的再生率都不高,最高的也未超过50．00％。综合考虑愈伤组织诱导和不定芽再生,适合虎舌红叶片不定芽再生的培养基为：1／2 MS＋TDZ 2．0mg／L＋IAA0．2～0．4mg／L＋AgNO3 3．0～5．0mg／L。选健壮苗接种于1／2MS＋IBA 0．3mg／L＋NAA 0．5mg／L培养基上,20d后生根率可达90％,炼苗后再生植株的移栽成活率达80％以上。[结论]该研究成功建立了虎舌红叶片的离体再生体系。     

二色补血草的组织培养和离体快繁研究

[目的]为二色补血草的快速繁殖技术提供科学指导。[方法]以二色补血草的子叶与胚轴作为外植体,建立快速繁殖体系,研究不同激素浓度对诱导愈伤组织、不定芽以及生根率的影响。[结果]不同激素浓度的培养基均能使外植体不同程度地生成愈伤组织及不定芽;生根培养基中只有A、B、H、I组有不定根产生,其余组均无不定根产生。[结论]以子叶为外植体,愈伤组织和不定芽的最佳诱导培养基分别为：Ms＋O．7mg/L6-BA＋0.1mg/L NAA、MS＋0．5mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA;以胚轴为外植体,愈伤组织和不定芽的最佳诱导培养基为：MS＋0．3mg／L6-BA＋0．5mg／LNAA。诱导不定根的最佳培养基为：MS0。     

欧李茎尖脱毒快繁研究

[目的]研究欧李脱毒快繁技术。[方法]以欧李嫩梢芽为外植体进行了微茎尖组培脱毒研究,探讨了在培养基中添加不同的激素成分及不同浓度对不定芽诱导、继代增殖和生根培养的影响。[结果]欧李茎尖脱毒快繁不定芽诱导的最佳培养基是：MS＋6-BA0．4mg／L＋IAA0．5mg／L;增殖培养的最适培养基为MS＋6-BA0．3mg／L＋IAA0．4mg／L;最佳生根培养基是：2／3MS十IAA0．5mg／L。应用指示植物鉴定法进行病毒检测显示,0．3～0．4mm茎尖培养对苹果褪绿斑病毒（ACLSV）和李矮缩病毒（PDV）的脱毒率分别为71．6％和73．0％。[结论]试验表明,利用欧李嫩梢为外植体进行茎尖组培脱毒快繁是一种可靠实用的方法。     

颠茄高频再生体系的建立及卡那霉素抗性筛选

[目的]建立颠茄高频再生体系及筛选卡那霉素（Kan）抗性。[方法]以颠茄叶片及腋芽为外植体,研究了培养基中6-BA和NAA不同配比对其不定芽分化的影响以及叶片不定芽对Kan的敏感性。[结果]MS＋4．5m#L6-BA＋0．2mg／LNAA为叶片不定芽分化的最佳培养基,不定芽分化率达100％,在1cm×1cm叶块上的不定芽分化数平均达5．85;MS＋3．0mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA为腋芽不定芽分化的最适培养基,不定芽分化率达100％,每个腋芽不定芽分化平均数为4～8个;400．0m#LKan为颠茄叶片遗传转化的最佳筛选浓度。[结论]为颠茄无菌苗的快速繁殖以及基于叶盘法的遗传转化奠定了基础。     

湿地松组培苗生根的影响因子

以湿地松组培嫩梢为外植体诱导不定根。研究结果表明，基本培养基及其中附加生长素的种类及浓度对不定根的分化有较大影响，改良1／2GD是湿地松嫩梢生根的较优基本培养基，其次为1／2DCR，1／2MS；嫩梢接种在改良1／2GD＋IBA2．0的培养基中培养30d后，其不定根诱导率最高达51．6％。在改良1／2GD＋NAA0．05的培养基中不定根诱导率最高达59．3％，NAA与IBA组合较单独使用具有更佳的生根效果，嫩梢接种1／2GD＋NAA0．05＋IBA1．0上30d后最高生根率达81．3％，但NAA与6-BA或活性炭（AC）组合均不利于湿地松嫩梢的生根。生根小植株转移至无激素的改良1／2GD培养基中，不定根伸长较快。在适宜的温温度条件下，再生植株移栽成活率达85％。     

