HPLC测定四川梓潼产葛根和粉葛中四种异黄酮含量的分析

采用YMC-Pack ODS-A C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)测定四川梓潼产葛根和粉葛中4种异黄酮(葛根素、3′-甲氧基葛根素、大豆苷和大豆苷元)含量。结果测得葛根素、3′-甲氧基葛根素、大豆苷和大豆苷元的线性范围分别为0.050～0.750、0.010～0.150、0.010～0.150和0.012～0.180μg,线性关系良好(r0.999),平均加样回收率为96.52%～100.22%,RSD为0.75%～1.84%。该方法简便、准确、重现性好,适用于葛根中异黄酮含量的测定。梓潼产葛根中葛根素、3′-甲氧基葛根素、大豆苷和大豆苷元的含量明显高于粉葛,且梓潼产葛根和粉葛中大豆苷元含量明显高于其他产地的葛根和粉葛。     

葛根总黄酮提取物成分的HPLC测定

[目的]测定葛根总黄酮提取物有效成分葛根素、大豆苷含量。[方法]HPLC色谱条件为：色谱柱为C18柱;流动相为乙腈-水（25∶75,V/V）;检测波长为250 nm;流速为0.8 ml/min;柱温为室温;进样量为4μl。[结果]在测定范围内,葛根素、大豆苷对照品线性关系良好;葛根中葛根素、大豆苷平均含量分别为5.41、7.50μg/ml。[结论]该研究为更好的利用葛根提供了依据。     

HPLC法同时测定葛根中葛根素·大豆苷及大豆苷元含量

[目的]建立HPLC同时测定葛根中葛根素、大豆苷、大豆苷元含量的检测方法。[方法]HPLC色谱条件为:C18柱,流动相为甲醇-1%醋酸水溶液梯度洗脱,检测波长250 nm,流速1.0 ml/min,柱温30℃,进样量10μl。[结果]在测定范围内,葛根中葛根素、大豆苷、大豆苷元混合对照品的线性关系良好。[结论]该方法可为葛根的质量控制及综合开发提供参考。     

不同产地葛根的HPLC指纹图谱及质量评价研究

[目的]建立简单可行的葛根药材质量评价新方法。[方法]在进行方法学考察的基础上,采用高效液相色谱（HPLC）指纹图谱法分析不同产地葛根的指纹图谱,并采用相似度分析对不同产地的葛根药材进行了质量评价。[结果]测定了不同产地葛根药材中葛根素和大豆苷元2种有效成分的含量。不同产地的葛根药材质量差异较大,通过指纹图谱研究及相似度分析可以从整体上对葛根的质量进行评价。[结论]HPLC指纹图谱分析法可以为葛根药材的质量鉴别与质量控制提供可靠的依据。     

葛根饮料加工过程中葛根素及总黄酮含量变化研究

[目的]检测葛根植物饮料加工过程中葛根素及总黄酮的含量.[方法]在现有的葛根饮料生产工艺基础上,分别采用HPLC法和UV法对加工过程中葛根素及总黄酮含量变化趋势进行了对比分析.[结果]试验表明,葛根饮料生产过程中葛根素及总黄酮含量变化趋势基本一致,在提取1.5h时达到最高峰,分别为0.16 mg/ml和0.34 mg/ml,在后续的工艺生产过程中,葛根素及总黄酮含量虽略有变化,但总体趋势平稳,成品饮料中葛根素及总黄酮浓度分别为0.14 mg/ml和0.29 mg/ml.[结论]研究可为葛根饮料功能成分的测定提供一定的理论基础和参考价值.     

三种黄酮类植物雌激素对樱桃谷鸭钙磷代谢的影响

选用健康的1日龄樱桃谷鸭128只,随机分为4组,分别添加基础日粮、基础日粮+葛根异黄酮组 (10 mg／kg)、基础日粮+葛根素组(10 mg／kg)和基础日粮+大豆异黄酮组(10 mg／kg),分别于21日龄和42日龄屠宰对血清及骨骼里的钙磷及相关指标进行检测．结果发现前期大豆异黄酮的作用效果>葛根异黄酮>葛根素,后期葛根异黄酮的作用效果>大豆异黄酮>葛根素,能增加血清碱性磷酸酶的含量、降低抗酒石酸酸性磷酸酶的含量,同时增加骨骼湿重、长度和钙的含量,说明不同时期的葛根异黄酮和大豆异黄酮可以促进骨的形成、抑制骨的吸收,从而维持骨的健康,且作用效果大小因生长阶段不同而异．     

