猪细小病毒（PPV）S—1株弱毒疫苗接种豚鼠的抗体反应

三批ＰＰＶＳ－１弱毒苗接种豚鼠２０只，接种后一周开始产生抗体反应，第五周全部出现抗体反应，ＨＩ抗体持续时间至少１０个月，弱毒苗分Ａ、Ｂ两组接种ＨＩ阴性豚鼠共８只，接种ＨＩ阴性猪共４只，猪在免疫后一周ＨＩ全部阳性，一个月平均ＨＩ价１０２４；豚鼠免疫后四周全部阳性，３５天平均ＨＩ价３９５，豚鼠与猪阳性率相符，弱毒苗在４℃保存１１个月，－２０℃１４个月后接种豚鼠，全部产生抗体反应。     

注射猪细小病毒灭活疫苗的豚鼠的抗体反应

18批AEI灭活疫苗免疫53只PPV HI阴性豚鼠,每批2～3只,免疫后全部产生抗体反应。这些豚鼠全部产生抗体的时间是第一次免疫后4周,平均HI价2442。免疫豚鼠HI抗体的持续时间大于10个月。5批灭活苗对16只HI阴性豚鼠和16头HI阴性猪的免疫比较试验结果,免疫后HI阳性率均为100％,HI抗体全部出现的时间猪为第一次免疫后1周,豚鼠为第一次免疫后3周。免疫后3～5周的平均HI价猪为3925,豚鼠为1360。     

豚鼠对猪细小病毒弱毒苗抗体反应的研究

用不同批次、不同剂量、不同保存时间的猪细小病毒N株弱毒苗接种豚鼠，观察豚鼠对PPV N株弱毒苗的抗体反应。结果4种不同剂量和3个不同批次的PPV N株弱毒苗接种豚鼠后第14天均产生抗体反应，其PPV HI效价在1：16－1：64之间，0.1ml和1ml 剂量接种豚鼠产生的PPV HI抗体水平相近，抗体持续长达12个月以上。在4℃保存0天、12个月和－20℃保存2年、3年的PPV N株弱毒苗接种豚鼠，其PPV HI价在1：16－1：32之间，说明该苗在4℃至能保存12个月，－20℃能保存3年以上。比较了不同批次疫苗接种猪和豚鼠所产生的抗体反应，结果两者相似。用3批引起豚鼠产生抗体反应的PPV N株弱毒苗接种768头后备母猪，共产仔7136头，其中健活仔6575头，平均每窝产健活仔8．56头，产死仔仅0．73头。证明豚鼠是监测PPV弱毒苗抗体的首选实验动物。     

豚鼠对猪细小病毒弱毒苗抗体反应的研究(摘要)

用不同批次、不同剂量、不同保存时间的猪细小病毒Ｎ株弱毒苗接种豚鼠 ,观察豚鼠对ＰＰＶＮ株弱毒苗的抗体反应。其结果如下 :用 4种不同剂量的ＰＰＶＮ株弱毒苗免疫豚鼠 ,免疫后 14天均产生抗体反应 ,ＰＰＶＨＩ价分别为 :0 1ｍｌ剂量为 1:16～ 1:6 4;0 2ｍｌ为1:8～ 1:32 ;0 5ｍｌ为 1:16～ 1:32 ;1 0ｍｌ为 1:16～ 1:6 4,而对照豚鼠抗体反应为阴性 ,可见仅需 0 1ｍｌＰＰＶＮ株弱毒苗便可引起豚鼠产生抗体反应。同时比较了不同批次的ＰＰＶＮ株弱毒苗接种豚鼠产生抗体反应的情况 ;3批ＰＰＶＮ株弱毒苗接种豚鼠后 14天全部出现抗体反…     

猪细小病毒灭活苗免疫豚鼠和猪抗体反应比较

猪细小病毒灭活苗对预防由ＰＰＶ引起的母猪繁殖障碍效果良好，Ｊｏｏ等（１９８４）报告了灭活苗接种豚鼠可产生抗体反应，本研究旨在观察豚鼠接种ＰＰＶ灭活苗后的抗体产生规律及特异性。我们用１３批ＰＰＶ灭活苗免疫３９只ＰＰＶ阴性豚鼠和猪，每批次各３只，免疫后阳性率１００％，平均ＨＩ价豚鼠为３２０－１２８０，猪为２０－３２０。     