菊花脑叶片组织培养再生植株的研究

[目的]建立菊花脑叶片组织培养再生技术。[方法]以菊花脑叶片作为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同激素设计10种培养基,研究不同种类和浓度的激素组合对菊花脑不定芽和根诱导率的影响,筛选愈伤组织诱导、芽诱导及生根的最佳培养基。[结果]将无菌苗的叶片外植体接种于最佳愈伤组织诱导培养基MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg/L NAA,培养15d可获98．0％的诱导率;之后将带有少量外植体的愈伤组织切下,接种到最佳芽诱导培养基MS＋1．0mg／L6-BA＋0．5mg／L NA量上培养,可获94．0％的出芽率;然后再将1cm以上的再生芽转接至最佳生根培养基MS＋IBA 0．05mg／L上生根,生根率这100％;生根25d以上的幼苗经炼苗和移栽后,成活率在95％以上。[结论]建立了菊花脑叶片组织培养再生植株的技术程序．     

草莓茎尖离体培养研究

通过对草莓茎尖离体培养的试验研究表明：取草莓茎尖为外植体,以0．35mm大小为宜;用MS 0．5mg／L 6-BA 0．2mg／LNAA培养基,不定芽再生率高;以1／2MS 0．1mg／LIBA生根效果最好。     

文冠果细胞悬浮培养技术研究

[目的]建立文冠果体细胞胚胎发生和快速成苗的悬浮培养体系,为文冠果的产业化和规模化发展提供参考。[方法]以文冠果新旧种子为材料,诱导体胚发生,进行文冠果细胞悬浮培养。[结果]适合胚性愈伤诱导的最佳培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋2,4-D0．5mg／L＋3％蔗糖;适合胚性愈伤组织不定芽诱导培养的最佳诱导培养基为MS＋6一BA1．0mg／L．4-NAA1．0mg／L＋3％蔗糖,且萌芽率最高;适合单细胞团再生植株培养的最佳培养基为MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋3％蔗糖。[结论]NAA和2,4-D混合使用有利于胚性愈伤组织的形成;一定浓度的NAA对文冠果愈伤组织萌芽培养有较大的促进作用。     

抗生素对沂州木瓜离体叶片不定芽再生的影响

[目的]研究卡那霉素（Kan）、头孢霉素（Cef）和羧苄青霉素（Carb）对木瓜幼芽嫩叶不定芽再生的影响。[方法]采取沂州木瓜培养新梢嫩叶处理,依次接种在再生培养基及生根培养基上,注入设计浓度的对应抗生素,分析3种常见抗生素Cef、Kan、Carb对沂州木瓜培养新梢嫩叶上不定芽产生的效果。[结果]沂州木瓜对Kan反应极强烈,浓度为5mg/L时,叶片不定芽再生率非常低（2.4%）;浓度为10mg/L时,芽分化被完全抑制,叶柄略有膨大,组织变白,有微量愈伤组织;浓度为15～30mg/L时,叶片既不能形成愈伤组织也不能分化不定芽。Cef和Carb对沂州木瓜叶片生根及生长的作用呈负相关关联,浓度在100mg/L时均同对照差异很小,随着添加浓度的升高,抑制作用则显著表现出来,500mg/LCef或400mg/LCarb即可阻止沂州木瓜新梢嫩叶的愈伤组织出现。[结论]沂州木瓜叶片对Kan敏感,Cef和Carb对木瓜离体培养的影响相似,但Carb抑制再生的作用比Cef强烈。     

肥城桃幼子叶不定植株再生

以我国重要的名特优肥城桃为试材,基本培养基为ＭＳ,细胞分裂素有ＢＡ和ＴＤＺ,生长素有ＩＢＡ和２,４－Ｄ。ＬＨ和蔗糖都分别选用２种浓度,共设计７个处理。结果表明以ＢＡ５ｍｇ／Ｌ,ＩＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ,ＬＨ５００ｍｇ／Ｌ,蔗糖３％的培养基诱导子叶不定梢再生率最高,达７８％,其他６种不同处理,子叶不定梢再生率都很低。     

