月季ISSR反应体系的优化

以萨曼莎月季为材料,对影响ISSR-PCR扩增的主要影响因子进行了优化,建立了适于月季的ISSR反应体系:25μl反应体积中,1×Buffer、1.5 mmol/L Mg2 、1 U Taq DNA聚合酶、0.6μmol/L引物、0.48 mmol/LdNTPs、20 ng模板DNA;并将该优化体系应用于其他5个ISSR引物和6个月季品种,证实了该体系的适用性和稳定性。     

秋水仙碱离体诱导半枝莲多倍体的研究

本研究以秋水仙碱为染色体加倍剂,采用液体浸泡法对半枝莲茎尖进行离体诱导.结果表明,以0.2％的秋水仙碱浸泡4h的诱导效果最佳,外植体存活率为15.0％,多倍体诱导率达到50.0％.形态学观测结果表明,与对照植株相比,变异植株形态特征变化明显,植株高度降低,节间变短,叶型发生改变.变异植株的气孔变大,气孔密度降低,保卫细胞中叶绿体数增加.根尖染色体计数结果表明,对照植株的染色体数目为2n=2x=26,变异植株的染色体数目为2n=4x=52.流式细胞仪检测结果表明,获得的变异株为二倍体和四倍体的嵌合体.     

药用植物半枝莲的离体快繁

以茎尖为外植体进行了离体快繁研究。利用6-BA×IBA和6-BA×NAA两种激素组合诱导丛生芽,6-BA×IBA激素组合的最佳增殖培养基是MS+6-BA0.5 mg/L+IBA0.1 mg/L,增殖系数可达6.5;6-BA×NAA激素组合的最佳增殖培养基是MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0mg/L,增殖系数可达6.1;两种组合无显著性差异。在MS基本培养基上即可生根且长势良好,生根率为100%;诱导丛生芽试验中6-BA浓度不能超过0.5 mg/L,否则会有愈伤组织出现。     

洋桔梗高频再生系统的建立及其卡那霉素敏感性测定

以Double Mariachi Pink洋桔梗叶片为外植体,研究了切割方式、培养基中6-BA与NAA配比对其不定芽分化的影响以及叶片不定芽分化对卡那霉素(Km)的敏感性。结果表明:五刀切与三刀切对不定芽分化数量的影响无显著性差异;MS 1.0 mg/L6-BA为叶片不定芽分化的最适培养基,不定芽分化率达100%,在1.0 cm×1.0 cm叶块上的不定芽分化数平均达25.4;25 mg/L Km为抑制叶片不定芽分化的最低浓度。