猪细小病毒灭活苗免疫豚鼠和猪抗体反应比较

猪细小病毒（ＰＰＶ）灭活苗对预防由ＰＰＶ引起的母猪繁殖障碍效果良好，Ｊｏｏ等（１９８４）报告了灭活苗接种豚鼠可产生抗体反应．本研究旨在观察豚鼠接种ＰＰＶ灭活苗后的抗体产生规律及特异性．我们用１３批ＰＰＶ灭活苗免疫３９只ＰＰＶ阴性豚鼠和猪，每批次各３只，免疫后阳性率１００％，平均ＨＩ价豚鼠为８２０～１２８０，猪为２０～３２０。     

猪细小病毒(BJ-2株)灭活疫苗免疫效力试验

用实验室制备并经初步检验合格的猪细小病毒灭活疫苗免疫豚鼠和试验猪,测定免疫豚鼠和猪的HI抗体效价,并对免疫的怀孕母猪进行攻毒,探索HI抗体效价与攻毒免疫保护的相关性.结果显示免疫后一个月所有经免疫的豚鼠、猪的HI抗体效价均达到1∶256以上,高水平的抗体可持续一个月以上;初产母猪免疫后攻毒试验显示攻毒后免疫组不出现病毒血症,且免疫攻毒组的平均窝产仔数和产活仔数均明显高于未免疫攻毒组,且胎猪的体长、体重等指标存在显著差异,试验结果充分说明该疫苗的免疫效果是非常确实的.     

猪细小病毒病弱毒疫苗免疫效力评价及临床免疫试验

为制定猪细小病毒病弱毒疫苗效力检验的标准,用3批猪细小病毒病弱毒疫苗进行接种猪与接种豚鼠的平行试验;同时进行临床免疫试验。3批疫苗接种豚鼠和猪后定期进行PPVHI抗体检测;猪于免疫后攻毒,并进行病毒分离。免疫母猪在怀孕早期进行强毒攻击,40d扑杀进行病毒分离。用3批疫苗免疫后备母猪统计产仔成绩。结果显示,豚鼠接种后21d、猪接种后7d全部产生抗体反应。免疫攻毒的猪均未从血浆和内脏中分离到病毒,而从对照猪分离到病毒;怀孕母猪强毒攻击后扑杀,胎儿病毒分离均为阴性,而对照猪胎儿病毒分离为阳性;统计数据表明免疫猪的产仔成绩比未免疫猪高,平均每窝多产活仔1.85头,少产死胎木乃伊胎0.65头。结果表明,当免疫豚鼠PPV HI≥64时,免疫猪能抵抗PPV强毒攻击,两者呈正相关;免疫母猪的攻毒试验表明免疫母猪能抵抗PPV经胎盘感染;临床免疫试验证明疫苗具有良好的免疫原性和安全性。     

犬细小病毒灭活疫苗的制备及免疫效果观察

以新分离的两种不同亚型CPV为毒种制备浓缩灭活苗和未浓缩灭活苗,通过与商品化弱毒苗的比较评价灭活疫苗的免疫效果。将CPV-S5（New CPV-2a）与CPV-1401（New CPV-2b）毒株扩大培养后浓缩灭活,制备了两种浓缩与两种未浓缩水溶剂灭活疫苗;将灭活疫苗和商品化二联弱毒苗分别接种5周龄HI阴性幼犬,分别在免疫后7 d、14 d、21 d、28 d测定HI抗体效价;首免36 d后取其中4只犬二免,其他犬进行攻毒。结果显示,各免疫组在第7天HI均高于1∶80,浓缩组显著高于未浓缩组,初步表明CPV灭活苗效果与抗原的浓度有直接的关系;灭活疫苗组与商品化弱毒苗组均差异显著;免疫组的犬均存活,而HI阴性犬死亡,经检测死亡犬CPV为阳性,表明制备的CPV灭活苗产生的特异性免疫应答均能抵抗强毒的攻击,对犬起到良好的免疫保护;二免后其HI抗体效价极显著提高,有效抗体能维持5个月,更有效的对免疫犬群进行保护。     