BA、NAA在柽柳离体快繁中的应用

[目的]研究BA、NAA对柽柳丛生芽的诱导、增殖和不定根形成的影响。[方法]将柽柳嫩枝条切成1.5～2.0 cm的小段,接种于诱导培养基MS＋BA 0～6.00 mg/L＋NAA 0～0.50 mg/L上诱导不定芽。[结果]BA、NAA浓度为0时,99%的外植体都在基部茎节产生了1～2条长度为1～5 cm的白色根,侧根稀疏,但均无丛生芽产生,枝叶生长不良。BA浓度为2.00 mg/L、NAA浓度为0 mg/L时最适合诱导不定芽。NAA浓度不变时,随着BA浓度的增加,柽柳丛生芽发生提前,增殖系数也逐渐升高,但茎的分化逐渐受到抑制。MS＋BA 0.50 mg/L＋NAA 0.01 mg/L适合丛生芽增殖。NAA浓度为0.50和1.00 mg/L时,主侧根发生不明显,并且在无根苗基部有愈伤组织产生。采用MS培养基进行柽柳生根培养时,NAA的适宜添加浓度为0.05 mg/L。[结论]该研究为柽柳的组织培养提供了试验依据。     

不同基因型苦瓜离体植株再生体系的建立

[目的]建立不同基因型苦瓜的离体植株再生体系。[方法]以大顶、英引和绿宝石苦瓜品种的子叶节为试材,探讨了不同苗龄、不同激素与浓度配比组合以及不同基因型对苦瓜离体形态发生的影响。[结果]在用苦瓜外植体直接诱导产生不定芽时,苗龄的影响最大,通过培养天数结合子叶颜色判断苗龄,发现培养10 d左右的苦瓜幼苗最适宜进行丛生芽的诱导;6-BA、ZT和NAA对丛生芽的诱导效果显著,仅在低浓度的配比就可获得良好诱导效果,以MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L和MS+ZT 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L的诱导效果较好;不同基因型苦瓜的丛生芽诱导情况虽有差异,但差异不大,以绿宝石的有效苗率最高。[结论]综合培养天数和子叶颜色判断外植体的苗龄有助于选择适宜外植体进行高效率的苦瓜丛生芽诱导。     

膜荚黄芪不定根组织培养的研究

[目的]建立黄芪不定根培养的无性繁殖体系。[方法]以膜荚黄芪无菌苗的胚根为外植体,诱导了不定根。将长约1 cm的不定根切段接种于4种培养基(B5、MS、LS和White)以筛选培养基。然后以B5为基本培养基附加不同浓度IBA(1~6 mg/L)、不同种类糖(蔗糖、葡萄糖、果糖和食用白糖)和不同浓度白糖(20~50 g),研究IBA浓度和糖的种类及浓度对黄芪不定根组织培养的影响。[结果]4种培养基中,B5培养基效果最好,切段可分化大量不定根,且生长良好。IBA浓度为2 mg/L时,黄芪不定根生长旺盛。在B5+IBA 2.0 mg/L培养基上,附加30 g/L蔗糖或白糖时不定根生长良好,白糖与蔗糖的效果差异不明显。[结论]在黄芪不定根规模化生产中可用白糖代替培养基中蔗糖,降低培养基成本。     

乌药的离体培养和植株再生研究

[目的]为乌药的规模化人工育苗提供理论依据。[方法]以乌药植物当年生健壮枝条为外植体,研究不同激素种类及浓度对其不定芽的诱导及生根的影响,筛选出最佳培养基。[结果]适宜于乌药组织培养的最佳外植体取材时间为6~7月,以当年生带芽茎段的嫩枝为最适宜;2.5 mg/L 6-BA是乌药不定芽增殖时最有效的浓度;诱导乌药外植体不定芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 2.5mg/L+NAA 0.2 mg/L;乌药苗在增殖过程中的继代周期以40~50 d为宜;最佳壮苗培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;最佳生根培养基为MS+NAA 0.5 mg/L,生根率98%~100%。[结论]采用合适的外植体以及激素种类与浓度为最佳配比的培养基可使传统的中药材乌药植物成功地诱导不定芽的分化、生根与再生。     

正交试验优化红颜草莓离体再生体系

[目的]优化红颜草莓离体再生体系。[方法]采用正交试验,研究不同培养基、植物生长调节剂的种类及浓度对红颜草莓叶片不定芽再生的影响。[结果]IBA是影响叶片不定芽增殖的重要因素;最适诱导培养基为MS+TDZ 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L,诱导率为90.00%;最佳分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L,分化率为8.1%;最适增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2mg/L,平均每个不定芽的增殖倍数为7.67;最适继代培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,每个处理的平均苗高5.98 cm;最适生根培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,每个处理的平均根数为4.5根。[结论]为进一步研究草莓的遗传转化奠定了基础。     

