月季ISSR反应体系的优化

以萨曼莎月季为材料,对影响ISSR-PCR扩增的主要影响因子进行了优化,建立了适于月季的ISSR反应体系:25μl反应体积中,1×Buffer、1.5 mmol/L Mg2 、1 U Taq DNA聚合酶、0.6μmol/L引物、0.48 mmol/LdNTPs、20 ng模板DNA;并将该优化体系应用于其他5个ISSR引物和6个月季品种,证实了该体系的适用性和稳定性。     

RAPD标记鉴定果树芽变的可行性分析

在综合分析果树芽变的遗传特点以及RAPD标记技术的原理与存在问题的基础上，结合已有的研究报道，对RAPD标记应用于果树芽变鉴定中的可行性进行了探讨。对于不同的果树芽变类型，RAPD标记技术表现出不同的鉴定可行性。同时，对某些有关的问题提出了相应的建议。     

不同保鲜处理对即食菠萝质量变化的影响

新鲜菠萝经机械削皮、去果眼、切分和清洗后用４种保鲜方法处理,分虽在４～５和１４～１５℃下贮存,并测定菠萝的呼吸强度、可溶性固形物和可滴定酸含量,菌落总数、大肠菌群、霉菌和酵母及致病菌,进同时行色、香、味和质地等的感官评定。试验结果表明,含０．２～０．４ｇ／１００ｍＬ食盐、８～１２ｇ／１００ｍＬ蔗糖和０．３～０．５ｇ／１００ｍＬ柠檬酸的溶液于６６～７５℃处理３～６ｍｉｎ能使菠萝的生命活动维持在较低水平,保持菠萝原有的新鲜状况,且产品的各项微生物指标均符合即食产品的卫生要求。产品贮存在１４～１５℃下７ｄ或４～４℃下１４ｄ均无明显的质量变化。据此提出了即食菠萝产品的质量指标和要求。     

秋水仙碱离体诱导半枝莲多倍体的研究

本研究以秋水仙碱为染色体加倍剂,采用液体浸泡法对半枝莲茎尖进行离体诱导.结果表明,以0.2％的秋水仙碱浸泡4h的诱导效果最佳,外植体存活率为15.0％,多倍体诱导率达到50.0％.形态学观测结果表明,与对照植株相比,变异植株形态特征变化明显,植株高度降低,节间变短,叶型发生改变.变异植株的气孔变大,气孔密度降低,保卫细胞中叶绿体数增加.根尖染色体计数结果表明,对照植株的染色体数目为2n=2x=26,变异植株的染色体数目为2n=4x=52.流式细胞仪检测结果表明,获得的变异株为二倍体和四倍体的嵌合体.     

番茄宝大906高频再生系统的建立及其潮霉素选择压的测定

以番茄宝大906品种为试材,通过对其子叶、下胚轴的离体培养,研究了不同6-BA/NAA植物生长物质浓度配比对愈伤组织诱导、不定芽再生及生根的影响.另外,还测定了潮霉素选择压.结果表明:以子叶和下胚轴为外植体诱导愈伤组织的最适培养基分别是MS+ 2.0 mg,/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA和MS+ 2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA;诱导芽分化的最适培养基均为:MS+ 2.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA,子叶的芽分化率高达93.5％;不定芽适宜的生根培养基为MS+0.1 m g/L NAA;子叶、下胚轴的潮霉素选择压分别以20、40 mg/L为宜.     

