霍山石斛组培苗移栽驯化过程中叶抗氧化酶活性、超微结构及4种有效成分的变化

通过对霍山石斛(Dendrobium huoshanense)组培苗在移栽驯化过程中(0、10、30、60 d)叶的抗氧化酶活性、细胞超微结构及有效成分积累等特征指标的变化研究,阐明了其移栽驯化过程中的适应性调节。结果表明:霍山石斛苗叶片超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性在移栽前期均先降后升,移栽后60 d,POD的活性继续微升,SOD、CAT活性则微降;移栽前,叶细胞内含物不丰富,叶绿体长椭圆形,片层结构发育不完善,移栽后10 d,细胞结构显示有所损坏,叶绿体多变为短椭圆形,线粒体增多,后期,叶绿体形状趋于丰满且结构更加完善,基质片层和基粒片层逐渐完整清晰,淀粉粒、嗜锇颗粒增多,线粒体增多;叶片总蛋白、总氨基酸、多糖以及总生物碱质量分数在前期均累积不多,后期涨幅增大,总体呈上升趋势,移栽后60 d以上各质量分数分别比移栽前增长20.69%、25.93%、11.51%、44.44%。移栽后各项指标发生适应性变化,并且后期良性发展,从而也表明了移栽条件的合适设置。     

取样时间和消毒方法对青钱柳茎段腋芽诱导的影响

[目的]解决青钱柳组织培养过程中外植体污染问题。[方法]以青钱柳带腋芽的茎段为材料,研究不同取样时间和消毒方法对青钱柳茎段腋芽萌发率的影响。[结果]最佳采样时间为4、5月,最优消毒处理分别为70%乙醇30 s+0.10%升汞12 min(4月)和70%乙醇30 s+0.05%升汞16 min(5月)。[结论]试验结果为建立青钱柳的无性快繁体系奠定了基础。     

香蕉凝集素基因启动子5′远端的分离分析及鉴定

在已知香蕉果实特异表达凝集素(BanLec)启动子670 bp序列的基础上,利用染色体步移方法,克隆获得该段序列5′端上游远端序列330 bp,从而得到该启动子1 000 bp序列。通过Promoter predictions、Plant CARE软件分析表明,新获得的BanLec启动子5′端330 bp序列中具有更多组织特异性表达调控元件。构建总长度为1 000 bp的BanLec启动子表达载体,以35 S启动子和原有670 bp长度BanLec启动子表达载体为对照,利用基因枪转化香蕉根、叶和果实,测量GUS基因和GFP基因瞬时表达,结果证明长度为1 000 bp BanLec启动子为果实特异表达启动子,启动活性高于原有的670 bp BanLec启动子和35S启动子。     

青钱柳愈伤组织诱导与增殖的初步研究

[目的]对青钱柳愈伤组织的诱导与增殖进行初步研究。[方法]以青钱柳茎段和叶片为外植体,利用MS、WPM、改良DKW 3种基本培养基,添加不同浓度配比的6-BA和IBA,来探讨愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基配方。[结果]诱导茎段和叶片愈伤组织产生的最佳培养基配方分别为:MS+4.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L IBA和MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA;愈伤组织增殖时的最佳培养基为:MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA。200 mg/L Vc对抑制青钱柳愈伤组织褐化效果最好,褐化率仅为5.71%。[结论]为青钱柳组培快繁体系的建立和分子育种研究的开展奠定了一定理论基础。     

消毒方法和培养基对青钱柳茎段腋芽萌发的影响

为建立有效的青钱柳组培快繁体系,以青钱柳茎段腋芽作为外植体,研究了不同消毒方法和基本培养基对腋芽萌发的影响.结果表明,先用70%酒精消毒30 s,再用0.1%氯化汞消毒12 min,腋芽污染率最低、芽萌发率最高,分别为31.25%、81.82%.极差分析结果表明,酒精处理时间对萌发率影响较大,是诱导腋芽萌发的主要因素,而氯化汞处理时间对污染率影响较大,是影响消毒效果的主要因素.在所试的7个基本培养基中,芽萌发率存在一定的差异,以WPM和改良MS培养基效果最佳,萌发率分别达到83.3%和75.76%,并且与其他处理差异显著(P<0.05);WPM培养基芽生长状况最好,叶深绿色、叶片伸展、茎粗壮.研究结果为青钱柳组培快繁体系的建立提供依据,并为其他林木的快繁研究提供技术参考.     

