微绿球藻 (Nannochloropsis oculata培养基的优化

【目的】微绿球藻 (Nannochloropsis oculata) 是一种优良的单细胞饵料微藻,广泛应用于水产养殖。 优化微绿球藻培养基,以期提高其生长速率,降低生产成本。【方法】以宁波大学 3# 配方为基础微藻培养液, 以乙酸钠为碳源,硝酸钾、尿素和氯化铵为氮源,磷酸二氢钾和磷酸二氢钠为磷源,硫酸亚铁和柠檬酸铁为铁源, 通过单因子和正交试验,研究了碳、氮、磷、铁、维生素 B1 （VB1）和 B12（VB12）等主要营养元素对微绿球藻生长、 繁殖的影响。【结果】获得了以天然海水为基础的微绿球藻优化培养基：3 g/L CHCOONa、20 mg/L NH4CL-N、 2 mg/L KH2PO4-P、3 mg/L FeSO4-Fe、0.05 mg/L VB1 和 0.005mg/L VB12;采用优化培养基与宁波大学 3# 培养基对 比培养微绿球藻,结果表明 , 培养 2 ～ 6 d,优化培养基收获微绿球藻的生物量 ( 细胞密度 ) 比宁波大学 3# 培养 基的分别提高了 2.21、2.55、2.30、1.97、1.7 倍;培养 6 d,优化培养基中微绿球藻收获的生物量 ( 细胞密度 ) 达 到 1.74×107 个 /mL, 是宁波大学 3# 培养基的 1.7 倍。【结论】优化培养基极显著地提高了微绿球藻的生物量, 是微绿球藻的良好培养基。     

固定化四爿藻的制备及其去除养殖废水中氮·磷的效果

[目的]探究固定化四爿藻去除养殖废水中氨氮(NH_4~+-N)、亚硝酸氮(NO_2~--N)和活性磷酸盐(PO_4~(3-)-P)的效果。[方法]采用海藻酸钠固定化包埋技术开展了四爿藻固定化培养,探究了藻球直径、藻细胞包埋密度、海藻酸钠浓度及氯化钙浓度等条件对四爿藻固定化培养的影响。同时测定了固定化四爿藻去除养殖水体中NH_4~+-N、NO_2~--N、PO_4~(3-)-P的效果。[结果]四爿藻固定化培养的优化条件为藻球直径为4 mm、藻细胞包埋密度为1.82×10~4个/mL、海藻酸钠质量浓度为10 g/L及氯化钙浓度为20 g/L;在石斑鱼养殖废水中引入固定化四爿藻,试验第3天,NH_4~+-N去除率达98.87%、NO_2~--N去除率达98.33%和PO_4~(3-)-P去除率达83.70%。[结论]采用海藻酸钠固定化包埋技术不影响四爿藻的生理活性;固定化四爿藻应用于净化养殖水环境具有很好的前景。     

舟形藻的污水培养及条件优化

[目的]提高舟形藻培养的生物量,为实现该藻的工业化生产提供依据。[方法]根据地域特点对利用污水培养舟形藻的可行性进行初探,并通过单因子和正交试验研究了一系列主要培养每件（N、P、Fe、Si营养源和培养基盐度）对该藻生长的影响。[结果]适合舟形藻生长的最佳培养条件为：以南京工业大学小二楼人工湖水为培养基基础溶剂、尿素360mg／L、Na2HPO4·12H,O150mg／L、柠檬酸铁50rag／L、Na,SiO3·9H2Ｏ2000mg／L、盐度2．0mol／L;舟形藻适应污水能力较强,并且能够很好地利用污水中的营养源,通过培养条件的优化,既降低了培养成本,也使该藻最高生物量干重达4．766g/L,是原始培养基的3．57倍和优化培养基1号的1．90倍。[结论]该研究为舟形藻的室外大规模培养与污水治理相结合的研究奠定了基础。     

藻百年的组培快繁技术研究

[目的]研究藻百年（Exacum tetragonum）的离体培养和快速繁殖技术。[方法]利用藻百年的茎尖和茎段作为外植体进行组织培养和快速繁殖。[结果]结果表明,MS＋6-BA2mg/L＋NAA0.2 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂8 g/L为最适诱导培养基;MS＋6-BA1 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂8 g/L为最适增殖培养基,1/2 MS＋NAA0.3 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂8 g/L为最适生根培养基。[结论]该研究可为其他龙胆科植物的组织培养与快速繁殖提供方法参考。     