非典型鸡新城疫免疫程序的研究

为预防非典型鸡新城疫(CND),选母抗 HI 价1:16以上的2～10日龄雏鸡,以肌注 NDⅡ系苗800个免疫最进行首免后一个月,HI 价达1:16以上者达100%.此时用ND 中等毒力 MVK teswar 株Ⅰ系苗2000免疫量加强免疫,其 HI 价达1:16以上者,免疫后3、6、10个月均为100%,13个月为96.2%,16个月为100%.13及16个月免疫鸡攻 NDV 强毒(100个 MLD)可获全数保护.用接种13个月的免疫鸡与强毒对照鸡同居,不发生接触感染.以Ⅱ系苗800个免疫量首免Ⅰ系苗2000免疫量加强免疫共接种92.3万只鸡。未发现 CND;从中抽取102只免疫鸡做HI 试验,HI 价达1:16以上者为93.1%.可见,以Ⅱ系苗800个免疫首免,Ⅰ系苗2000个免疫量加强免疫的程序,能使生产鸡群在全程(16个月以上)保持较高的抗体效价,可防止 CND 的发生.     

鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联灭活疫苗的研究

利用Page A型、B型、C型副鸡禽杆菌和新城疫病毒La Sota株,研制鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联油乳剂灭活疫苗。用3个批次疫苗进行单剂量(0.5mL/次)3次接种和大剂量(2.0mL)单次接种的安全性试验、SPF鸡的免疫效力试验、商品鸡的免疫持续期试验和疫苗的保存期试验。结果表明,3批疫苗对试验鸡安全无副作用;免疫接种SPF鸡只30d后对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥80%,用20μL/只疫苗免疫接种SPF鸡21d后新城疫的平均HI抗体24;商品鸡42日龄首免,110日龄二免,二免后9个月对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥70%,对新城疫病毒强毒100%保护;用4℃~8℃保存12个月和15个月的3批疫苗进行了SPF鸡的近期免疫效力试验,结果对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥70%,用20μL/只疫苗免疫SPF鸡,免疫接种后21d新城疫病毒的平均HI抗体24,对新城疫病毒强毒的攻毒保护率70%。说明研制的疫苗安全有效。     

猪细小病毒N株的生物学和免疫学特性研究

猪细小病毒N株是从广西初产母猪所产死胎脏器分离的自然弱毒株。用这个毒株接种PPV HI抗体阴性的四月龄小猪和怀孕14～23天的后备母猪进行安全性试验,结果无任何异常临床症状、病毒血症和同居感染,母猪分娩正常,初生仔猪在吃初乳前HI抗体阴性。该毒株免疫的小猪、后备母猪和怀孕母猪,完全能抵抗猪细小病毒强毒攻击,攻毒后49天剖杀母猪,结果胎儿正常,胎儿心血HI抗体阴性,取胎儿脏器未分离出病毒,分娩母猪产仔正常,仔猪吃初乳前HI抗体阴性。而对照猪攻毒后产生病毒血症,产下不同组合异常仔,并从死胎儿脏器分离出病毒,健活仔猪吃初乳前能测出HI抗体。从而证明用N株作为弱毒苗能防止由猪细小病毒引起的繁殖障碍性疾病。     