不同颜色大豆种皮色素含量的分析

利用相关性分析、主成分分析和聚类分析等方法,对16份大豆品种的种皮色素含量及其与种皮色的关系进行比较研究。结果表明,大豆种皮的花色苷含量、原花青素含量、总黄酮含量、类胡萝卜素含量、叶绿素含量、亮度L值、色度成分a值、色度成分b值和色度C值均在不同种皮色大豆间存在显著差异;大豆种皮花色苷含量、原花青素含量和总黄酮含量3个指标间均呈极显著正相关关系,类胡萝卜素含量与原花青素含量、叶绿素含量呈显著正相关关系,种皮亮度与花色苷含量、原花青素含量、总黄酮含量和类胡萝卜素含量均呈显著负相关,种皮色度与花色苷含量、原花青素含量和总黄酮含量也均呈显著负相关;主成分分析中的前4个主成分方差累积贡献率达95.92%;聚类分析将大豆品种分为4个类型;黑色种皮大豆的花色苷、原花青素、总黄酮和类胡萝卜素的含量最高,绿色种皮的花色苷、原花青素、总黄酮、类胡萝卜素和叶绿素的含量均最低。研究结果可为大豆种皮色素的发掘提供帮助。     

不同产地煨葛根的鉴定及含量测定

采用显微鉴别法对四川、安徽、湖北3个产地煨葛根外观形状及内部组织结构进行初步鉴定,利用薄层色谱法(TLC)鉴定煨葛根中的主要有效成分葛根素,通过高效液相色谱法(HPLC)对它们的含量进行检测,比较分析3个产地煨葛根中有效成分葛根素的含量及其差异性。结果表明,3个产地煨葛根中均含有葛根素,四川产地样品药材葛根素含量优于安徽和湖北产地,但不同产地的煨葛根中葛根素含量均符合《中国药典》标准,同时葛根素的含量与产地有一定关系。     

基于转录组学的粉葛葛根素生物合成相关基因挖掘

挖掘与粉葛葛根素生物合成的相关基因，为相关控制基因的验证及深入研究提供理论参考。对6个生长时期的粉葛块根进行转录组测序，在葛根素含量最高时期与最低时期初步筛选差异表达基因，对各时期葛根素及其上下游代谢物含量变化趋势与差异表达基因相对表达量进行相关性分析，最终挖掘出相关性较高的基因片段。结果表明，经2步筛选差异基因后，挖掘11个与粉葛葛根素生物合成相关的片段，共编码3个基因，分别为异黄酮羟化酶控制基因(I2′H)、异黄酮7-O-葡糖苷转移酶控制基因(IF7GT)和异黄酮合酶控制基因(IFS1),其中I2′H、IF7GT、IFS1均与葛根素的生物合成呈现正向相关，即均正向调控葛根素的生物合成。说明I2′H与IF7GT所编码的酶主要负责调控大豆苷元向芒柄花素和大豆苷的合成，两者同为葛根素上游代谢物的支链代谢物，因此与葛根素的含量呈正向相关，而IFS1则通过调控2,7,4′-3-羟基异黄酮的生物合成与异甘草素向葛根素的直接合成，最终调控葛根素生物合成进程。     

3'-大豆苷元磺酸钠药理作用研究进展

3'-大豆苷元磺酸钠是中药葛根的主要有效成分大豆苷元进行结构修饰和改性的新合成的强水溶性物质.就近几年来对3'-大豆苷元磺酸钠的药理作用的研究进展进行了综述.     