响应面法优化异养培养条件提高链带藻Z8油脂产量的研究

[目的]微藻油脂含量过低是阻碍微藻生物柴油工业化的主要障碍之一,研究拟通过单因子优化以及响应面法优化链带藻Z8(Desmodesmus intermedius Z8)异养培养条件,从而提高其油脂产量.[方法]通过单因素试验探究不同浓度条件下的葡萄糖、硫酸镁、柠檬酸、磷酸氢二钾、硝酸钠及氯化钙等对藻种Z8生物量和总脂量的影响;在此基础上利用P-B试验从6个考察因素中筛选出显著影响因素,最后通过CCD试验来确定最佳工艺条件.[结果]通过P-B试验筛选出4个显著影响因素,分别为:葡萄糖、硫酸镁、柠檬酸、磷酸氢二钾;通过CCD试验获得了最佳工艺条件,具体如下:硫酸镁质量浓度200 mg/L、磷酸氢二钾质量浓度0.07 g/L、葡萄糖质量浓度18 g/L、柠檬酸质量浓度9 mg/L、硝酸钠质量浓度1.5 g/L及氯化钙质量浓度0.04 g/L.在此条件下藻株Z8的生物量可达到7.7 g/L,与未优化前的生物量5.47 g/L相比提高了40.77％,总脂量可达3.17 g/L,与优化前的总脂量2.47 g/L相比提高了128％.[结论]经响应面法优化后的链带藻Z8生物量和总脂量均有较大提高,研究所采用的递进式优化方法可为提高微藻的油脂产量及其它发酵工艺的提升提供有益的参考.     

农药和抗生素在微藻纯种培养中的应用

纯种的分离培养是微藻产品开发尧规模培养和科学研究的基础遥微藻易受其他生物污染袁又无法低温保存袁导致其分离培养面临困难遥比较了不同浓度的3种农药和3种抗生素分别对微茫藻18A8袁小球藻CE14和亚心形扁藻袁小新月菱形藻生长的影 响袁确定它们用于藻种分离的最佳浓度为百菌清25 mg/L尧水合霉素25 mg/L尧绿邦200 mg/L尧卡那霉素25 mg/L尧氨苄西林25 mg/L和制菌霉素1.25 mg/L遥采集含有微藻的淡水尧海水水样先后培养在混合添加了3种适宜浓度的农药和抗生素的培养基袁最终抑制了微藻中其他真菌和细菌的生长袁实现了微藻的藻种纯化遥     

微藻异养/兼养生产多不饱和脂肪酸以及向卤虫的传递

等鞭金藻（Isochrysis sp.）与缺刻缘绿藻（Myrmecia incisa）分别富含二十二碳六烯酸（DHA）和花生四烯酸（ArA），是具有极高营养价值的微藻。对于这两种微藻的培养，大多是以传统的光自养为主；本研究展开了异养/兼养培养方式的探索，以期获得更高密度的生物量，以及更高产量的DHA与ArA。在使用葡萄糖作为外源有机碳源时，等鞭金藻和缺刻缘绿藻均可以实现异养生长，在黑暗条件下快速积累生物量。适宜等鞭金藻和缺刻缘绿藻异养的葡萄糖浓度分别为5 g/L和1 g/L。在此基础上，继续探究了氮浓度的影响：对于等鞭金藻，300 mg/L的硝酸钠对于生物量的生产最佳，同时对于胞内DHA积累的促进作用最强；对于缺刻缘绿藻，氮浓度对于微藻的生长影响不明显，但对其ArA的含量影响显著，缺氮培养时ArA的含量最高。在证实了两种微藻的异养特性与最适碳、氮营养供给后，我们进一步开展了兼养的研究，从而获得了显著提升的微藻生物量以及目标多不饱和脂肪酸的含量。最后，将兼养获得的两种微藻用于投喂卤虫，结果表明DHA与ArA都可以被有效传递给卤虫，从而有望开发成为营养强化型的水产饵料。本研究为等鞭金藻和缺刻缘绿藻的资源化利用提供了有价值的技术参考。     

产类胡萝卜素的海洋红酵母的培养条件优化研究

[目的]优化产类胡萝卜素的海洋红酵母的培养条件。[方法]以海洋红酵母Z44为试验菌株对其培养条件进行优化,同时,研究了添加物及培养条件对细胞量及类胡萝卜素产量的影响。[结果]得到的培养基组成为:蔗糖25.0 g/L,酵母膏20.8 g/L,草酸铵4.2g/L,KH2PO44.0 g/L,Na2HPO44.0 g/L,MgSO4.7H2O 0.2 g/L,CaCl20.2 g/L,氟化铵10 mg/L,柠檬酸30 mg/L,L-亮氨酸30 mg/L,L-缬氨酸40 mg/L。在培养基中加入氟化铵、柠檬酸、L-亮氨酸及L-缬氨酸时,红酵母的类胡萝卜素产量是对照值的1.5倍。对培养条件的优化结果为:装液量为250 ml三角瓶中装60 ml的培养基,接种量8%,培养温度30℃,初始pH为5.5,培养结束时间为66 h,培养条件优化后,红酵母的生物量及类胡萝卜素产量分别为28.2 g/L和6.72 mg/L,分别是未优化时的1.26倍和1.87倍。[结论]研究可为海洋红酵母生产类胡萝卜素的工业化应用提供参考。     

