量子点及其在食品安全检测中的应用

量子点是近年来发展起来的一种新型荧光探针,与传统有机荧光染料相比具有优良光学性质,以其为基础衍生出的检测技术具有简单、快速、灵敏、稳定和高通量等特点.为了解量子点及其在食品安全检测中的应用研究现状,为量子点在食品安全检测中的进一步推广应用,从量子点的光学特性、制备及表面修饰、量子点在食品安全检测中的应用等方面的研究进行...     

环氧合酶-2的DNA疫苗构建及其在COS-7细胞中表＊达

构建了环氧合酶-2（Cyclooxygenase-2,COX-2）的DNA疫苗载体pVAX1-COX-2,并考察在COS-7细胞中表达.用RT-PCR法从肺癌A549细胞中获得环氧合酶-2基因片段,此片段插入pVAX1载体构建pVAX1-COX-2真核重组表达质粒,脂质体介导法转染COS-7细胞,以pVAX1为对照,收集稳定转染细胞,利用RT-PCR和West-ern-blot分别在mRNA和蛋白水平上考察COX-2表达.实验结果表明：RT-PCR法从A549细胞mRNA中扩增1.8 kb的COX-2基因片段,酶切与测序结果表明所构建的真核表达载体pVAX1-COX-2与预期相符,质脂体法成功地将质粒DNA转染到COS-7细胞中.RT-PCR和Western-blot分析结果表明COX-2已表达.因此,所构建的真核表达载体pVAX1-COX-2正确,且在COS-7细胞中表达.     

CdTe量子点与人血清白蛋白的相互作用研究

以水相合成法制备了谷胱甘肽（GSH）修饰的CdTe量子点,并运用紫外-可见吸收光谱（UV-vis）、荧光发射光谱（FL）以及X射线衍射（XRD）对合成所得量子点进行了表征。采用荧光光谱、圆二色谱以及紫外-可见吸收光谱等方法,在近生理条件下研究了谷胱甘肽修饰CdTe量子点与人血清白蛋白（HSA）的相互作用。荧光猝灭和紫外-可见吸收光谱试验结果表明,人血清白蛋白（HSA）和CdTe量子点形成了静态复合物,相互作用力以静电引力为主,而且CdTe量子点会引起HSA构象发生变化。研究结果可为纳米材料的生物安全性研究提供参考。     

紫外光诱导硅表面寡聚乙二醇单分子膜的制备

研究报道了一种表面具有抗蛋白吸附性能硅材料的制备方法。该方法利用紫外光线（波长为254 nm）诱导硅氢烷基化反应机理,将寡聚乙二醇分子共价偶联到硅氢化表面上;采用多种表面分析手段（X射线能谱仪、原子力显微镜、椭圆偏振光谱仪、接触角测量仪等）对所得材料进行综合表征,结果显示寡聚乙二醇分子在硅表面上形成了一层致密的单分子膜。最后试验通过测试寡聚乙二醇膜对纤维蛋白原的吸附性能,表征了修饰后硅表面抗蛋白吸附和热稳定性能。结果表明,寡聚乙二醇单分子膜不仅具有良好的抗蛋白吸附性能,而且在生理环境下可以保持长期的稳定性。由此可以推断,这种表面具有抗蛋白吸附性能的硅材料将在药物载体、蛋白检测芯片、生物微机电系统以及生物传感器等研究领域具有一定的应用价值。     

环氧合酶-2的DNA疫苗构建及其在COS-7细胞中表达

构建了环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2, COX-2)的DNA疫苗载体pVAX1-COX-2, 并考察在COS-7细胞中表达. 用RT-PCR法从肺癌A549细胞中获得环氧合酶-2基因片段, 此片段插入pVAX1载体构建pVAX1-COX-2真核重组表达质粒, 脂质体介导法转染COS-7细胞, 以pVAX1为对照, 收集稳定转染细胞, 利用RT-PCR和Western-blot分别在mRNA和蛋白水平上考察COX-2表达. 实验结果表明: RT-PCR法从A549细胞mRNA中扩增1.8 kb的COX-2基因片段, 酶切与测序结果表明所构建的真核表达载体pVAX1-COX-2与预期相符, 质脂体法成功地将质粒DNA转染到COS-7细胞中. RT-PCR和Western-blot分析结果表明COX-2已表达. 因此, 所构建的真核表达载体pVAX1-COX-2正确, 且在COS-7细胞中表达.     

