库尔勒香梨的苹果茎痘病毒cDNA探针检测技术研究

 以库尔勒香梨叶片和皮层为材料 ,对 2种总RNA提取方法进行了比较研究 ,从中行筛选出了适合库尔勒香梨的提取方法 ;并利用RT PCR反应体系成功合成了生物素标记的cDNA探针 ,在此基础上 ,对影响杂交灵敏度的主要因素进行了试验研究 ,结果表明 ,当探针浓度为 4 0 0ng·ml-1,甲酰胺浓度为 4 5 % ,4 2℃杂交反应 6h ,可获得最高灵敏度。进口硝酸纤维素膜的灵敏度最好 ,基本无背景。Tween2 0的封闭效果比牛血清白蛋白好。对不同组织和不同提取方法提取的总RNA进行了杂交检测 ,结果表     

库尔勒香梨叶片中铁的含量表征及铁空间分布

为了解决库尔勒香梨叶片营养诊断中"铁素黄化悖论"问题,测定了库尔勒香梨正常绿叶和失绿黄化叶片的全铁、有效铁和质外体铁的含量,并在此基础上对全铁和有效铁的表征方法进行了研究。结果表明:香梨叶片产生缺铁黄化的直接原因是缺乏有效铁;缺铁黄化的叶片有时全铁含量相比于正常绿叶并不低;以叶面积为底数来表征香梨叶片铁含量,可以消除"黄化悖论"迷局;香梨叶片中铁的空间分布特征是质外体中占58%~64%。     

利用RT-PCR检测库尔勒香梨苹果茎痘病毒的研究

 以库尔勒香梨新鲜、冷藏、冷冻叶片和皮层为材料,对提取双链RNA (dsRNA)的2种方法和提取总RNA的3种方法进行了分析比较,并对总RNA的提取方法进行了改进,获得了纯度较高、完整性较好的dsRNA和总RNA,在此基础上进行了反转录(RT)和PCR扩增。在国内首次完成了对苹果茎痘病毒(ASPV)的RT-PCR检测,建立了ASPV有效RT-PCR反应体系。用此体系扩增到ASPV一个长约316 bp的片段。实验表明以dsRNA和总RNA为模板均能成功进行RT-PCR检测,且dsRNA优于总RNA。     

库尔勒香梨产生粗皮果的原因分析

库尔勒香梨(以下简称香梨)是原产新疆南部的优良品种,在国内外市场享有较高声誉,已成为重要的出口创汇品种之一.     

土壤因子对库尔勒香梨缺铁失绿症发生的影响

对香梨产区10个点的土壤样品进行理化特性分析,结合黄化病田间调查资料,研究土壤因子对库尔勒香梨缺铁失绿症发生的影响。结果表明,香梨在南疆钙质土壤上叶片失绿黄化是多种土壤因子交互作用的结果。土壤高pH(平均为8.49)和有效铁含量低(平均为12.2mg/kg)是诱发香梨叶片缺铁失绿的两大因素。上层土壤中浓度高达7mmol/L HCO3-对土壤铁的活化与运输有着潜在的影响。土壤中较低的有效铁含量可能与较高的锰、锌、铜含量之间的生理拮抗关系也是导致香梨黄化失绿的原因之一。水溶性钙在土壤表层有累积现象。     

库尔勒香梨花萼发育规律研究

通过田间调查分析,库尔勒香梨花萼脱落高峰在盛花后12 d,多数幼果在盛花后8 d即可看出花萼脱落与否.同一花序中随序位升高,花萼脱落能力增强.萼端突起的时间是6月底.脱萼果萼端突起是因为花萼脱落时有较长的萼筒存在.人工剪萼可使多数宿萼果发育成洼顶果.花萼的脱落同果顶凹陷成正相关,花萼的宿存与果顶突起成正相关,相关系数分别是0.994和0.957.     

应用同工酶对梨属下种、品种及芽变的鉴定

用POD和EST同工酶分析26个梨品种.POD同工酶可将26份试验材料中的12个样品区分出来,EST同工酶可将7个样品区分出来.综合两种同工酶谱带可对15个品种(含2个芽变)进行鉴定.     

香梨优斑螟的发生及综合防治

本文调查了新疆库尔勒市香梨优斑螟的发生规律、危害特点,并提出了综合防治措施。     

库尔勒香梨脉黄病毒RT-PCR检测技术研究

 以库尔勒香梨叶片和皮层为材料 ,对总RNA提取方法进行了研究 ,从中筛选出了适合库尔勒香梨总RNA的提取方法。结果表明 ,要获得良好的RT PCR扩增 ,RT体系中dNTPs浓度、互补引物、AMV、模板的浓度要分别达到 0 .1mmol·L-1、0 .2 μmol·L-1、0 .0 5U·μl-1、0 .0 1μg·μl-1以上。此外 ,使用RNasin能有效抑制RT体系中RNase对病毒RNA的降解作用 ,可使RT过程顺利进行 ;PCR体系中dNTPs浓度至少要达到 0 .1mmol·L-1,0 .2～ 0 .3mmol·L-1可以获得最佳的扩增效果 ;TaqE浓度要达到 0 .0 15U·μl-1以上 ;引物浓度适宜范围 0 .3～ 0 .7μmol·L-1;Mg2 + 要达到 1.2 6mmol·L-1以上。     

工程造价成本加利润的投标方法探讨

针对目前工程投标造价的新情况．具体探讨了成本加利润的编制内容、编制方法，并提出了编制的策略和技巧：合理确定工、料、机价格；采取不平衡报价；慎重对待暂定金额。