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库尔勒香梨的苹果茎痘病毒cDNA探针检测技术研究
引用本文:牛建新,朱军,马兵钢,覃伟铭,王小兵,吴忠华.库尔勒香梨的苹果茎痘病毒cDNA探针检测技术研究[J].中国农业科学,2004,37(1):99-99.
作者姓名:牛建新  朱军  马兵钢  覃伟铭  王小兵  吴忠华
作者单位:1. 石河子大学农学院园艺系,石河子,832003;新疆兵团绿洲生态农业重点实验室,石河子,832003;沈阳农业大学园艺学院,沈阳,110161
2. 石河子大学农学院园艺系,石河子,832003
3. 石河子大学农学院园艺系,石河子,832003;新疆兵团绿洲生态农业重点实验室,石河子,832003
基金项目:国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 0 60 0 5 3 ),教育部科学技术研究重点资助项目 ( 0 2 180 ),兵团科委资助项目 (NKB0 2SDXNK0 1SW ),国家科技攻关计划引导资助项目 ( 2 0 0 3BA5 46C)
摘    要: 以库尔勒香梨叶片和皮层为材料 ,对 2种总RNA提取方法进行了比较研究 ,从中行筛选出了适合库尔勒香梨的提取方法 ;并利用RT PCR反应体系成功合成了生物素标记的cDNA探针 ,在此基础上 ,对影响杂交灵敏度的主要因素进行了试验研究 ,结果表明 ,当探针浓度为 4 0 0ng·ml-1,甲酰胺浓度为 4 5 % ,4 2℃杂交反应 6h ,可获得最高灵敏度。进口硝酸纤维素膜的灵敏度最好 ,基本无背景。Tween2 0的封闭效果比牛血清白蛋白好。对不同组织和不同提取方法提取的总RNA进行了杂交检测 ,结果表

关 键 词:库尔勒香梨  苹果茎痘病毒  cDNA探针

Studies on cDNA Probe Detection Technology of Apple Stem Pitting Virus in Korla Pear
NIU Jian-xin ,,ZHU Jun ,MA Bing-gang ,QIN Wei-ming ,WANG Xiao-bing ,WU Zhong-hua.Studies on cDNA Probe Detection Technology of Apple Stem Pitting Virus in Korla Pear[J].Scientia Agricultura Sinica,2004,37(1):99-99.
Authors:NIU Jian-xin      ZHU Jun  MA Bing-gang    QIN Wei-ming  WANG Xiao-bing  WU Zhong-hua
Institution:NIU Jian-xin 1,2,3,ZHU Jun 1,MA Bing-gang 1,2,QIN Wei-ming 1,WANG Xiao-bing 1,WU Zhong-hua 1
Abstract:
Keywords:Korla pear  Apple stem pitting virus (ASPV)  cDNA probe
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