ZnS-AgInS2型量子点的水溶性修饰

采用二巯基辛酸修饰ZnS-AgInS2型量子点,建立了一种制备水溶性量子点的方法,得到了性能优良的水溶性量子点.该修饰方法简便易行,具有较高的转化率;得到的量子点荧光性能损失较小,可以稳定放置6个月.     

牛朊蛋白在COS-7细胞中的表达

为研究重组蛋白pCI-PrP27-30在COS-7细胞中的表达,用pCI-PrP27-30重组表达载体转染COS-7细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot技术检测目的蛋白的表达。结果表明目的蛋白在COS-7细胞中成功表达。     

Rhodotorula mucilaginosa PA-1合成硒化银量子点及其抗菌活性

硒化银量子点是一种半导体材料,具有特殊的光学和电子特性,因此在许多领域得到了越来越广泛的应用。与化学合成相比,生物合成硒化银量子点具有许多优点,尺寸均匀,绿色安全。以Rhodotorula mucilaginosa PA-1为原料,在好氧条件下生物合成硒化银量子点,并通过光致发光光谱（PL）和荧光显微分析对其进行了表征;透射电子显微镜（TEM）分析硒化银量子点的尺寸和形貌。XPS和XRD分析硒化银量子点的元素价态和晶型。目前,微生物感染已对公众健康构成严重威胁,而卫生机构及其周围环境滥用抗生素导致的多重耐药现象更是加剧了这一威胁。金属纳米颗粒可以诱导细胞死亡,但毒性效应通常是非特异性的。结果以Escherichia coli ATCC 25922为模型致病菌时,发现硒化银量子点可以杀死大量的细菌细胞,具有较好的抗菌活性。     

微生物检测中糖量子点的制备及其与凝集素的相互作用

为了以量子点为探针建立简便快速的病原微生物检测方法,采用配体交换法将具有微生物特异性的糖链偶联到CdSeS/ZnS量子点表面,制备2种糖量子点复合材料（甘露糖-量子点和半乳糖-量子点）。通过对它们的结构、物性和光谱学特性进行表征,结果显示：2种糖量子点均具有良好的水溶性、荧光发射和紫外-可见光吸收性能。进一步以这2种糖...     

鹅α干扰素基因在COS-7细胞中的瞬时表达及抗病毒功能初探

为了研究鹅α干扰素( goIFN-α)基因的特性和功能,将天府肉鹅的α干扰素基因克隆到pcDNA3.1(+)真核表达载体上,构建重组质粒pcDNA3.1-goIFN-α,脂质体介导将其转入COS-7细胞中;应用间接免疫荧光、酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和免疫印迹(Western-blot)法检测goIFN-α基因在COS-7细胞中的转录和表达情况,并对COS-7细胞表达上清液进行抗病毒活性检测.结果表明:目的蛋白在转染12 h后就可以被检测出,36 h前目的蛋白在上清液中快速增加,之后增加速度变慢;重组质粒能够在COS-7细胞内得到高效表达,表达的蛋白分子质量为38ku,比预测的分子质量(约21 ku)大;间接免疫荧光显示,细胞内出现黄绿色荧光,胞核附近最亮;表达产物经细胞病变抑制法测定,显示出具有明显的抗猪水泡性口炎病毒(VSV)及小鹅瘟病毒(GPV)的活性.     

Conducting Layered Organic-inorganic Halides Containing <110>-Oriented Perovskite Sheets

Single crystals of the layered organic-inorganic perovskites, [NH(2)C(I=NH(2)](2)(CH(3)NH(3))m SnmI3m+2, were prepared by an aqueous solution growth technique. In contrast to the recently discovered family, (C(4)H(9)NH(3))(2)(CH(3)NH(3))n-1SnnI3n+1, which consists of (100)-terminated perovskite layers, structure determination reveals an unusual structural class with sets of m <110>-oriented CH(3)NH(3)SnI(3) perovskite sheets separated by iodoformamidinium cations. Whereas the m = 2 compound is semiconducting with a band gap of 0.33 +/- 0.05 electron volt, increasing m leads to more metallic character. The ability to control perovskite sheet orientation through the choice of organic cation demonstrates the flexibility provided by organic-inorganic perovskites and adds an important handle for tailoring and understanding lower dimensional transport in layered perovskites.     

