苯基吡啶酮衍生物影响猪δ冠状病毒复制的作用分析

本研究旨在探讨苯基吡啶酮衍生物JIB-04对猪δ冠状病毒（porcine deltacoronavirus,PDCoV）的抗病毒作用,并初步研究可能的作用机制。首先应用CCK-8方法检测不同浓度JIB-04作用后的细胞活力,并计算半数毒性浓度（CC₅₀）和半数有效浓度（EC₅₀）。应用TCID₅₀方法检测JIB-04预处理和共处理对PDCoV复制的影响,检测JIB-04处理对PDCoV吸附或入侵细胞的影响。最后,应用qRT-PCR、TCID₅₀和Western blot方法检测JIB-04处理对不同时间点病毒复制的影响。结果表明,JIB-04在所有受试浓度下均不影响LLC-PK细胞的活力,CC₅₀>640 μmol·L^-1,EC₅₀=0.216 μmol·L^-1,SI指数>2 963。与未处理的病毒感染组相比,JIB-04处理极显著降低了PDCoV的滴度（P<0.001）,但对PDCoV吸附和入侵过程没有影响。感染6 h后,与未处理的病毒感染组相比,JIB-04处理组PDCoV滴度极显著下降（P<0.01）;感染12和24 h后,PDCoV滴度、基因组拷贝数、N蛋白表达水平均极显著下降（P<0.01）。JIB-04的细胞毒性较低,药物选择性指数较高,在体外能抵抗PDCoV感染,可以作为潜在的抗病毒药物。在PDCoV感染过程中,JIB-04能够抑制病毒核酸和蛋白质的合成,抑制病毒的复制。     

利用乳汁体细胞研究共轭亚油酸钙对奶牛乳腺基因表达的作用

8头泌乳中期的奶牛被随机分为2组，分别是对照组（每头牛：基础日粮＋棕榈酸钙200g／d）和试验组（每头牛：基础日粮＋共轭亚油酸钙200g／d），试验期14d，检测了奶产量、乳成分，分析奶牛的血液变化，并采用荧光定量PCR对乳汁体细胞中脂蛋白脂酶（LPL）、乙酰辅酶A羧化酶（ACACA）的基因表达进行检测。结果显示，与对照组相比，试验组奶牛的乳产量、乳蛋白、乳糖和乳汁体细胞含量没有显著影响，但是显著降低了乳脂肪含量（P〈0．05），对照组和试验组奶牛乳脂肪含量分别为0．0326g／mL和0．0244g／mL。检测血液指标发现，共轭亚油酸钙显著升高了奶牛血液中高密度脂蛋白的含量（P〈0．05）。基因分析发现，试验组奶牛乳汁体细胞中LPL、ACA—CA的基因表达显著下调，表明共轭亚油酸钙抑制了奶牛乳腺细胞脂肪酸合成酶的基因表达。     

奶山羊不同锌源的消化吸收规律及适宜添加量

明确奶山羊日粮中不同锌源的适宜添加量及消化吸收率,为配制饲料选择合适的锌源提供指导。本研究以安装消化道三位点瘘管的关中奶山羊为试验对象,采用连续灌注的方法,从瘤胃分别灌注不同梯度的硫酸锌（ZnSO4）溶液和复合氨基酸螯合锌（Zn-AA）溶液,分别采集十二指肠食糜、回肠食糜、粪和血清样品,检测锌含量,计算奶山羊肠道的消化率,确定不同锌源的适宜添加水平。结果表明：1）奶山羊对2种锌源的消化率表现为先升高后降低的变化趋势,Zn-AA的全肠道消化率高于ZnSO4,分别为（70.01±1.8）%和（65.41±8.2）%;2）奶山羊对锌的主要吸收部位在小肠,大肠也有一定的吸收能力,血清锌与食糜锌水平的消化率变化同步,而与不同锌源的消化率呈负相关;3）ZnSO4的适宜添加水平为40mg/kg（RM）（瘤胃内容物）,选择添加范围为40～60mg/kg（RM）;Zn-AA的适宜添加水平为60mg/kg（RM）,选择添加范围为40～80mg/kg（RM）。奶山羊小肠和大肠对2种锌源均可消化吸收,相同水平下奶山羊对Zn-AA的消化率高于ZnSO4,血清锌水平与添加的锌水平和锌源有关,消化道对Zn-AA有更高的耐受量。     

CD147基因在家兔肠道的克隆与结构预测

基于电子延伸序列,克隆并分析兔CD147基因.采用兔十二指肠黏膜组织提取总RNA,进行RT-PCR反应,测序并进行结构预测.克隆的兔CD147基因包含一个完整的开放阅读框架,全长为810 bp,编码由270个氨基酸残基组成的CD147前体蛋白,推导的氨基酸序列信号肽为1～16个氨基酸.氨基酸序列与牛、人、褐鼠、野猪的同源性分别为62.5%,65.9%,59.5%和66.3%,三级结构预测表明CD147具有2个免疫球蛋白类似区.试验成功克隆了兔CD147基因,注册到GenBank(Accession.EU650668),并预测其三级结构,为进一步研究其生物学功能奠定基础.     

