复合酶法制取牛血血红蛋白水解液的工艺研究

利用木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、Protamex和Flavourzyme(风味蛋白酶)对牛血血红蛋白进行水解制备水解动物蛋白,以水解度(DH)为指标对水解过程进行分析,选取中性蛋白酶作为适宜的单酶并研究其酶法水解最适宜的工艺条件.为进一步提高水解度,进行了中性蛋白酶与Flavourzyme复合酶解的研究,并对双酶水解的工艺条件进行了优化,使水解率达到52.88%,比单酶水解时提高了55%.     

山羊乳酪蛋白酶解工艺研究

【目的】确定山羊乳酪蛋白的酶解工艺,为制备山羊乳酪蛋白活性肽奠定基础。【方法】选用中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶,采用对比和正交试验方法,研究山羊乳酪蛋白单酶和复合酶的酶解工艺,测定山羊乳酪蛋白的总肽键物质的量,优选山羊乳酪蛋白的酶解工艺参数。【结果】山羊乳酪蛋白的总肽键物质的量为8.5379mmol/g。单酶中,胰蛋白酶和中性蛋白酶对山羊乳酪蛋白的水解度均较大,木瓜蛋白酶次之,碱性蛋白酶最小;胰蛋白酶对山羊乳酪蛋白的水解度最高,为14.67%,其适宜的酶解工艺为:加酶量2500U/g,pH7.5,50℃下酶解2h。复合蛋白酶中,中性蛋白酶和胰蛋白酶复合及中性蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶3酶复合时的水解度均较大,2种复合酶的水解度、平均肽链长度和平均相对分子量分别为17.34%,21.16%;5.77,4.73和692,567。【结论】在最佳酶解工艺条件下,单酶中,胰蛋白酶和中性蛋白酶对山羊乳酪蛋白水解度均较大,复合酶中,中性蛋白酶、胰蛋白酶复合及中性蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶3酶复合时的水解度均较大。     

南极磷虾酶解工艺的研究

以水解度为指标,探讨中性蛋白酶水解南极磷虾的效果,通过试验筛选木瓜蛋白酶和枯草杆菌中性蛋白酶酶解南极磷虾的工艺条件。结果表明:南极磷虾自溶水解度为28.63%,添加中性蛋白酶可显著提高南极磷虾水解度;木瓜蛋白酶酶解工艺为酶解温度50℃、pH值7.5、酶解时间5 h、酶添加量0.3%,水解度达(42.17±0.17)%;枯草杆菌中性蛋白酶酶解工艺为酶解温度50℃、pH值7.5、酶解时间5 h、加酶量0.4%,水解度达(41.86±0.23)%。     

超声波对双酶水解玉米蛋白的影响

试验对超声场下双酶水解玉米蛋白的酶解反应条件进行了研究,并与恒温水浴条件下玉米蛋白的水解度进行了对照。单因素试验及正交试验结果表明,中性蛋白酶与木瓜蛋白酶按一定比例复合水解的水解度比单独采用其中的一种有所提高:超声功率为1 000 W,超声时间与间歇时间比为2 s∶30 s,底物浓度3%,总酶浓度(中性蛋白酶与木瓜蛋白酶的酶浓度比为2∶1)5%,pH 7.5的条件下,玉米蛋白的水解度可达58.73%。     

多酶法水解河蚬蛋白的工艺研究

以河蚬为原料,水解度和苫味评价为指标,通过单因素和正交试验筛选酶法水解河蚬蛋白的最佳工艺条件.结果表明:河蚬蛋白的较优水解酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶;多酶水解的最佳工艺条件为:木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶按1:2:1 (W/W/W)合同时水解,酶用量0.7%(W/W)、料液比1:2(W/V)、55℃、pH6.5、水解6 h,水解度达5.92%,苦味评分为4.制得的水解液水解度较高,溶液澄清透明,气味较好,具较少腥苦味.     