黄菠萝嫩茎离体培养再生体系的建立

[目的]优化黄菠萝离体培养再生体系.[方法]以黄菠萝带腋芽的嫩茎为外植体,采用正交设计研究其离体培养再生体系.[结果]诱导黄菠萝的最佳初代培养基是MS+ 1.5 mg/L 6-BA+ 0.06 mg/L NAA+20 g/L蔗糖,继代培养的最佳培养基组合是MS+1.0mg/L 6-BA +0.1 mg/L NAA,最佳生根培养基组合是1/2MS+0.4 mg/LNAA +30 g/L蔗糖.[结论]以黄菠萝带腋芽的嫩茎为外植体,采用正交设计研究其离体培养和植株再生技术方法是可行的.     

速生优良杉木组培继代及生根培养研究

[目的]研究培养基、6-BA、IBA、NAA等4个因子对杉木（Cunninghamia lanceolata）组培苗芽增殖的影响和蔗糖、IBA、NAA、ABT6#等4个因子对组培苗生根培养的影响,寻求最适杉木组培苗芽增殖和生根的培养基配方,为杉木组培快繁提供一些有益的参考。[方法]应用正交设计法研究培养基、6-BA、IBA、NAA等4个因子对杉木组培苗芽增殖的影响和蔗糖、IBA、NAA、ABT6#等4个因子对组培苗生根培养的影响。[结果]最佳的继代增殖培养基是1/3MS＋蔗糖30 g/L＋6-BA 0.7 mg/L＋IBA 0.5 mg/L,最适于生根的培养基是1/2MS＋蔗糖30 g/L＋IBA 1.2 mg/L＋NAA 0.4 mg/L。[结论]该研究为杉木组织培养中选择合适的培养基提供了科学依据。     

鼠李糖乳杆菌LT22发酵培养基优化

[目的]提高发酵液中鼠李糖乳杆菌LT22的菌体浓度。[方法]采用Plackett-Burman设计对培养基中相关影响因素的效应进行评价,筛选出3个重要因素依次为葡萄糖、酵母膏和吐温80;然后进行最陡爬坡试验逼近最佳响应面区域;最后通过Box-Behnken设计及响应面分析法确定最佳培养基配方。[结果]鼠李糖乳杆菌LT22的最佳培养基配方为:葡萄糖17 g、蛋白胨12 g、牛肉浸膏10 g、酵母膏4.8 g、乙酸钠3 g,柠檬酸氢二铵2 g、MnSO4.H2O 0.1 g、MgSO4.7H2O 0.6 g、吐温80 0.6 ml、蒸馏水1 000 ml。用优化培养培养鼠李糖乳杆菌,其发酵液的菌体含量是MRS培养的6.7倍。[结论]结果为鼠李糖乳杆菌动物微生态制剂的研制奠定了基础。     

小球藻自养、异养和混养特性的研究

[目的]为小球藻的高密度培养及开发高附加值代谢产物提供基础参数。[方法]从细胞生长、营养物质吸收、细胞生理生化特性等方面,研究小球藻自养、异养和混养特性。[结果]在异养和混养条件下小球藻生物量显著提高,最大生物量分别是自养时的3.2、4.0倍,对葡萄糖的吸收与生长状态相对应;在不同营养方式下细胞组分存在差别,在异养和混养条件下蛋白质和碳水化合物含量降低,但总脂含量增加;与自养相比,异养和混养时叶绿素含量降低,激发能在2个光合系统间的分配比PSII/PSI降低。[结论]混合培养在高密度高油脂含率小球藻培养方面具重要的应用前景。     

云锦杜鹃离体再生培养基的条件优化

[目的]研究云锦杜鹃组织培养再生植株的最佳培养基配方条件,为其快速繁殖及体细胞杂交再生植株提供基础技术参考。[方法]以云锦杜鹃幼叶为材料,接种在MS、WMP、6,7-V3种基本培养基以及不同的激素组合、培养基不同磷素用量等各种处理中,重复4次进行离体培养,筛选其脱分化和再分化效果。[结果]发现WMP有利于诱导叶出愈伤,不定芽分化最佳的基本培养基为6,7-V;继代和增殖培养基为6,7-V＋0.5mg/LZT＋0.1mg/LNAA＋0.1mg/LIAA,平均增殖系数可达12.25;试管苗最适生根培养基为1/26,7-V＋0.1mg/LNAA＋0.1mg/LIAA,30d的平均生根率达到91.20%。研究还发现,在培养基中提高磷素用量有利于再生芽的伸长。[结论]6,7-V培养基在云锦杜鹃幼叶不定芽发生中起显著作用,该研究建立了最适的云锦杜鹃离体再生体系。     

