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以库尔勒香梨叶片和皮层为材料 ,对 2种总RNA提取方法进行了比较研究 ,从中行筛选出了适合库尔勒香梨的提取方法 ;并利用RT PCR反应体系成功合成了生物素标记的cDNA探针 ,在此基础上 ,对影响杂交灵敏度的主要因素进行了试验研究 ,结果表明 ,当探针浓度为 4 0 0ng·ml-1,甲酰胺浓度为 4 5 % ,4 2℃杂交反应 6h ,可获得最高灵敏度。进口硝酸纤维素膜的灵敏度最好 ,基本无背景。Tween2 0的封闭效果比牛血清白蛋白好。对不同组织和不同提取方法提取的总RNA进行了杂交检测 ,结果表 相似文献
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利用RT-PCR检测库尔勒香梨苹果茎痘病毒的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
以库尔勒香梨新鲜、冷藏、冷冻叶片和皮层为材料,对提取双链RNA (dsRNA)的2种方法和提取总RNA的3种方法进行了分析比较,并对总RNA的提取方法进行了改进,获得了纯度较高、完整性较好的dsRNA和总RNA,在此基础上进行了反转录(RT)和PCR扩增。在国内首次完成了对苹果茎痘病毒(ASPV)的RT-PCR检测,建立了ASPV有效RT-PCR反应体系。用此体系扩增到ASPV一个长约316 bp的片段。实验表明以dsRNA和总RNA为模板均能成功进行RT-PCR检测,且dsRNA优于总RNA。 相似文献
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从形态学、细胞学、组织解剖学及孢粉学等多个角度对库尔勒香梨芽变沙01进行比较鉴定,探讨其变异来源,以期为生产栽培和遗传育种提供理论依据。结果表明,普通香梨为二倍体,而沙01是四倍体巨型芽变;相对于香梨,芽变沙01的生长势强,萌芽力强而成枝力弱,枝条粗、长显著增大,叶片有缩短加宽的趋势,坐果率和单果质量也显著提高;花期和枝叶生长物候期与香梨无差异,但果实成熟期明显提前;沙01的气孔显著小于香梨但气孔密度大于香梨,说明组织发生层的LⅠ层发生变异;花粉超微结构与叶片组织显微结构均与香梨有较大差异,说明组织发生层的LⅡ层发生变异。多方面比较鉴定证明沙01在本质上发生变异,结合其植株性状的外在表现,可以通过加强田间管理把其作为一个新品种推广栽培。 相似文献
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生物有机肥对库尔勒香梨果实品质和净光合速率的影响 总被引:7,自引:3,他引:4
【目的】田间施用生物有机肥和叶面喷施有机叶面肥对库尔勒香梨果实品质的影响。【方法】采用不同的小区实验,对选定的库尔勒香梨树进行不同的基肥和叶面肥处理。【结果】在田间施用不同的生物有机肥和喷施有机叶面肥对果实的硬度和可滴定酸的影响无显著性差异。田间施用生物有机肥和对照相比提高了可溶性糖含量的17%~46%,石细胞数目减少了15%~35%。有机叶面肥处理与对照相比提高了可溶性糖含量的2%~30%,石细胞数目减少了5%~24.6%。与田间施用化肥处理相比,田间施用生物有机肥提高了净光合速率2%~40%。叶面肥处理提高了叶片净光合速率的27%~100%。【结论】施用生物有机肥和喷施有机叶面肥,能够明显提高库尔勒香梨果实品质和净光合率。 相似文献
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库尔勒香梨脉黄病毒RT-PCR检测技术研究 总被引:5,自引:0,他引:5
以库尔勒香梨叶片和皮层为材料 ,对总RNA提取方法进行了研究 ,从中筛选出了适合库尔勒香梨总RNA的提取方法。结果表明 ,要获得良好的RT PCR扩增 ,RT体系中dNTPs浓度、互补引物、AMV、模板的浓度要分别达到 0 .1mmol·L-1、0 .2 μmol·L-1、0 .0 5U·μl-1、0 .0 1μg·μl-1以上。此外 ,使用RNasin能有效抑制RT体系中RNase对病毒RNA的降解作用 ,可使RT过程顺利进行 ;PCR体系中dNTPs浓度至少要达到 0 .1mmol·L-1,0 .2~ 0 .3mmol·L-1可以获得最佳的扩增效果 ;TaqE浓度要达到 0 .0 15U·μl-1以上 ;引物浓度适宜范围 0 .3~ 0 .7μmol·L-1;Mg2 + 要达到 1.2 6mmol·L-1以上。 相似文献