大豆蛋白酶解物的抗癌活性研究

以大豆分离蛋白为原料,用中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和胃蛋白酶分别对其进行酶解,得到具有抗癌活性的酶解物,测定大豆分离蛋白的水解度和酶解物对胃癌细胞的生长抑制率。结果表明,木瓜蛋白酶酶解物的癌细胞生长抑制率为27.36%,显著高于其他三种酶解物的抗癌活性,其次是中性蛋白酶(21.20%)和碱性蛋白酶(18.01%),酶解物抗癌活性最低的是胃蛋白酶(11.20%)。四种蛋白酶在最适水解条件下作用于大豆分离蛋白时,水解度的排列次序为:碱性蛋白酶中性蛋白酶木瓜蛋白酶胃蛋白酶。大豆分离蛋白的水解度与酶解物的细胞生长抑制率不呈线性关系。     

扇贝加工废弃物蛋白酶解及其酶解产物分子量分布的研究

对用复合酶酶解扇贝加工废弃物制备水解蛋白的工艺进行了研究,通过正交试验方法确定了用两种复合酶酶解的最适水解条件。结果表明,用枯草杆菌中性蛋白酶和风味酶复合酶酶解的最佳酶解参数为:加酶量比为2∶1,温度为65℃,pH为7.0,时间为5 h,水解液氨基酸态氮含量为50.3%,蛋白质水解度为95.5%。用木瓜蛋白酶和风味酶复合酶酶解的最佳酶解参数为:加酶量比为2∶1,温度为65℃,pH为7.0,时间为5 h,水解液氨基酸态氮含量为43.2%,蛋白质水解度为85.0%。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析法对水解产物的分析结果表明,两种混合酶的酶解产物为蛋白肽和游离氨基酸,其相对分子质量均集中分布在585和150左右。     

玉米蛋白粉水解多肽对光磷水蜈蚣的生根抑制活性

以木瓜蛋白酶、中性蛋白酶为水解酶,以玉米蛋白粉为底物,制备出不同酶解时间条件下的玉米蛋白水解多肽。用培养皿生物分析法检测不同玉米蛋白水解多肽在不同浓度(0.5 mg/mL、1 mg/mL、2 mg/mL、5 mg/mL)条件下对光磷水蜈蚣(Kyllinga brevitoliavar.leiolepis)种子生根抑制活性。结果表明:①两种蛋白酶不同水解时间制备的玉米蛋白粉水解多肽对光鳞水蜈蚣种子萌发生根均有抑制作用,且随着浓度增高生根抑制活性增强;②木瓜蛋白酶在水解3 h和6 h制得玉米多肽的生根抑制活性明显优于水解9 h和12 h制得的玉米多肽,而中性蛋白酶在不同水解时间水解玉米蛋白粉所得的水解多肽对光磷水蜈蚣的抑制活性无显著性差异;③木瓜蛋白酶制备的玉米多肽比中性蛋白酶制备的玉米多肽生根抑制活性强,并达到极显著性差异水平(P<0.01)。     

复合酶解法制备乳清蛋白肽工艺条件的研究

乳清蛋白经蛋白酶酶解得到小分子乳清蛋白肽,它具有多种生理活性功能,可以广泛应用于食品和医药等行业.采用复合蛋白酶酶解乳清蛋白,并通过正交试验,确定其优化工艺条件.结果表明,采用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶复合酶酶解乳清蛋白制取乳清蛋白肽的最佳工艺条件是酶比底物值1:12,底物浓度6.0%,胰蛋白酶和木瓜蛋白酶比例2:1,pH值7.5,在45℃条件下酶解7h,其最高水解度可以达到46.5%.     

猪肉蛋白酶法水解优化工艺研究

通过单因素试验和正交试验,研究了猪肉蛋白质酶水解的优化工艺,结果表明:猪肉蛋白质的较优水解酶为木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,其中木瓜蛋白酶水解猪肉蛋白的最适条件为:酶用量2.6%,pH 7.0,55℃,水解3.5 h;中性蛋白酶水解猪肉蛋白的最适条件为:酶用量1.8%,pH 6.5,40℃,水解4.5 h.双酶水解的最适工艺参数为:木瓜蛋白酶与中性蛋白酶按1∶2混合同时水解,总用酶量1.5%,pH 8.0,50℃,水解4.0 h,水解度可达到31.95%,且制得的水解液色泽金黄,澄清透明,无异味.     

响应面法优化牡蛎复合酶水解工艺研究

采用响应面法优化牡蛎的复合酶水解工艺.结果表明:中性蛋白酶与风味蛋白酶按照2∶1复配,在水解温度40℃,水解时间5.68h,水解pH值7.0条件下,牡蛎蛋白水解度可达到32.24%,水解效果最优.验证试验表明,实际蛋白质的水解度与模型预测值相近,因此采用响应面法优化牡蛎酶解工艺,准确可靠.     