洪泽湖地区“一稻三虾”模式气象致灾因子分析

通过对洪泽湖周边地区气候特点和小龙虾"一稻三虾"养殖模式中各生产时段分析,作者认为对小龙虾养殖造成灾害的气象致灾因子主要有以下几个:3月中旬到4月中旬的倒春寒天气,春夏之交异常干旱天气,夏季持续高温天气,暴雨和台风以及秋季低温连阴雨等。     

大肠杆菌合成2''-岩藻糖基乳糖基因组 整合型菌株构建及发酵优化

2''-岩藻糖基乳糖( 2''-Fucosyllactose, 2''-FL）是一种岩藻糖化人乳低聚糖,具有预防肠道疾病、提高免疫力、促进大脑发育等重要生理功能。基于基因组水平,通过敲除大肠杆菌Escherichia coli BL21（DE3）中2''-FL合成前体物质相关代谢基因,如β-半乳糖苷酶基因（β-galactosidase, lacZ）、UDP-葡萄糖脂质载体转移酶基因(undecaprenyl-phosphate glucose-1-phosphate transferase, wcaJ)和GDP-甘露糖基水解酶基因(GDP-mannose mannosyl hydrolase, nudD),构建2''-FL合成底盘细胞;在此基础上,将外源α-1,2-岩藻糖基转移酶基因(α-1,2-Fucosyltransferase, wbgL)和磷酸甘露糖变位酶基因(phosphomannomutase, manB)、甘露糖-1-磷酸鸟苷转移酶基因(annose-1-phosphate guanylyltransferas, manC)、GDP-D-甘露糖-4, 6-脱水酶基因(GDP-mannose 4, 6-dehydratase, gmd)和GDP-岩藻糖合酶基因(GDP-L-fucose synthase, wcaG)引入到大肠杆菌基因组中,探究在基因组水平过表达2''-FL合成基因对2''-FL产量的影响。结果表明,2''-FL在所构建菌株B-05的摇瓶含量达到了1.99 g·L^-1。进一步通过摇瓶发酵优化确定了最优发酵条件：IPTG诱导浓度为0.4 mmol·L^-1、诱导时OD₆₀₀为2.4,诱导温度为28 ℃。在此条件下,摇瓶中2''-FL合成量达到了3.92 g·L^-1。最后在5 L发酵罐中,2''-FL含量达到了43.48 g·L^-1。研究表明通过将外源2''-FL相关合成基因导入基因组中进行过表达,实现了2''-FL高效合成,为构建整合型2''-FL菌株提供了数据支撑。     

金合欢属植物组织培养研究进展

金合欢属植物生长速度快、产量高、材质好、适应性强、用途广,在我国南方林业生产中占据重要地位。掌握该属植物的组织培养技术,对促进其产业发展具有重大意义。文中从外植体、基本培养基、培养条件、植物生长调节剂、组培苗移栽等方面简述20世纪80年代以来金合欢属植物组织培养技术的研究进展,并就组培快繁中存在的主要问题提出相应的解决方法,同时提出今后的研究展望,以期为建立金合欢属植物高效组培体系及工厂化育苗提供参考。     

青钱柳愈伤组织诱导与增殖的研究(英文)

[目的]对青钱柳愈伤组织的诱导与增殖进行初步研究。[方法]以青钱柳茎段和叶片为外植体,利用MS、WPM、改良DKW3种基本培养基,添加不同浓度配比的6-BA和IBA,来探讨愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基配方。[结果]诱导茎段和叶片愈伤组织产生的最佳培养基配方分别为:MS+4.0mg/L6-BA+2.0mg/LIBA和MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LIBA;愈伤组织增殖时的最佳培养基为:MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/LIBA。200mg/LVc对抑制青钱柳愈伤组织褐化效果最好,褐化率仅为5.71%。[结论]为青钱柳组培快繁体系的建立和分子育种研究的开展奠定了一定理论基础。