不同营养源对人工湿地基质生物膜培养液pH值的影响

采用恒温摇床培养方法,研究了不同营养源(处理1:尿素+乙酸钠;处理2:亚硝酸钠+乙酸钠;处理3:硝酸钾+乙酸钠;处理4:碳酸氢铵;处理5:硫酸铵+碳酸氢钠;处理6:磷酸二氢钾+碳酸氢钠)对复合垂直流人工湿地基质生物膜培养液pH值的影响,探讨了pH值变化过程中生物膜脱氢酶活性和多糖含量的变化规律.结果表明,处理1、4以及5中培养液pH值先下降然后再上升,但下降和上升的幅度不同.处理2、3以及6中培养液pH值添加碳源前在7.30～7.40之间缓慢变化,添加碳源后均上升至9.00左右.在培养液pH值变化的过程中,生物膜脱氢酶活性和多糖含量也发生改变.处理1、2、3中生物膜脱氢酶活性均在pH值上升的过程中达到最高值,而处理4、5、6中脱氢酶活性随pH值的变化呈下降趋势.对于所设6个处理,除处理4中多糖含量在整个试验过程中基本不变外,其余5个处理中多糖含量均在pH值上升过程中一直增加.     

舍饲生长期牦牛NH3排放及其对CH4与CO2

为舍饲育肥牦牛高效生态生产、减少有害气体和温室气体排放提供参考,采用大型呼吸测热环控舱(Chamber)模拟舍饲状态,对4头生长期育肥牦牛排放的主要温室气体甲烷(CH4)和二氧化碳(CO2)及有害气体氨气(NH3)进行动态监测.结果表明:牦牛在采食1.5~3 h后CH4排放量达最大值,维持一段时间后,排放量逐渐下降;CO2排放相对平稳;NH3排放无明显规律.CH4、CO2和NH3日平均排放量分别为22.42 g/头、1 023.10 g/头和5.84 g/头,舍内NH3浓度为157.29 mg/m3,超出牦牛耐受氨气浓度.NH3排放不影响CH4和CO2排放规律,但是影响气体总排放量.     

An Inorganic Double Helix: Hydrothermal Synthesis, Structure, and Magnetism of Chiral [(CH3)2NH2]K4[V10O10(H2O)2(OH)4(PO4)7]{middle dot}4H2O

Very complicated inorganic solids can be self-assembled from structurally simple precursors as illustrated by the hydrothermal synthesis of the vanadium phosphate, [(CH(3))(2)NH(2)]K(4)[V(10)O(10)(H(2)O)(2)(OH)(4)(PO(4))(7)].4H(2)O, 1, which contains chiral double helices formed from interpenetrating spirals of vanadium oxo pentamers bonded together by P(5+). These double helices are in turn intertwined with each other in a manner that generates unusual tunnels and cavities that are filled with (CH(3))(2)NH(2)(+) and K(+) cations, respectively. The unit cell contents of dark blue phosphate 1, which crystallizes in the enantiomorphic space group P4(3) with lattice constants a = 12.130 and c = 30.555 angstroms, are chiral; only one enantiomorph is present in a given crystal. Magnetization measurements show that 1 is paramagnetic with ten unpaired electrons per formula unit at higher temperatures and that antiferromagnetic interactions develop at lower temperatures.     

Role of the ENTH domain in phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate binding and endocytosis

Endocytic proteins such as epsin, AP180, and Hip1R (Sla2p) share a conserved modular region termed the epsin NH2-terminal homology (ENTH) domain, which plays a crucial role in clathrin-mediated endocytosis through an unknown target. Here, we demonstrate a strong affinity of the ENTH domain for phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate [PtdIns(4,5)P2]. With nuclear magnetic resonance analysis of the epsin ENTH domain, we determined that a cleft formed with positively charged residues contributed to phosphoinositide binding. Overexpression of a mutant, epsin Lys76 --> Ala76, with an ENTH domain defective in phosphoinositide binding, blocked epidermal growth factor internalization in COS-7 cells. Thus, interaction between the ENTH domain and PtdIns(4,5)P2 is essential for endocytosis mediated by clathrin-coated pits.     

