杜仲愈伤组织诱导和植株再生体系的建立

【目的】研究在BA、NAA、IBA、2,4-D等激素作用下,杜仲愈伤组织诱导、愈伤组织诱导丛生芽及丛生芽诱导生根各阶段的最佳培养基配方,建立杜仲植株再生体系,为杜仲转基因研究提供基础材料。【方法】以杜仲成熟胚、幼嫩胚、叶片和茎段为外植体,使用BA、NAA、IBA、2,4-D等激素,配制成不同质量浓度的培养基,进行杜仲愈伤组织诱导,同时分析愈伤组织诱导丛生芽和丛生芽诱导生根培养基的最佳配方,建立杜仲植株的再生体系。【结果】杜仲愈伤组织诱导的培养基分别为:成熟胚MS+BA 2.0mg/L+NAA 2.5mg/L,诱导率77.8%;幼嫩胚MS+BA 0.5mg/L+2,4-D 2.0mg/L,诱导率88.9%;叶片MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L,诱导率100%;茎段MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,诱导率为100%。愈伤组织诱导不定芽形成的适宜培养基为MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L,不定芽诱导率为88.9%,增殖系数为3±1;杜仲在1/4MS的基本培养基中生根最好,生根率达80%,激素的存在反而会抑制生根。【结论】杜仲成熟胚、幼嫩胚、叶片和茎段均可通过愈伤组织途径诱导不定芽的形成,并诱导生根,建立杜仲愈伤组织再生体系,但不定芽的增殖系数较低。     

‘Siberia’百合再生体系的建立

以东方百合‘Siberia’离体鳞片为外植体,研究不同激素质量浓度对芽的诱导、增殖、小鳞茎形成、叶片和叶柄再生及生根的影响。结果显示:最适不定芽诱导培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率85%;最适增殖培养基为MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.2mg/L,芽增值系数为3.83;不定芽形成鳞茎的适宜培养基为:MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.5mg/L+7%蔗糖,增值系数2.47。鳞片叶片的最适再生培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 1.0mg/L,分化率为92.5%;叶柄的最佳再生培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率为83.3%;暗培养对鳞片叶片及叶柄的再生无显著性的差异,分化率均在80%以上;最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L,生根率100%。     

伊贝母种胚的离体培养

【目的】研究了不同温度、光照时间和激素组合对伊贝母种胚诱导及植株再生的影响.【方法】试验以伊贝母种胚为试验材料,接种于添加了不同激素种类及质量浓度的培养基上,置于不同条件下培养,筛选出伊贝母最佳培养基组合及培养条件.【结果】20℃,12h/d的光照时间为伊贝母种胚诱导的最适条件,诱导率可达72.22%.适合伊贝母种胚不定芽诱导的最佳培养基为MS+0.5mg/L 6-BA+2.0mg/L NAA,出芽率达到75%,分化出的不定芽生长健壮;继代增殖培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,增值系数为6.15.【结论】1/2MS+0.5mg/L NAA为生根的最适宜培养基.     

优质魔芋组培快繁技术研究*

 以魔芋的根状茎为外植体,用正交试验法研究了不同氮素含量的基本培养基、不同浓度的BA以及NAA对魔芋根状茎愈伤组织诱导的影响;不同激素组合对不定芽分化、组培苗生根诱导的影响,并针对魔芋组织培养中的褐变现象采取了有效措施。结果表明:诱导魔芋根状茎愈伤组织产生的最适培养基为NN基本培养基+1.0mg/L BA+1.0mg/L NAA;MS基本培养基+2.0mg/L BA+1.0mg/L IAA为不定芽分化的最适培养基,在不定芽诱导和生长上,BA与IAA的组合较与NAA的组合好;MS+0.5mg/L IBA+0.5mg/L GA3为组培苗的最佳生根培养基,生根率达100%;一定浓度的PVP,Vc或者AC能有效控制褐变现象的发生。     

