ACC合酶反义基因转化洋桔梗Double Mariachi Pink的研究 |
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引用本文: | 孙晶,王轶,陈崇顺,邹爱兰,廖静,赵晓潘,乔宁宁,邓文汉.ACC合酶反义基因转化洋桔梗Double Mariachi Pink的研究[J].江苏农业科学,2012,40(4):27-31. |
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作者姓名: | 孙晶 王轶 陈崇顺 邹爱兰 廖静 赵晓潘 乔宁宁 邓文汉 |
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作者单位: | 南京师范大学生命科学学院/江苏省生物多样性与生物技术重点实验室,江苏南京,210046 |
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基金项目: | 国家理科基地科研训练项目(编号:1103507);江苏省自然科学基金重点项目(编号:BK2001206) |
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摘 要: | 以洋桔梗(Eustoma graniflorum)品种Double Mariachi Pink为试验材料,在已建立的洋桔梗高频再生体系和高效稳定遗传转化体系的基础上,将PBI121 - ACC合酶反义基因片段(1008 bp)通过农杆菌介导法转化洋桔梗,通过高频再生获得116株抗性苗.再生抗性苗在生根培养基1/2MS+NAA0.1 mg/L+ Km 15 mg/L上生根筛选获得了55株正常生根的植株;对其中随机挑选的8个株系进行PCR鉴定和GUS表达检测,在增殖筛选培养基MS+6 -BA 0.1 mg/L+ NAA 0.05 mg/L +Km 30 mg/L+ Cb 100 mg/L上初步筛得到5个PCR阳性株系,其中4株GUS检测呈阳性;5个PCR阳性株系经PCR - Southern杂交鉴定得到1株阳性植株.将阳性株系出瓶移栽,其平均花期为24d.
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关 键 词: | 洋桔梗 ACC合酶反义基因 遗传转化 PCR检测 PCR-Southern杂交检测 |
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