含CpG序列PRRSV ORF5基因真核质粒构建及其免疫原性的研究

 【目的】提高猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）基因免疫的效果,构建含CpG基序和PRRSV ORF5的真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5。【方法】经酶切鉴定和序列测定,将重组质粒转染COS-7细胞,经间接免疫荧光试验证实CpG-pVAX1-ORF5可表达PRRSV GP5蛋白。免疫SPF小鼠,检测鼠的特异性抗体滴度、脾T淋巴细胞亚群数量（CD4+和CD8+）以及淋巴细胞增殖反应（MTT法）水平。【结果】本试验构建的含CpG基序真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5能诱导小鼠产生针对PRRSV的体液免疫与细胞免疫。【结论】CpG-ODN可提高PRRSV基因疫苗的免疫效果。     

Greenhouse Effects due to Man-Mad Perturbations of Trace Gases

Nitrous oxide, methane, ammonia, and a number of other trace constituents in the earth's atmosphere have infrared absorption bands in the spectral region 7 to 14 microm and contribute to the atmospheric greenhouse effect. The concentrations of these trace gases may undergo substantial changes because of man's activities. Extensive use of chemical fertilizers and combustion of fossil fuels may perturb the nitrogen cycle, leading to increases in atmospheric N(2)O, and the same perturbing processes may increase the amounts of atmospheric CH(4) and NH(3). We use a one-dimensional radiative-convective model for the atmospheric thermal structure to compute the change in the surface temperature of the earth for large assumed increases in the trace gas concentrations; doubling the N(2)O, CH(4), and NH(3) concentrations is found to cause additive increases in the surface temperature of 0.7 degrees , 0.3 degrees , and 0.1 degrees K, respectively. These systematic effects on the earth's radiation budget would have substantial climatic significance. It is therefore important that the abundances of these trace gases be accurately monitored to determine the actual trends of their concentrations.     

含CpG序列PRRSV SD2 E基因真核表达载体质粒构建及表达

为了提高猪生殖与呼吸综合征病毒山东株(PRRSV SD2株)基因免疫的效果,将PRRSV SD2 E基因插入哺乳动物表达载体PVAX1中,构建出PVAX1-E质粒。再将已筛选出的CpG-ODN序列通过在其两端的粘性酶切末端定向插入含PVAX 1-E的真核表达载体,构建含CpG基因序列真核重组表达质粒CpG-pVAX 1-E。将重组质粒转染COS-7细胞,经RT-PCR检测E基因mRNA的转录和间接免疫荧光试验(IFA)证实:CpG-pVAX 1-E可表达PRRSV GP5蛋白。试验结果为进一步研究PRRSV SD2 ORF5动物免疫反应奠定基础。     

四爿藻培养模式的筛选及其培养基的优化

[目的]为了提高热带四爿藻的生长速率。[方法]以"宁波大学3#微藻培养基"为基础,分别添加有机碳(葡萄糖和乙酸钠)对四爿藻进行自养、兼养及异养培养,筛选出促进四爿藻快速生长的培养模式,并通过单因子及正交试验,优化其培养基配方。然后用优化培养基与"宁波大学3#微藻培养基"对比培养四爿藻。[结果]乙酸钠是四爿藻兼养培养的适宜有机碳,其最佳的乙酸钠浓度为6 g/L。获得了四爿藻的兼养培养基为:6 g/L CH3COONa、50 mg/L NH2CONH2-N、2 mg/L Ca(H2PO4)2-P、1 mg/L Fe SO4-Fe、1 mg/L Vitamin B1、0.000 5 mg/L Vitamin B12和0.5 mg/L Vitamin H。优化兼养培养基与"宁波大学3#微藻培养基"对比培养四爿藻的结果表明,培养第7天,兼养培养收获的藻细胞密度、干重分别达到3.84×106cells/m L及1.14 g/L,分别是"宁波大学3#微藻培养基"的2.83倍、3.12倍。[结论]四爿藻进行兼养培养可获得高密度培养。