| 库尔勒香梨脉黄病毒RT-PCR检测技术研究 |
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| 引用本文： | 牛建新,刘连科,王小兵,覃伟铭.库尔勒香梨脉黄病毒RT-PCR检测技术研究[J].中国农业科学,2003,36(5):561-566. |
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| 作者姓名： | 牛建新 刘连科 王小兵 覃伟铭 |
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| 作者单位： | 石河子大学新疆作物高产研究中心,石河子,832003 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 0 60 0 5 3 )，教育部科学技术研究重点资助项目 |
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| 摘 要： | 以库尔勒香梨叶片和皮层为材料 ,对总RNA提取方法进行了研究 ,从中筛选出了适合库尔勒香梨总RNA的提取方法。结果表明 ,要获得良好的RT PCR扩增 ,RT体系中dNTPs浓度、互补引物、AMV、模板的浓度要分别达到 0 .1mmol·L-1、0 .2 μmol·L-1、0 .0 5U·μl-1、0 .0 1μg·μl-1以上。此外 ,使用RNasin能有效抑制RT体系中RNase对病毒RNA的降解作用 ,可使RT过程顺利进行 ;PCR体系中dNTPs浓度至少要达到 0 .1mmol·L-1,0 .2～ 0 .3mmol·L-1可以获得最佳的扩增效果 ;TaqE浓度要达到 0 .0 15U·μl-1以上 ;引物浓度适宜范围 0 .3～ 0 .7μmol·L-1;Mg2 + 要达到 1.2 6mmol·L-1以上。
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| 关 键 词： | 库尔勒香梨 梨脉黄病毒 RT-PCR |
| 修稿时间： | 2002年9月12日 |
Studies on RT-PCR Detection Technology of Viral Diseases in Kuala Pear |
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| NIU Jian xin,LIU Lian ke,WANG Xiao bing,QIN Wei ming.Studies on RT-PCR Detection Technology of Viral Diseases in Kuala Pear[J].Scientia Agricultura Sinica,2003,36(5):561-566. |
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| Authors: | NIU Jian xin LIU Lian ke WANG Xiao bing QIN Wei ming |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Kuala pear Pear vein yellow virus (PVYV) RT PCR |
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