软籽石榴(Punica granatum L. cv. Yushizi)叶片再生体系的研究

为建立软籽石榴的离体高效再生体系,试验以新梢为材料建立了软籽石榴的无菌体系,并试验了不同激素组合对软籽石榴增殖效果的影响;以叶片为外植体研究了不同培养基组合对不定芽再生频率和伸长的影响。结果表明,茎段增殖培养的最适培养基为MS+6-BA 0.3 mg/L+KT 0.3～0.4 mg/L+NAA 0.1 mg/L;叶片不定芽诱导的最适培养基为MS+TDZ 0.6 mg/L+NAA 0.2 mg/L,在不定芽诱导培养基中添加0.6 mg/L的GA3对不定芽的伸长效果较好。在1/2MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+AC0.5 g/L培养基增殖培养所得芽苗生根效果最优。     

双单倍体南瓜后代子叶离体再生植株研究

【目的】探索一种快速扩繁南瓜双单倍体植株的技术,以扩大双单倍体植株的数量,提高其育种效率。【方法】以双单倍体南瓜后代子叶为外植体,在MS培养基中分别添加不同质量浓度的6-BA（1.0,4.0 mg/L）和NAA（0.05,0.1,0.2,0.5,1.0 mg/L）,筛选最佳组合;在此基础上,继续添加不同质量浓度的2,4-D（0.5,1.0,1.5,2.0 mg/L）,筛选3种激素的最佳组合。在MS＋6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L的不定芽诱导培养基上,研究其对不同苗龄子叶的诱导效果。将不定芽接种在含不同质量浓度NAA (0.05, 0.1, 0.2, 0.5 mg/L)的MS生根培养基上,比较生根率和根系生长势。【结果】在诱芽培养基中,添加2种激素时,以6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L的MS培养基诱导率最高,为66.67％,分化系数为3.89;添加3种激素时,以6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L＋2,4-D 1.5 mg/L的MS培养基诱导率最高,达80.95％,分化系数为4.12。当子叶展开后苗龄为3 d时,不定芽诱导率相对较大,为77.42％。不定芽在MS+0.1 mg/L NAA培养基上生根效果最好,根系生长健壮,生根率达100%。【结论】双单倍体南瓜后代子叶离体再生的适宜激素质量浓度组合为MS＋6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L;以展开后3 d苗龄的子叶作为外植体诱导效果最好;MS+0.1 mg/L NAA是不定芽诱导生根的最适培养基。     

巴戟天的组织培养及快速繁殖

以巴戟天苗的叶片、茎尖、茎段为外植体,通过诱导出不定芽进行快速繁殖。比较了不同外植体在添加不同浓度BA和NAA培养基上的诱导效果,结果表明:带节的茎段在MS 6-BA1.0mg/L NAA0.5mg/L上的不定芽诱导率为95%,不定芽在不添加任何激素的MS培养基上生根率为85%,移栽成活率为90%。     

盐桦(Betula halophila)愈伤组织的高效诱导和不定芽的分化

设计不同激素、不同水平的单因子试验和正交试验,统计盐桦出愈率、分化率,筛选出诱导盐桦愈伤组织的最适外植体和最适培养基.盐桦愈伤组织高效诱导和不定芽分化的最适外植体为茎段;诱导愈伤组织的最适培养基为:LS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.4;愈伤组织分化抽枝的最适培养基为:LS+BA 0.5 mg/L+NAA0.02 mg/L;高效诱导愈伤组织和不定芽分化的最适培养基为:LS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L.琼脂7;,蔗糖浓度20 g/L.愈伤组织诱导率和不定芽分化率分别达到82;和93.6;以上.     

驱蚊香草组织培养技术研究

以驱蚊香草的幼嫩叶片为外植体,应用正交设计法研究了在培养基中添加不同激素和浓度对不定芽诱导、继代增殖和生根培养的影响。结果表明:不定芽诱导的最佳培养基为:MS+NAA 0.3 mg/L+6-BA 2.5 mg/L,分化率为92%;继代增殖培养的最适培养基为:MS+NAA 0.12 mg/L+6-BA 1.5 mg/L,增殖倍数为7.5;最佳生根培养基为:1/2 MS+IBA 0.15 mg/L+NAA 0.5 mg/L,生根率为90.5%。     