勋章菊叶片再生技术的探讨（摘要）

[目的]研究勋章菊叶片再生技术,筛选适合勋章菊叶片再生的最佳培养配方。[方法]以日本引进的勋章菊叶片为材料,置床于添加不同种类和浓度激素的MS培养基中进行愈伤组织和不定芽诱导的正交试验,筛选勋章菊叶片再生的最佳培养基配方。[结果]在MS＋TDZ（0.8～1.0mg/L）＋NAA（0.05～1.0mg/L）培养基上可形成紧密型绿色的愈伤组织;叶片接种于MS＋TDZ（0.5～1.0mg/L）＋NAA（0.05～1.0mg/L）培养基上可形成许多不定芽,诱导效率达100%;健壮的不定芽长至2.0～3.0cm长时移至1/2MS＋NAA（0.1mg/L）培养基中,其发根状况良好,生根率达100%。[结论]为勋章菊的高频快繁提供了新途径,并为勋章菊的遗传转化及培育新品种奠定基础。     

小果型西瓜离体诱导四倍体的初步研究

[目的]为小果型西瓜三倍体的育种奠定基础。[方法]以二倍体小果型西瓜优良自交系MH-39-1的子叶为外植体进行离体诱导四倍体的研究。[结果]100 mg/L秋水仙素处理子叶的不定芽分化率达66.7%,平均分化不定芽6.7个。400 mg/L秋水仙素处理的四倍体诱导率为20.0%。秋水仙素处理12 h的不定芽分化率为83.3%,处理48 h的不定芽分化率为16.7%。秋水仙素处理24~36 h的四倍体诱导率为16.7%。4.0 mg/L 6-BA处理的不定芽分化率为83.3%,1.0 mg/L 6-BA处理的不定芽分化率为58.3%。再生芽在4种生根培养基上的生根率均在90%以上,在不添加植物生长调节剂的培养基上再生苗的平均生根数仅为6.5条,添加NAA的培养基上再生苗的平均生根数在10条以上,但根短而粗。[结论]初步确定秋水仙素离体诱导小果型西瓜四倍体的适宜浓度和处理时间为400mg/L和24 h。     

西瓜花药培养中不定芽的诱导与增殖

[目的]探讨西瓜不定芽的诱导与增殖。[方法]在西瓜花药愈伤组织诱导的基础上,研究不定芽的诱导与增殖。[结果]MS+2.0mg/L 6-BA+1.0 mg/L KT+0.1 mg/L IAA培养基可以使愈伤组织再分化成不定芽。不定芽在培养基MS+0.5 mg/L 6-BA中进行增殖,随着继代培养次数的增加,玻璃化和黄化现象变得更加严重。采取降低6-BA浓度甚至不添加任何激素、提高琼脂的含量、增加光照时间与强度等措施,可以有效减少西瓜不定芽的玻璃化现象。[结论]当培养基中细胞分裂素与生长素的比例为10∶1~100∶1时,由西瓜愈伤组织诱导出不定芽的可能性较大。     

PP333对百合试管苗壮苗和生根的影响

[目的]探索多效唑的适宜浓度,提高百合试管苗的质量和移栽成活率。[方法]研究不同浓度PP333(0.3、0.5、1.02、.0和3.0 mg/L)对百合试管苗的壮苗和生根的影响。[结果]适当浓度的多效唑能明显提高百合试管苗不定芽分化的数量,促进试管苗根的分化,提高生根的数量。多效唑对百合植株有显著的矮化作用。随着PP333浓度的增加,其矮化效果明显加强。1.0 mg/L PP333能有效地壮苗并起到矮化的作用;当PP333浓度为0.3~1.0 mg/L,百合试管苗的生根率和平均根数明显高于对照;当PP333浓度为2.0~3.0 mg/L时,百合试管苗的根变黄、变短。这说明低浓度PP333对百合试管苗的生根有明显促进作用,而高浓度PP333对百合试管苗生根有明显的抑制作用。[结论]适于百合壮苗的最佳PP333浓度为1.0 mg/L。