猪硫辛酸合成酶基因的克隆及组织表达

本试验通过电子延伸及RT-PCR技术克隆猪硫辛酸合成酶(lipoic acid synthase,Lias)基因,并进一步研究了该基因在猪体内组织的表达分布。基于电子延伸序列设计1对引物,成功克隆了猪Lias基因(GenBank登录号:JN797612.1),并进行了序列分析,同时利用RT-PCR方法分析了Lias基因的组织表达规律。克隆的猪Lias基因长度为1119 bp,包括1个完整的开放阅读框,编码372个氨基酸;克隆的猪Lias基因与小鼠、褐鼠、人、牛的核苷酸序列同源性分别为71.5%、69.0%、77.3%、70.4%;推导的cDNA编码区(CDS)的氨基酸序列与小鼠、褐鼠、人、牛的同源性分别为91.5%、79.4%、89.4%、88.2%;构建的系统进化树结果显示,猪与小鼠、褐鼠的亲缘关系最近;组织表达分布结果表明,Lias基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、十二指肠、空肠、直肠、回肠、脂肪、皮肤和肌肉中都有表达;Gel-Pro软件分析结果表明,Lias基因在肾脏和脂肪组织中表达丰度最高,其次是直肠和回肠。     

不同饲养模式对奶牛血液生化指标及激素含量的影响

本试验旨在研究不同饲养模式对奶牛血清生化指标及激素含量的影响。分别选择粗放饲养（EP）、集约化饲养（CP）和不完全集约化饲养（IP）模式下体重、胎次、泌乳日龄相近的健康奶牛各30头,采集血样,检测血液中各项生化指标及代谢相关激素,分析其与奶牛不同饲养模式的关系。结果表明,CP型、IP型奶牛血液中血糖（GLU）、白蛋白（ALB）、非酯化脂肪酸（NEFA）、β-羟丁酸（BHB）、谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、脂多糖（LPS）和组胺（HIS）含量与EP型相比有升高的趋势,而血液中免疫球蛋白（IgG、IgA）、多胺（TA）含量则显著低于EP型（P<0.05）;CP型、IP型奶牛血液中胰岛素（INS）、胰岛素/胰高血糖素（INS/GC）、甲状腺素（T3）、生长激素（GH）含量与EP型相比有升高趋势,而血液中胰高血糖素（GC）含量则低于EP型。综上所述,不同饲养模式对奶牛血液生化指标及相关激素分泌有不同程度的影响,其中以CP型饲养模式较好,且CP型>IP型>EP型。     

自拟复方中药对肉鸡抗氧化功能的影响

随着社会的发展和人们生活水平的提高,越来越多的人关注食品卫生与安全.这也要求畜牧业在发展的过程中必须少加或不加抗生素,以减少其残留对人的危害.许多学者认为中草药可以提高机体的抵抗力,抵抗多种细菌和病毒的攻击.现已证实某些中草药的疗效与其抗氧化作用密切相关.已发现的植物药抗氧化成分有黄酮类、皂苷类、多糖类、有机酸类、萜烯等,这些物质通过清除人体内自由基,还原氧化物质,从而达到保护机体的作用.     

猪乳脂肪球表面因子8的克隆与表达分布

基于电子延伸序列,本试验成功克隆了猪乳脂肪球表面因子8（MFGE8）基因（GenBank登录号：EU559724）并进行了序列分析,同时利用RT-PCR方法分析了MFGE8基因的组织分布规律。序列分析结果表明MFGE8开放读码框全长为1296bp,编码431个氨基酸残基的多肽链,克隆的MFGE8基因与人、大鼠、小鼠、牛的同源性分别为71．9％、78．7％、79．1％、87．7％,推测的氨基酸序列的同源性分别为65．7％、74．0％、74．0％、84．5％。氨基酸序列N端含有Notch样“EGF”结构,C端含有FA58C结构域。构建的系统发育树显示猪与牛的亲缘关系最近。组织表达分析结果表明MFGE8在乳腺中表达最高,在大脑中表达量最低。