百合组织培养技术研究

以百合西伯利亚和索邦的茎尖、鳞片为试材,研究了培养基类型、激素浓度、活性炭对百合苗生长的影响。结果显示:茎尖分化的适宜培养基为MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+BA1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导鳞片产生不定芽的适宜培养基为MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L,西伯利亚的分化率高于索邦;百合继代增殖的适宜培养基为MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;添加活性炭可提高生根率。     

不同浓度的外源激素对香石竹组织培养的影响

研究了不同浓度的外源激素对香石竹组织培养过程中愈伤组织诱导、芽分化和芽增殖的影响。结果表明,愈伤组织的诱导与BA与NAA浓度比及KT浓度有关;芽诱导与BA、KT、NAA均有关;芽增殖与BA的浓度及BA和NAA的浓度比有关。MS+BA 0.3 mg/L+KT0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L培养基对愈伤组织诱导效果最好;最佳的芽分化培养基为MS+BA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 2.0 mg/L,芽分化率达65%;芽增殖培养基以MS+BA 0.3 mg/L+NAA 0.1 mg/L为最佳,增殖芽数最多,玻璃化率最低。     

矮牵牛的组织培养研究

矮牵牛以茎尖、茎段和叶片为外植体,以MS为基本培养基,添加不同的激素配比,在MS BA2mg/L NAA0.1mg/L上诱导形成的愈伤组织块,再移至MS BA1 mg/L NAA 0.1mg/L上分化形成苗,如此交替作用,可达到最高的繁殖倍数、诱导率和分化率,变异苗也最少,能取得最佳效果;生根适宜的培养基为NS NAA0.5mg/L和MS NAA0.3mg/L IAA 0.2mg/L。     

芦笋组织培养及快繁技术体系的研究

对芦笋的启动培养、试管繁殖及其移栽技术进行了研究,建立了组培快繁技术体系。结果如下:以出土嫩茎绿色部份为外植体,MS NAA 0.1 mg/L BA 0.1 mg/L为启动培养基,萌芽率可达53.7%;以MS培养基附加NAA 0.1 mg/L KT 0.1 mg/L BA 0.3~0.4 mg/L,茎基和茎中段为材料的增殖系数分别达5.40~6.41、3.41~5.19;茎尖在1/2MS KT 0.1 mg/L IAA 0.5mg/L NAA 0.1 mg/L IBA 2.0 m g/L生根培养24 d,之后,在不加任何激素的MS培养基上培养26 d,根长达4.63~5.05 cm,根数10.9~12.1条。移栽时以椰糠作为基质,成活率达95.20%。     

人参的组织培养及快繁体系的建立

[目的]建立人参的快繁体系。[方法]应用MS培养基添加激素培养法,对人参的茎尖、根尖和幼芽进行愈伤组织诱导,并进行芽分化、芽的继代增殖和生根培养。[结果]结果表明,对诱导芽分化较好的培养基是BA与NAA的组合,最佳培养基激素浓度是MS+BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L。愈伤组织诱导仅出现在MS+BA1.0 mg/L+2,4-D2.0 mg/L和MS+KT0.2 mg/L+2,4-D1.0 mg/L的培养基中,但这两种培养基对芽没有诱导。以MS+BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L的培养基,其继代培养效果较好。[结论]采用组织培养快速繁殖人参,可有效去除病毒,增加繁殖数,确保遗传性状的稳定。     

丹参的组织培养及植株再生

丹参为中国重要中草药,临床上广泛用来治疗心血管疾病。研究丹参的组织培养和植株再生。结果表明,在幼茎、幼叶、花蕾等3种外植体中,幼茎为最佳外植体;6-BA,NAA或2,4-D不同激素组合中,以MS＋6-BA0．5mg／L＋2,4-DO．5mg／L为最佳的愈伤组织诱导培养基,MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L为最佳的芽诱导培养基;IAA,IBA和NAA3种激素中,以1／2MS＋IBA0．5mg／L为最佳的丹参试管苗生根培养基。     