ACC合酶反义基因转化洋桔梗Double Mariachi Pink的研究

以洋桔梗(Eustoma graniflorum)品种Double Mariachi Pink为试验材料,在已建立的洋桔梗高频再生体系和高效稳定遗传转化体系的基础上,将PBI121 - ACC合酶反义基因片段(1008 bp)通过农杆菌介导法转化洋桔梗,通过高频再生获得116株抗性苗.再生抗性苗在生根培养基1/2MS+NAA0.1 mg/L+ Km 15 mg/L上生根筛选获得了55株正常生根的植株;对其中随机挑选的8个株系进行PCR鉴定和GUS表达检测,在增殖筛选培养基MS+6 -BA 0.1 mg/L+ NAA 0.05 mg/L +Km 30 mg/L+ Cb 100 mg/L上初步筛得到5个PCR阳性株系,其中4株GUS检测呈阳性;5个PCR阳性株系经PCR - Southern杂交鉴定得到1株阳性植株.将阳性株系出瓶移栽,其平均花期为24d.     

豇豆几丁质酶的诱导与纯化

用不同浓度的西瓜枯萎病菌的细胞壁碎片及孢子混合液处理‘早熟二号’豇豆幼苗 ,诱导几丁质酶。结果表明 ,以浓度为 0 .2 5mg/mL诱导 4d的效果最好。植株不同部位表现相同诱导活力的试验结果提示 ,西瓜枯萎病菌诱导液对‘早熟二号’豇豆几丁质酶的诱导是系统性的。经热变性 (6 0℃ ,30min)、硫酸铵沉淀 (6 0 %饱和度 ,4℃ )、亲和层析 (以再生的脱乙酰几丁质为层析介质 )纯化程序后 ,豇豆几丁质酶被纯化至均一程度 ,经SDS -PAGE电泳显示单一条带 ;N端氨基酸残基分析结果为EQCGS。     

不同豇豆品种几丁质酶粗提液对尖镰孢菌生长的影响

以南京地区栽培较多的13个豇豆品种为试材, 分别测定了它们幼苗根系粗酶抽提液中的几丁质酶活性及对西瓜尖镰孢菌生长的抑制作用, 并分析了两者之间的关系。结果表明, 各供试豇豆品种都具有几丁质酶活性, 对西瓜尖镰孢菌的生长都具有抑制作用。早熟二号豇豆的几丁质酶活性高,且比对照长白七号菜豆和新红宝西瓜对西瓜尖镰孢菌生长的抑制作用强, 但并非所有品种上述两者之间都呈正相关的。试验结果提示, 在对西瓜尖镰孢菌生长影响方面, 除了几丁质酶之外, 可能还存在其它生物因素的作用; 或者几丁质酶本身亦有抑菌活性强弱甚至有无之别。     

烟草品种Xanthi NN碱性β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与生物信息学分析

烟草碱性β－1,3－葡聚糖酶具有较强的抗真菌病害等作用。本研究根据烟草Samsun与抗真菌作用有关的碱性8—1,3－葡聚糖酶基因序列设计引物,以烟草（Nicotiana tabacum）品种Xanthi NN基因组DNA为模板,进行PCR扩增,后将扩增产物与pUC57－T载体重组,再以该重组体转化大肠杆菌DHSα,在对阳性克隆进行鉴定后测序,并对其编码酶蛋白进行了一级、二级、三级结构及蛋白质同源性比较等生物信息学分析。研究结果表明,该基因全长1868bp,包含2个外显子和1个内含子;除终止密码子外,共编码359个氨基酸（GenBank登录号：EU867448）。该酶分子量为28．4kDa,pI为9．72,是一个碱性蛋白;具有多个螺旋、转角、延伸链和无规卷曲等二级结构,其中α－螺旋占35．65％,β－转角占5．57％,延伸链占19．22％,无规卷曲占39．55％;三级结构同源建模预测显示,它与香蕉（Musa supientum）β－1,3－葡聚糖酶（PDB number 2cygA）具有60％的一致性;推测该酶蛋白与颠茄（Atropa belladonna）、马铃薯（Solanum tuberosum）等茄科植物的β－1,3－葡聚糖酶编码序列同源性分别达到89％和81％。本研究结果为进一步开展烟草抗真菌的β—1,3－葡聚糖酶的基因工程研究奠定了重要基础。