H7亚型禽流感病毒血凝素基因重组鸡痘病毒活载体疫苗免疫原性评估

本研究以细胞感染-转染技术构建了一株表达H7亚型禽流感病毒(AⅣ)血凝素(HA)基因的重组鸡痘病毒rFPV-HA.以5×105PFU的rFPV-HA经翅下刺种免疫8周龄SPF鸡,免疫后第3周用100 CID5o的HA基因同源AⅣ A/Arfi St/eng-Q/983/79(H7N1)进行人工感染,1周后采集泄殖腔棉拭子进行病毒分离.免疫后第三周及攻毒后第1、2周对所有动物进行静脉采血,检测血凝抑制(HI)抗体和免疫沉淀(AGP)抗体.结果,攻毒前部分rFPV-HA免疫鸡可检测到HI抗体,但检测不到AGP抗体,野生型病毒(F017)接种组和空白对照组HI抗体和AGP抗体均为阴性.攻毒后rFPV-HA免疫组的HI抗体上升速度明显高于野生型病毒接种组和空白对照组.rFPV-HA免疫组有6/8的鸡为流感病毒分离阴性,野生型病毒接种组和空白对照组的试验鸡病毒分离全部为阳性.结果表明rFPV-HA可诱导鸡产生有效的免疫保护反应,阻止或降低消化道病毒排泄.rFPV-HA的成功构建为研制开发H7亚型禽流感活载体疫苗奠定了良好的基础.     

猪细小病毒自然弱毒N株的免疫原性研究

用PPV-N株接种抗体阴性后备母猪,5天产生HI抗体,7天达到保护性水平(＞1∶256),14天达高峰.用该毒株对4月龄猪、后备母猪和怀孕母猪进行免疫原性试验,结果攻毒后5、7、9天未检测到病毒血症和未分离到病毒.攻毒后第40天剖杀2头怀孕母猪,见胎儿正常,胎儿心血HI抗体阴性,从胎儿脏器未分离出病毒.自然分娩的母猪,产仔正常,仔猪吃初乳前HI抗体阴性,而对照猪攻毒后产生病毒血症,并产下不同组合异常仔,从死胎儿脏器分离到病毒,活仔HI抗体阳性.试验还表明豚鼠对PPV-N株的抗体应答和猪的相似,可作为PPV弱毒株免疫抗体应答检测的实验动物.本研究结果证明,PPV自然弱毒N株具有良好的免疫原性.     

猪细小病毒N株弱毒苗的田间试验

用猪细小病毒N株弱毒苗对广西11个猪场的后备母猪,在配种前进行了田间免疫试验,共免疫1713头猪,并于免疫前后检测了247头猪的细小病毒血凝抑制抗体,结果显示免疫后有95.6％的猪HI抗体上升。效检与田间试验的结果相一致。观察了121头免疫猪产仔成绩,免疫猪比对照猪平均每窝多产活仔2.9头,少产死胎、木乃伊、弱仔3.6头。近年来我们的研究证明,广西猪群普遍存在并广泛流行猪细小病毒病。为了更有效的防制本病,我们研究出一自然弱毒苗,并对其安全性和免疫原性进行了研究。现将猪细小病毒N株弱毒苗的田间试验结果报告如下。     

马传染性贫血弱毒疫苗免疫马与自然感染马酶联免疫吸附试验血清抗体耐热性比较研究

本试验对马传贫血清抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)的耐热性进行了比较研究.对2匹弱毒疫苗免疫马跟踪检测17个月,在接种3周后ELISA检测均呈阳性,其中一匹马ELISA抗体阳性持续到接种后10个月,另一匹马ELISA抗体阳性可持续到接种后一年.对两匹马的所有不同时期采集的血清样品经75℃加热5 min处理后,用ELISA检测均为阴性.另选6匹马传贫弱毒疫苗免疫马血清且ELISA检测抗体呈阳性的30个样品,经75℃加热5min处理后,均由阳性转变成阴性.4匹经马传贫病毒辽毒株(LN-EIAV)实验感染马且ELISA检测抗体呈阳性的血清样品,经75℃加热5 min处理后,结果仍为阳性.23匹ELISA检测抗体呈阳性的自然感染马血清样品,经加热处理后,19匹马血清样品仍为阳性,4匹马血清样品由阳性转变成阴性.结果表明弱毒疫苗免疫马较自然感染马血清抗体耐热性稍差.     