费乌瑞它马铃薯脱毒技术研究

[目的]解决费乌瑞它马铃薯种薯退化问题。[方法]利用植物茎尖脱毒培养技术对费乌瑞它马铃薯进行脱毒。[结果]芽外植体灭菌方式以5%NaClO_3 min+0.1%HgCl_2灭菌7 min+70%乙醇0.5 min组合效果最好;芽外植体消毒灭菌后在MS基本培养基中培养效果最好;6-BA、NAA对芽外植体的诱导和分化有促进作用,最佳诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L,此时芽分化成苗率最高。[结论]该研究可为费乌瑞它马铃薯种薯生产提供理论依据。     

广藿香组培繁殖技术的研究

[目地]研究广藿香组培快繁技术。[方法]利用MS加入不同质量浓度6-苄基氨基腺嘌呤（6-BA）和吲哚丁酸（IBA）,进行试验。[结果]结果表明,MS培养基加入0．5mg／L6-BA和0．1mg／LIBA时,产生的愈伤组织的量最多,且不定芽增殖效果最好。无根苗在172Ms＋IBA1．5mg,／L上生根率最高;试管苗在珍珠岩＋蛭石成活率最高。[结论]该试验可为广藿香的组培繁殖提供参考。     

灯盏花组培快繁与植株再生

[目的]建立较为系统的灯盏花组培体系,培育、壮大和发展灯盏花这一独具特色和优势的产业。[方法]以灯盏花（Erigeron breviscapus）的叶片为外植体,用不同浓度的激素6-BA、2,4-D、KT和NAA对其进行愈伤组织的诱导和再生植株的研究。[结果]诱导愈伤组织最佳的培养基是MS＋KT0．5mg／L＋2,4-D10mg／L和MS＋2,4-D0．5mg／L＋6-BA0．5mg／L,诱导率为100％;二者相比,前者长出的愈伤组织较为紧密,而后者松散性好;MS＋6-BA0．5mg／L＋10％香蕉汁是诱导芽最佳的培养基,达87％;加入0．3mg／L NAA的1／2MS培养基对生根最有利,生根率达83％。[结论]生长素与细胞分裂素的合理配比有利于快速构建灯盏花培养体系。     

矮牵牛茎尖诱导分化研究

[目的]推动矮牵牛组培的产业化,达到使其苗木生产快速、经济的目的。[方法]共配制5种MS培养基,选择无污染、生长健壮的矮牵牛茎尖作为外植体,进行诱导分化单因素试验,研究不同浓度的NAA对矮牵牛外植体诱导成活率的影响,进而选择适合矮牵牛诱导成活的最佳培养基。[结果]培养基中NAA浓度的差异对外植体成活率的影响较大。NAA浓度为0.5mg/L的培养基为最佳诱导成活培养基,NAA浓度为0.7及0.3mg/L的培养基对矮牵牛的作用仅次于NAA浓度为0.5mg/L的培养基,但NAA浓度为0.1及0.9mg/L的培养基处理效果不是十分理想。筛选出矮牵牛组培最佳诱导分化培养基为MS＋NAA0.5mg/L＋6-BA0.3mg/L＋琼脂8g/L＋蔗糖30g/L。[结论]研究结果可为矮牵牛的组织培养提供参考。     

2种培养液对小球藻生长的影响

[目的]研究宁波3号培养液和f/2培养液对小球藻生长的影响。[方法]在相同条件下,分别用宁波3号和f/2培养液对小球藻进行为期7 d的培养,每天上午用血小球计数器在显微镜下对2种培养液中的小球藻计数。[结果]前4 d在f/2中生长的小球藻优于宁波3号培养液中生长的小球藻,第5天以后,也就是处于指数生长期和稳定期的小球藻在宁波3号培养液中的生长比在f/2中生长得快,在数量上明显占有优势。[结论]在相同条件下,宁波3号培养液相对f/2培养液更有利于小球藻的生长。     

青钱柳愈伤组织诱导与增殖的研究(英文)

[目的]对青钱柳愈伤组织的诱导与增殖进行初步研究。[方法]以青钱柳茎段和叶片为外植体,利用MS、WPM、改良DKW3种基本培养基,添加不同浓度配比的6-BA和IBA,来探讨愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基配方。[结果]诱导茎段和叶片愈伤组织产生的最佳培养基配方分别为:MS+4.0mg/L6-BA+2.0mg/LIBA和MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LIBA;愈伤组织增殖时的最佳培养基为:MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/LIBA。200mg/LVc对抑制青钱柳愈伤组织褐化效果最好,褐化率仅为5.71%。[结论]为青钱柳组培快繁体系的建立和分子育种研究的开展奠定了一定理论基础。