酶解制备鸭肉香精前体物的工艺优化

为获得制备鸭肉香精较优的反应基料,采用蛋白酶对鸭肉蛋白进行酶解.结果表明:复合风味蛋白酶和肉类水解专用酶对鸭肉蛋白的水解效果优于木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,前二者复配使用的效果优于单独使用;酶解的最佳工艺条件为酶解温度50℃,酶底物比(酶活性与底物蛋白质质量的比)1500 U/g,初始 pH 8.0,酶比(蛋白酶酶活性的比)为3∶1(复合风味蛋白酶与肉类水解专用酶的酶比);在该条件下水解3 h 得到的酶解液水解度约达36%;用水解度约36%的酶解液参与美拉德反应的产物风味较佳     

斑点叉尾鮰下脚料蛋白酶水解工艺优化

以蛋白质水解度为考察指标,从木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶中筛选水解斑点叉尾鮰下脚料的适宜蛋白酶,并通过单因素试验和正交试验优化工艺条件。结果表明：5种蛋白酶中复合蛋白酶的水解度最高;复合蛋白酶酶解斑点叉尾鮰下脚料的最佳酶解条件为温度55 ℃,时间4 h,pH 9.0,酶质量浓度2 500 U/g,料液比1∶3,在该条件下,蛋白质的水解度为53.26%。     

榛子粕抗氧化肽制备条件的优化及体外模拟消化的研究

为选出最佳的水解蛋白酶,选用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶3种蛋白酶水解榛子粕蛋白,研究单一蛋白酶和复合蛋白酶水解产物的水解度、DPPH自由基清除能力和氨基酸含量,对榛子粕抗氧化肽制备工艺进行优化,分析体外模拟消化前后榛子粕抗氧化肽DPPH自由基清除能力和氨基酸含量的变化。结果表明:木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解产物水解度分别为2.89%,6.26%,9.50%。1N复合蛋白酶水解产物、1A复合蛋白酶水解产物、2NA复合蛋白酶水解产物和2AN复合蛋白酶水解产物水解度分别为6.31%,7.20%,6.25%,4.99%。木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解产物清除DPPH自由基的IC50分别为12.0,4.60和2.53mg·mL~(-1)。1N复合蛋白酶水解产物、1A复合蛋白酶水解产物、2NA复合蛋白酶水解产物和2AN复合蛋白酶水解产物清除DPPH自由基的IC50分别为3.05,3.50,3.25和2.81mg·mL~(-1)。木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解产物氨基酸总量分别为22.08,34.13和41.36g·100g-1。1N复合蛋白酶水解产物、1A复合蛋白酶水解产物、2NA复合蛋白酶水解产物和2AN复合蛋白酶水解产物的氨基酸总量分别为18.18,18.47,26.70和24.49g·100g-1。因此,选用中性蛋白酶为水解榛子粕蛋白的最佳酶源;通过响应面分析,确定制备榛子粕抗氧化肽的最佳工艺条件为:温度43.7℃、时间1.7h、加酶量17000U·g-1,中性蛋白酶水解产物水解度为11.57%、DPPH清除率80.38%、氨基酸含量46.07g·100g-1;体外模拟胃肠消化后,榛子粕抗氧化肽的清除DPPH自由基的IC50升高3.27mg·mL~(-1)、氨基酸总量降低l0.05g·100g-1。     

长白山林蛙肉酶解条件的研究

[目的]优化林蛙肉酶解工艺。[方法]以长白山雄性林蛙肉为原料,选用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶对其进行水解。通过单因素试验和正交试验筛选最佳酶解条件。[结果]酶解效果最好的是中性蛋白酶,其最适酶解条件为pH值6、加酶量7%、底物浓度55%,水解时间110min、温度50℃。在此工艺条件下,水解度达55.02%。[结论]该酶解工艺用酶少、分解快,适合长白山林蛙肉的酶解 更多还原     