野葛异黄酮糖苷的分离纯化及体外清除自由基活性的研究

以野葛的根样为试材,依次通过总黄酮提取、有机溶剂分级分离和柱色谱法进行分离纯化,获得4种异黄酮糖苷组分,依据核磁共振谱和质谱分析结果分别鉴定为葛根素、大豆苷、芒柄花苷和染料木苷。采用1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH·)的有机自由基体系和超氧阴离子(O2-·)的无机活性氧自由基体系,对上述4种异黄酮糖苷化合物的体外清除自由基能力和抗氧化活性进行测定。结果表明,4个异黄酮糖苷组分对DPPH·自由基和O2-·自由基均具有一定的清除活性,清除能力的大小与处理浓度均成正相关关系,对DPPH·自由基的清除效果由高到低依次为染料木苷、大豆苷、葛根素和芒柄花苷,抑制O2-·自由基能力由强到弱依次为葛根素、大豆苷、染料木苷和芒柄花苷。     

不同溶媒对葛根提取物中有效成分含量的影响

[目的]比较不同溶媒对葛根提取物中有效成分葛根总异黄酮、葛根素含量的影响。[方法]采用紫外及反相高效液相色谱法进行测定。[结果]不同溶媒葛根提取物中,葛根总异黄酮,葛根素的含量不同。其中,以60%乙醇提取物中总异黄酮的含量较高,达46%;丙酮提取物中葛根素的含量较高,达0.32%。[结论]5种溶媒葛根提取物中葛根总异黄酮,葛根素的含量各不相同,且以60%乙醇,丙酮提取效果较好。     

不同光照条件下大豆幼苗和不同外植体获得愈伤组织中大豆苷元及染料木素的含量

通过对大豆幼苗光照培养和大豆不同外植体的组织培养,测定不同培养条件下大豆幼苗不同部位及不同外植体培养得到的愈伤组织中大豆苷元和染料木素的含量。结果表明：大豆幼苗光照培养30d时根中大豆苷元及染料木素含量分别是相应培养时间无光照条件根中的3.69倍和3.59倍;在光照培养30d真叶中大豆苷元和染料木素的含量也较高,仅次于根,是相同培养时间无光照条件真叶中大豆苷元和染料木素的含量的2倍。不同外植体培养得到的愈伤组织中,真叶培养得到愈伤组织培养60d时大豆苷元及染料木素的含量最高。正常光照条件下的大豆幼苗,其不同部位大豆苷元及染料木素含量高于对应部位得到的愈伤组织中大豆苷元及染料木素的含量。经过90d组织培养,真叶获得的愈伤组织中大豆苷元、染料木素的总含量较最初的外植体中的总含量分别增加了162.53倍和111.71倍。结合不同外植体诱导出的愈伤组织的重量增长情况。在愈伤组织培养90d时,根、子叶节、子叶作为外植体进行愈伤组织培养,生产大豆苷元及染料木素的效果最好。     

乙醇冷凝回流与超声波辅助提取葛根药材总黄酮

以云南省、广东省、广西壮族自治区不同地方葛根（Pueraria edulis）为材料,通过乙醇冷凝回流和超声波辅助提取法提取葛根药材中总黄酮,探究不同提取方式对不同地区葛根药材总黄酮含量的影响。结果表明,云南省葛根最佳提取时间均为20 min,广东省、广西壮族自治区葛根最佳提取时间均是30min;冷凝回流提取法中葛根黄酮的得率相对较好;冷凝回流提取法中云南省产葛根总黄酮含量最高,平均含量为0.255 7%,广东省葛根总黄酮平均含量最低为0.210 8%。     

葛藤中异黄酮含量的薄层光密度法测定

葛藤乃豆科植物野葛(Pueraria eobata (Wilid)Ohwi)(其根系中医常用药物之一葛根)的藤茎。我们已从葛藤中提取分离,鉴定出3种异黄酮类化合物——大豆甙元(Daidzein)、大豆甙(Daidzin)和葛根素(Puerarin),而这3种成分恰恰是葛根中重要的活性物质,因此测定此3种异黄酮类化合物的含量是评价葛藤内在质量的重要指标,也是葛藤代替葛根入药的科学依据。     

葛根素及黄豆苷元分离纯化工艺研究

采用HPD800大孔吸附树脂富集葛根中的葛根素及黄豆苷元,并通过溶剂萃取以及重结晶技术分离纯化葛根素及黄豆苷元。试验结果表明:经过大孔吸附树脂富集后,葛根素的纯度从8.62%增加到35.26%、黄豆苷元的纯度从0.276%增加到10.17%;以水饱和的正丁醇作为葛根素萃取溶剂,萃取2次萃取率可达92.32%;选取乙酸乙酯作为黄豆苷元的萃取溶剂,萃取1次萃取率达到94.75%;选取90%乙酸作为葛根素结晶的溶剂,经过1次结晶,葛根素的纯度可达91.32%,收率为12.5%,黄豆苷元的纯度可达93.81%,收率为15.77%。     