猪细小病毒S—1毒株的分离和鉴定(二)

S一1毒株在猪肾原代细胞第1～10代之间共进行36次传代,培养物的平均HA价>384,第6代以后对细胞的最小感染量稳定在10~(-6)～10~(-7)之间,第5代PK细胞传代毒在-25℃～-30℃保存180天毒价保持10~(-5)不变,死产胎猪组织(S—1毒株分离猪)在用同样温度保存300天能重复分离到病毒,S—1毒株PK传代毒能适应于胎猪睾丸细胞株(ST)增殖,毒价达1O~(-7),以比利时荧光抗体柒色ST细胞培养物和用比利时PPV阳性血清对ST细胞传代毒作HI测定,进一步证实分离物的特异性。用PK细胞传代毒感染HI抗体阴性怀孕头胎母猪能产生明显的抗体反应。3头感染母猪中,1头(用口服途径攻毒)在感染后2～4天间出现排毒现象;从另一头母猪(用肌肉注射途径攻毒)的胎儿中分离到病毒,证实经胎盘感染的发生。     

犬细小病毒性肠炎弱毒疫苗的研究

选用从犬科动物貉中分得的貉细小病毒CR86106株为种毒,用猫肾传代细胞F81系培养增殖,制成犬细小病毒性肠炎弱毒疫苗(M-CPV)。该苗对猪红细胞的HA效价平均156,对F81细胞系的TCID_(50)平均为4.02。对离乳幼犬的最低免疫剂量为5×10~(3·8)TCID_(50)。苗注后2周即可获得免疫,血清HI抗体达32即可抵抗CPV强毒感染。疫苗的免疫期为1年。于-15℃以下冰盒保存,疫苗的有效期为9个月。CR80106株遗传性稳定,经CPV易感幼犬和F81细胞系连续传5代和22代,对犬的安全性和免疫原性不变。病毒蛋白经SDS—PAGE和HPLC分析,均未发现与原始毒株有不同。M-CPV对母源抗体干扰有较强的抵抗力,母源抗体达32的幼犬,100％可对该亩产生免疫应答。HI抗体<2的CPV易感幼犬接种该苗后除粪便轻度阳转外,无其他异常,同居CPV易感幼犬也不会感染发病。两次免疫后作同居感染攻毒,可获得完全保护,不会由粪便排出强毒。于产前20d给怀孕母犬接种,也未见有流产、早产、死胎和弱胎现象发生,所产仔犬全部生长发育正常。全国16个军、警犬场队用本疫苗累计免疫各类犬3320只,全部安全,没有一只因注苗而发病,经1～2年临床观察,3296头获得保护,保护率为99.28％。     

猪圆环病毒2型感染对猪瘟弱毒疫苗免疫效果的影响

为了解猪圆环病毒2型(PCV2)感染对猪瘟(CSF)弱毒疫苗诱导的体液免疫的影响,从未接种PCV2疫苗的猪场育肥猪中选取疑似病猪和健康猪各10头,分为A、B、两组,其中A组经ELISA试剂盒检测PCV2抗体呈阳性。A、B两组同时免疫CSF弱毒疫苗,免疫后每隔2周检测CSFV抗体水平。结果显示:感染PCV2后的猪只,CSFV抗体为阴性,而未感染PCV2组在接种CSF弱毒疫苗后抗体阳性率较高,抗体水平呈现逐渐升高的趋势,提示PCV2感染对CSF弱毒疫苗的产生有明显的抑制作用。     

文摘

猪瘟弱毒湿苗200倍稀釋对免疫8个月的猪的动力測定这次試驗在10～11月份进行,共計8头猪,5头猪是于2月份接受了猪瘟弱毒湿苗200倍稀釋液预防注射的試驗猪,另3头猪作对照用。全部猪先經11天的健康观察,然后进行猪瘟强毒皮下注射一毫升。猪瘟强毒系由江西省兽医生物藥品制造厂駐厂监察室供給。試驗結果,对照猪先后于接种后第6、7、10日死亡,而免疫猪仅于接种后5～9日体溫稍高,达40℃以上,然稽留时間甚短,精神稍差,食慾略減,至第10日全部恢复。結論認为,200倍稀釋的猪瘟免化弱毒苗对已免疫了8个月的猪能維持其坚强的免疫效果,比較目前应用的100倍稀釋度可降低成本。