除虫菊愈伤组织诱导研究

以除虫菊种子获得的无菌苗的不同器官为外植体,研究几种基本培养基及NAA、2,4-D或其与BA、KT的组合对愈伤组织的诱导效果,结果表明：不同类型基本培养基中MS有利于子叶、真叶和下胚轴,White有利于根愈伤组织的诱导和生长。不论除虫菊的哪一部分作为外植体,培养基pH值均为5.8较为合适。不同器官外植体诱导愈伤组织的最适植物生长调节剂组合不同,子叶为1.0 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L KT,真叶为1.0-2.0 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/LKT,根为0.5 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L BA或KT,而下胚轴在1.0-2.0mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L BA,0.5-1.0 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L KT,1.0 mg/L NAA＋0.5 mg/L BA,0.5mg/L NAA＋0.5 mg/L KT,0.5 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L BA或KT均可100%诱导愈伤组织。     

红花长寿花愈伤组织的诱导和植株再生研究

试验采用红花长寿花茎段和叶片作为外植体,在附加不同植物激素组合的培养基中对愈伤组织的诱导和植株再生进行研究。结果表明:不带叶柄的叶片在MS 2,4-D1.0mg/L BA0.5mg/L的培养基上对愈伤组织的诱导和增殖效果最好;在MS BA0.25mg/L 2,4-D1.5mg/L GA0.6mg/L的培养基上有利于愈伤组织转绿分化;在MS NAA0.25mg/L BA1.5mg/L GA0.6mg/L的培养基上有利于丛生芽诱导和增殖;在1/2MS NAA0.3mg/L IBA0.7mg/L培养基中生根效果最好。     

不同激素对补血草器官分化的影响

以补血草的带节花梗为材料,在离体条件下研究不同激素对花梗愈伤组织的诱导、不定芽分化、继代培养以及生根的影响,建立和优化离体再生体系,为补血草快速繁殖、种质资源保存以及遗传转化提供有效的途径和技术。结果表明,MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L为补血草花梗愈伤组织诱导的最佳培养基,愈伤组织诱导率最高(89.2%),出愈速度最快(12 d),产生的愈伤组织颜色翠绿,质地紧密;不定芽诱导以MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L的效果最佳,诱导率为74.3%,平均每块愈伤组织诱导的不定芽数为3.6个;在NAA 0.1～0.2 mg/L+6-BA 1.5～2.0 mg/L时的继代增殖效果最好,分化率大于85%,使幼苗数增加3倍以上;生根培养以1/2 MS+IBA 1.0 mg/L+蔗糖20 g/L时的生根率最大,为100%。     

流苏石斛的离体快速繁殖

以流苏石斛茎段为外植体进行离体快速繁殖研究。结果显示：茎段诱导芽的适宜培养基为MS＋BA2.0mg·L^-1＋NAA0.5mg·L-^1＋CH0.5g·L^-1,芽的诱导率达58.3％;培养基Ms＋BA4.0mg·L^-1＋NAA0.5mg·L^-1＋CH0.5g·L^-1可促进丛芽的形成,而丛芽增殖的适宜培养基为MS＋BA2.0mg·L^-1＋NAA0.2mg·L^-1＋CH0.5g·L^-1,增殖系数达6.23;试管苗生根的最佳培养基为1/2 MS＋IBA0.5mg·L^-1＋NAA0.5mg·L^-1,50d后试管苗生根率可达100％。研究还发现,壮苗的适宜培养基为1／2 MS＋BA0.5mg·L^-1＋NAA0.1mg·L^-1＋CH0.2g·L^-1,丛芽在该培养基上培养75d后,可同时完成增殖与生根程库。     

金钱树的组织培养

以金钱树[Zamioculcaszamiifolia(Loddiges)Engler]的幼嫩小叶为外植体,采用幼叶→愈伤组织→丛生芽→完整植株的途径进行繁殖。结果表明:叶片在MS BA2mg/L 2,4-D1.0mg/L PVP0.5mg/L 活性炭0.5mg/L 蔗糖30g/L培养基上暗培养30d,可诱导形成愈伤组织;愈伤组织在MS BA4mg/L KT0.5mg/L 蔗糖30g/L培养基上光照培养25d,可诱导形成丛生芽(丛生芽在继代培养过程中每20～25d可增殖3～5倍);丛生芽接种于MS BA3mg/L NAA0.2mg/L 蔗糖30g/L培养基上壮苗培养4周后,再转入1/2MS BA2mg/L NAA0.5mg/L 蔗糖30g/L培养基上培养30d,可诱导形成完整的根系。