复合酶水解鸡肉工艺条件的优化

[目的]为进一步改善鸡胸肉的加工工艺奠定基础。[方法]以蛋白水解度、水解液的鸡香和苦味为指标,比较P+N复合酶、胰蛋白酶、Alcalase、木瓜蛋白酶和精制中性蛋白酶在各自适宜条件下对鸡肉的水解效果。研究液固比、初始pH值、反应温度和反应时间对P+N复合酶水解度的影响,探索P+N复合酶水解鸡肉的最佳工艺条件。[结果]P+N复合酶为水解鸡肉的最佳酶,其水解效果明显优于单酶。各因素对水解度影响程度依次为反应温度>反应时间>液固比>初始pH值,而反应温度对水解反应的影响显著。P+N复合酶水解鸡肉的最佳工艺条件为:加酶量0.2%、反应温度50℃、液固比31:、初始pH值7.0、反应时间8 h。[结论]在该条件下,鸡肉水解蛋白液的水解度达51%～54%,且鸡香浓郁、无苦味。     

双酶分步水解低值鱼蛋白的研究

选用中性蛋白酶、木瓜蛋白酶两种酶对低值鱼蛋白进行分步水解,分析各因素对鱼蛋白水解的影响,以水解度为特征性指标。单因素试验结果表明,先添加中性蛋白酶的水解效果优于先添加木瓜蛋白酶。通过L9(34)正交试验确定水解的最佳条件为水解时间为6 h,中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶量比(g∶g)为3∶1,水解温度为55℃,料液比(m/V,g∶mL)为1∶10,水解效果是最好的,在此条件下水解度为35.85%。     

鹿茸胶原多肽复合酶水解工艺研究

【目的】对鹿茸胶原多肽进行复合酶水解,优化水解工艺,并测定水解液分子量分布。【方法】以碱性蛋白酶和胰蛋白酶为供试酶类,选用酶解时间、pH值、酶解温度、加酶量为影响因素,采用响应面试验设计优化单酶水解条件,根据响应面试验所得到的单酶水解的最适条件,确定双酶复合水解方案。通过Sephadex G25测定鹿茸胶原多肽的分子量分布。【结果】碱性蛋白酶最优水解条件为:酶解时间3.6h,pH值10.50,酶解温度55℃,加酶量4%,水解液的水解度为22.03%;胰蛋白酶最优水解条件为:酶解时间3.2h,pH值8.00,酶解温度50℃,加酶量4.4%,水解液的水解度为15.81%。复合酶水解条件:酶解温度为52.5℃,调节pH值为10.50,加入4%的碱性蛋白酶酶解3.6h;调节pH值至8.00,加入4.4%的胰蛋白酶酶解3.2h,所得水解液的水解度可达33.42%。复合酶水解胶原多肽的分子量分布在400~1 400u。【结论】确定了鹿茸胶原多肽碱性蛋白酶和胰蛋白酶复合水解的工艺条件。     

2种酶水解牛骨粉制备胶原多肽的研究

以自制牛骨粉为原料,水解度为指标,选用II型胶原酶与枯草中性蛋白酶对牛骨粉进行分步水解,采用L9(34)正交试验设计优化2种酶水解牛骨粉的工艺条件.结果表明,II型胶原酶与枯草中性蛋白酶先后对牛骨粉酶解的水解效果比单一的II型胶原酶效果好.2种酶水解的适宜工艺条件:先用II型胶原酶在37℃条件下恒温震荡水解3 h,再用枯草中性蛋白酶在50℃条件下恒温震荡水解3 h,固液比1∶4,酶用量0.3%,2种酶用量比1∶1,pH 7.0,其水解度达16.65%,胶原多肽的分子量主要分布在30～50 kD.     

大黄鱼鱼肉蛋白水解制备抗氧化肽的工艺

以大黄鱼为原料,采用不同蛋白酶(碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和复合蛋白酶)分别水解鱼肉,制备抗氧化肽;研究不同酶的水解效果,筛选出最佳的水解用酶;采用单因素试验,以蛋白水解度及水解液的还原力和超氧阴离子自由基(O-·2)清除力为指标,研究不同水解p H、酶添加量、水解温度、底物浓度和水解时间对水解效果的影响;在此基础上,采用Box-Behnken响应面设计法,以水解液的还原力为评价指标,对水解工艺参数进行优化.结果表明,中性蛋白酶为水解大黄鱼的最适用酶,其最佳工艺条件为:底物浓度26.55%、水解温度46℃、水解时间7.2 h、p H 7.0、酶添加量2400 U·g-1,在此条件下,水解液的还原力达到最大(0.967),此时,O-·2清除力为87.46%,蛋白水解度为36.51%.