2种加工工艺豆浆产品中黄酮类物质与总抗氧化能力的比较分析

以15个不同大豆品种为原料,分别以目前豆制品加工中2种主流的生产工艺——生浆和熟浆工艺制备豆浆,进一步通过亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色、HPLC和总抗氧化能力测定方法(FRAP)对各个样品中的总黄酮含量、异黄酮单体组成及含量和总抗氧化能力进行检测分析和评价。结果表明:熟浆豆浆中的总黄酮含量、8种异黄酮单体含量都显著高于生浆豆浆中的含量,功能性活性单体苷元含量在加工成豆浆后含量都有所上升(P0.05),总黄酮含量经加工前后变化不显著(P0.05),而熟浆豆浆的总抗氧化能力要优于生浆豆浆(P0.05)。     

大豆种子发育过程中异黄酮含量的动态分析

为分析大豆种子发育过程中异黄酮含量的变化趋势,以6个大豆品种为试验材料,在北京夏播条件下种植,利用高效液相色谱仪测定不同发育阶段种子的异黄酮含量。结果表明,种子中异黄酮含量在品种间有一定差异,含量的高低与品种的生育期长短没有直接关系;异黄酮含量随着种子的发育进程逐渐增加,10月1日左右达到峰值,生育期短的品种成熟前含量达到最高,生育期长的品种,成熟前含量有降低的趋势;种子发育前期大豆苷元的合成和积累早于染料木素,而发育后期染料木素的合成积累增加迅速,成熟时染料木素含量超过大豆苷元含量。所以,大豆种子中染料木素含量一般高于大豆苷元含量。     

氯吡脲对葛根产量和品质的影响

[目的]探讨氯吡脲对葛根产量和品质的影响,为葛根高产优质栽培和药用资源开发利用提供参考.[方法]以广西主栽品种桂葛1号为材料,在块根膨大中期分别喷施1、5、25和50 mg/L的氯吡脲溶液,以清水为对照(CK),喷施后30和60 d测定叶片叶绿素含量,喷施后6个月测定块根的生长指标、品质指标和主要药效成分含量,评价不同氯吡脲浓度对葛根产量和品质的影响.[结果]与CK相比,各氯吡脲处理均可提高葛根叶片的叶绿素含量,促进块根根长和根粗的生长,提高干物质含量;但对块根单株鲜重、淀粉和可溶性糖及药用成分含量的影响存在差异.1 mg/L浓度处理的葛根块根根粗、平均单株鲜重、干物质含量、淀粉和可溶性糖含量最高,均显著高于CK(P<0.05,下同);5mg/L浓度处理的葛根总黄酮和葛根素含量最高,显著高于CK,块根根粗、干重、可溶性糖和纤维素含量也相对较高;25~50 mg/L浓度处理除块根纤维素含量显著高于CK外,其他品质和药效成分指标大多低于CK或与CK差异不显著(P>0.05).[结论]块根膨大期叶面喷施氯吡脲对桂葛1号的生长、产量、品质及药效成分等会产生不同程度的影响,其中以喷施1~5 mg/L氯吡脲对提高葛根产量和品质的综合效果最佳.     

甘肃省大豆中异黄酮及组分与品质的相关性分析

利用高效液相色谱法(HPLC),对甘肃省种植的86份栽培品种和86份地方品种的大豆异黄酮、粗脂肪和蛋白质含量进行了检测,分析了大豆异黄酮与大豆主要品质性状的相关性。结果表明,总异黄酮含量与蛋白质含量呈负相关,与脂肪含量呈显著负相关;粗脂肪含量与大豆苷、大豆苷元、染料木苷和黄豆黄苷4种组分含量呈负相关。大豆总异黄酮含量与大豆苷、大豆苷元、染料木素和染料木苷含量呈极显著正相关,相关系数分别为0.520、0.268、0.462、0.969。